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1、实验室常用溶液的配制标准程序3、适用范围XXXX研发部常用溶液：3M醋酸钠、2NNaOH、5MNaCL、SolutionⅠ、SolutionⅡSolution、SolutionⅢ、LB培养基、1MTris-HCl、10×TEBuffer、10×PBSBuffer、苯酚/氯仿/异戊醇、10%（W/V）SDS、0.5MEDTA(pH8.0)、50×TAEBUffer、20×SSC、封闭缓冲液（Wester杂交）。4、配制4.1、用具干燥洁净的200ml量桶一只，三角烧瓶两只，天平一架，250ml、1000ml广口瓶各一只。4.2、配制步骤4.2.1、配制NaAC溶液⑴用天平称取40.8克分析纯
2、的NaOAC固体，置于250ml三角烧瓶中。⑵用100ml量桶准确取40ml去离子水，摇荡三角烧瓶使NaOH固体充分溶解⑶加去离子水将溶液定容到100ml⑷高压灭菌后，室温保存。4.2.2、配制NaOH溶液⑴用100ml量桶准确取80ml去离子水，置于250ml三角烧瓶中。⑵用天平称取8克NaOH固体缓缓加入三角烧瓶中。⑶摇荡混匀溶液。用去离子水将溶液体积定容到100ml。⑷将混匀的溶液转移入玻璃瓶中，室温保存。4.2.3、配制NaCL溶液⑴用天平称取292.2克NaCL固体置于1L烧杯中，加入800ml的去离子水后搅拌溶解。⑵加去离子水将溶液定容至1L，适量分成小份。⑶高压灭菌后，40C
3、保存。4.2.4、配制SolutionⅠ溶液（1）量取1MTris-HCL(ph8.0)25ml,1.5MEDTA(ph8.0)20ml,20%Glucose(1.11M)45ml,dH2O910ml,置于1L烧杯中。（2）高温高压灭菌后，40C保存。（3）使用前每50ml的SolutionⅠ加入2ml的RNaseA（20mg/ml).4.2.5、配制SolutionⅡ溶液(1)量取10%SDS50ml,2NNAOH50ml,置于500ml烧杯中。(2)加灭菌水定容至500ml,充分混匀。(3)室温保存。此溶液保存时间最好不要超过一个月。注意：SDS易产生气泡，不要剧烈搅拌。4.2.6、配
4、制SolutionⅢ溶液（1）称量KOAc147g,CH3COOH57.5g，置于500ml烧杯中。（2）加入300ml去离子水后搅拌溶解。（3）加去离子水将溶液定容至500ml。（4）高温高压灭菌后，40C保存。4.2.7、配制LB培养基（1）称取Tryptone10g,YeastExtract5g,NaCl10g，置于1L烧杯中。（2）加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。（3）滴加5NNAOH（约0.2ml），调节ph值至7.0。（4）加去离子水将培养基定容至1L。（5）高温高压灭菌后，40C保存。4.2.8配制1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)（1）称量121.
5、1gTris置于1L烧杯.（2）加入约800ml的去离子水。充分搅拌溶解。（3）按下加入70mlpH7.4,60pH7.6,42mlpH8.0浓盐酸调节所需要的值。（4）将溶液定容至1L。（5）高温高压灭菌后，室温保存。注意：使溶液冷却至室温后在调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的值大约降低0.03个单位。4.2.9、配制1L10×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)100mMTris-HCl,10mMEDTA（1）量取溶液1MTris-HClBuffer(pH7.4,,7.6,8.0)100ml,500mMEDTA(pH8.0)20m
6、l，置于1烧杯中。（2）向烧杯中加入800ml的去离子水，均匀混合。（3）将溶液定溶至1L后，高温高压灭菌。（4）室温保存.4.3.10、配制1L10×PBSBuffer1370mMNaCl,27mMKCl,10mMNa2HPO4,20mMKH2PO4.（1）称量NaCl80g,KCl2,Na2HPO414.2g,KH2PO4,2.7g置于1L烧杯中。（2）向烧杯中加入800ml的去离子水，充分搅拌溶解。（3）滴加HCl将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1L。（4）高温高压灭菌，室温保存。注意：上述PBSBuffer中无二价阳离子，如需可在配方中补充1mMCaCl2和0.5
7、mMMgCl2。4.3.11配制苯酚/氯仿/异戊醇（25：24：1）（1）说明：从核酸除去蛋白质常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25：24：1）。氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机向的分离，而异戊醇有助于消除抽屉过程中出现的气泡。（2）配置方法：将平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24：1）均匀混合和后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。4.3.12配制10%（W/V）SDS100ml（1）称量10g高重度的SDS置于100-200m
