谷胱甘肽中文概述

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1、谷胱甘肽1谷胱甘肽（GSH）结构与功能1.1GSH的结构特征1.2GSH的生理功能和应用1.3总谷胱甘肽测定方法2几种谷胱甘肽的检测方法2.1比色法2.2荧光法2.3高效液相色谱法（HPLC）2.4DTNB法2.5碘量法3几种谷胱甘肽的制备方法3.1　溶剂提取法3.1.1　谷胱甘肽的提取3.1.2　谷胱甘肽的分离纯化3.2　化学合成法3.3　酶合成法3.4　发酵法谷胱甘肽（Glutathione）1谷胱甘肽（GSH）结构与功能1.1GSH的结构特征GSH由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸通过肽键形成，分子中有一特殊的γ-肽键，即由谷氨酸的γ-COOH与半胱氨酸的α-NH2缩合成的肽键，它不同于蛋白质

2、分子中的普通肽键。GSH为白色晶体，易溶于水、低浓度乙醇水溶液、液氨和二甲基甲酰胺。2分子GSH脱氢后以二硫键相连形成氧化型谷胱甘肽（GSSG），又称谷胱甘肽二硫化物，多以水合物形式存在，是溶于水的白色晶体。胱甘肽的相对分子质量为307.33;熔点为189～193℃(分解);溶于水、稀醇、液氨和二甲基甲酰胺,不溶于醇、醚和丙酮;谷胱甘肽固体较为稳定,水溶液在空气中则易被氧化[5]。两分子GSH的活泼巯基氧化脱氢转变为一分子GSSG,但只有GSH才具有生理活性。1.2GSH的生理功能和应用GSH分子含有γ-谷氨酰基和活性巯基，是GSH许多重要生理功能的结构基础。GSH在红细胞中作为巯基缓冲剂存

3、在，维持血红蛋白和其它红细胞蛋白质的半胱氨酸残基处于还原状态。GSH还广泛存在于其它正常细胞中，有很强的亲和力，能与多种化学物质及其代谢物结合，清除体内氧自由基及其它自由基，具有保护肝细胞膜、促进肝酶活性、抗氧化、解毒等作用，是人体细胞内的主要代谢调节物质。GSH还在蛋白质和DNA合成、物质运输、酶活性、新陈代谢及细胞保护等生物学功能中起着直接或间接的作用。它还是许多酶反应的辅基，可作为抗氧化剂保护生物分子蛋白的巯基，清除体内过多的自由基，参与体内三羧酸循环及糖代谢，具有解毒、预防糖尿病、癌症及消除疲劳等作用GSH广泛应用于食品领域，如加入酸奶和婴儿食品起类似维生素C的稳定作用；防止水果罐头

4、水果褐变在面制品中起还原和强化氨基酸作用；缩短面包混揉时间GSH在与谷氨酸钠、核酸系呈味物质或其混合物共存时具有肉类风味；GSH可抑制肉食类、鱼类和海鲜类食品的核酸分解，1.3总谷胱甘肽测定方法(营养学报)NADP2GSHDTNB↑↑GR↓↓H++NADP(NADPH)GSSG2TNB+2H+NADP(NADPH):氧化型（还原型）辅酶IGR:谷胱甘肽还原酶在次反应中，NADPH量逐渐减少，TNB量逐渐增加，TNB在412nm吸收增加的速率与总GSH量呈正比。由于GSH和GSSG循环交替，周而复始总量不变，故称此为循环法。2几种谷胱甘肽的检测方法2.1比色法郭黎平等[6]{郭黎平，刘国良，张

5、卓勇，等.铜（Ⅱ）-新铜试剂-谷胱甘肽乙醇体系显色反应研究[J].光谱学与光谱分析，2000，20（30）：412-414.}在测定大豆提取液中谷胱甘肽的含量时，发现在铜（Ⅱ）-新铜试剂-谷胱甘肽-乙醇体系中测定谷胱甘肽的含量，乙醇具有明显的增敏作用。采用CuSO4溶液和新铜试剂混合液[Cu2+-新铜试剂（1：2.5，摩尔比）]作为显色剂，检测波长为456nm，检测限为2.0ug/ml，线性范围为2.0~24ug/ml,回收率为99.54%，RSD为0.76%。赵旭东等[2]{赵旭东，魏东芝，万群，等，谷胱甘肽的简便测定法[J].药物分析杂志，2000，20（1）：34-37}根据甲醛同谷胱

6、甘肽和常见含巯基物质反应速度的不同，提出了在含有其它巯基物质溶液中测定谷胱甘肽含量的方法，通过控制两个相同供试品和甲醛的不同反应时间，测定两者在波长为412nm时的吸收度，根据两者不同的吸收度值得出谷胱甘肽的含量。线性范围为0.19~0.95g/L,回收率为96.7%,方法的结果误差小于0.5%。该方法实验成本低，分析快速、简单，适于测定生物合成反应液中谷胱甘肽的含量。2.2荧光法曹新志等[7]{曹新志，陈彦.荧光法测定黄瓜中的谷胱甘肽[J].资源开发与市场，2000，16（5）：272-273。}采用邻苯二甲醛（o-phthaldialdehyde,OPT）作为络合剂，在磷酸缓冲液（pH8

7、.0)中，应用荧光分光光度计来测定黄瓜中谷胱甘肽的含量。检测限为0.1ug/ml，线性范围为0.1~40ug/ml,回收率为99.73%，RSD为1.24%。Hissin等[8]选用OPT作荧光剂，采用偏磷酸-磷酸钠-EDTA缓冲溶液（pH8.0），用以测定哺乳动物心脏和肝脏中谷胱甘肽的含量，谷胱甘肽的检测限为0.05umol，线性范围为0.05~0.8umol,RSD为4%。张建莹等[9]{张建莹，齐剑英等