冰冻切片弹性纤维(elastic)马森(masson)染色试剂

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1、冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)马森(MASSON)染色试剂盒产品说明书(中文版)主要用途冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)马森(MASSON)染色试剂是一种旨在使用标准化的化学脱蜡方法和伟郝夫(Verhoeff)苏木素以及三色染料(trichrome),分析和区分冰冻组织切片中的弹性纤维的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。广泛用于结缔组织、肌肉组织和纤维蛋白的研究等。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。技术背景弹性纤维(elasticfiber),又称为黄色纤维(yellowfiber),是固有

2、结缔组织(Connectivetissueproper)细胞外基质的成分之一,由平滑肌细胞和成纤维细胞产生弹力蛋白质(elastin)、原纤维蛋白(fibrillin;FBN)等构成。弹性纤维具有可伸展性。存在于皮肤、肺、动脉、静脉、弹力软骨、牙周韧带(periodontalligament)、脂肪组织中。弹性纤维缺失导致皮肤松弛症(cutislaxa)、威廉姆斯综合征(WilliamsSyndrome)等疾病。基于摩罗利(mallory)首次应用三色系统的方法,马森(masson)进行了改良,在三色复合染料体系中,使用苯胺篮(anilineblu

3、e)替代绿篮。同时使用伟郝夫(Verhoeff)苏木素选择性染色弹性纤维,三色复合染料帮助区别其它包括肌肉、胶原纤维、纤维蛋白(fibrin)等组织成分。马森方法操作复杂,可以细致区分多种组织成分。产品内容清理液(ReagentA)200毫升固着液(ReagentB)10毫升韦格液(ReagentC)100毫升祛色液(ReagentD)20毫升岑克液(ReagentE)100毫升范氏液(ReagentF)10毫升比氏液(ReagentG)10毫升酸性液(ReagentH)10毫升染色液(ReagentI)10毫升修正液(ReagentJ)10毫升脱

4、水液A(ReagentK)10毫升脱水液B(ReagentL)10毫升透明液(ReagentM)10毫升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里,避免光照;试剂具有腐蚀性,注意安全;有效保证6月用户自备5小型玻璃染色缸:用于组织或切片处理的容器培养箱或烘箱:用于样品反应孵育微波炉:用于样品反应孵育处理中性树脂:用于切片封片光学显微镜:用于切片染色后观察分析实验步骤一、样品固着处理1.准备好5微米厚的冰冻切片2.小心加上200微升清理液(ReagentA)在切片上,铺满整个切片样品表面3.室温下孵育2分钟4.小心移去切片上的清理液(ReagentA)5

5、.小心加上200微升固着液(ReagentB)在切片上,铺满整个切片样品表面6.室温下孵育5分钟7.小心移去切片上的固着液(ReagentB)8.小心加上200微升清理液(ReagentA)在切片上,铺满整个切片样品表面9.室温下孵育2分钟10.小心移去切片上的清理液(ReagentA)二、样本染色处理操作一:标准染色1.小心加入1毫升韦格液(ReagentC)在切片上,铺满整个切片样品表面2.放进60℃恒温培养箱孵育60分钟3.小心移去韦格液(ReagentC)4.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(ReagentA)中孵育2分钟5.小心移去切

6、片上的清理液(ReagentA)6.小心加入200微升祛色液(ReagentD)在切片上,铺满整个切片样品表面7.室温下孵育5分钟8.小心移去祛色液(ReagentD)9.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(ReagentA)中孵育2分钟10.小心移去切片上的清理液(ReagentA)11.小心加入1毫升岑克液(ReagentE)在切片上,铺满整个切片样品表面12.放进60℃恒温培养箱孵育60分钟13.小心移去岑克液(ReagentE)14.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(ReagentA)中孵育2分钟15.小心移去切片上的清理液(Reag

7、entA)16.小心加入200微升范氏液(ReagentF)在切片上,铺满整个切片样品表面17.室温下孵育30分钟18.小心移去范氏液(ReagentF)51.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(ReagentA)中孵育2分钟2.小心移去切片上的清理液(ReagentA)3.小心加入200微升祛色液(ReagentD)在切片上,铺满整个切片样品表面4.室温下孵育5分钟5.小心移去祛色液(ReagentD)6.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(ReagentA)中孵育2分钟7.小心移去切片上的清理液(ReagentA)8.小心加入200微升比氏

8、液(ReagentG)在切片上,铺满整个切片样品表面9.室温下孵育5分钟(注意:可以延长至15分钟,增强染色效果)10.小

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