标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘制

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1、标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘制染料吸光度浓度标准工作曲线的绘制实验一n染料吸光度—浓度标准工作曲线的绘制（选做）一、实验目的n掌握分光光度计的使用方法，学会染料吸收光谱曲线的测定和未知染液浓度的测定，加深对染色泽和吸收光谱关系的认识。二、实验原理nnn测定染料在溶液中或纤维上的含量的方法有多种，本实验介绍用分光光度计法测定染料在溶液中的浓度。采用分光光度法测定染料浓度的基本理论是基于朗白—比耳定理。该定理指出，有色溶液对一束平行单色光的吸光度与溶液的浓度和液层厚度之积成正比。其数学表达式为：A＝KbCC１/A１=C2/A2或C2=C１/A１×A2三、主要实验材料、化学品和仪器nn化学品：活

2、性红X-3B10g/l、Na2CO3、Na2SO4仪器：722型分光光度计四、实验步骤nn吸收光谱曲线的测定（用活性红X-3B）①标准溶液的配制②吸收光谱曲线的测定混合染料浓度的测定①绘制标准曲线②测定未知浓渡的染液绘制标准曲线。在测定同一染料的未知浓度时以其λmax处测得的吸光度，在标准曲线上查得对应的染液浓度。五、注意事项nn实验时使用蒸馏水作溶剂，空白溶液也用蒸馏水实验时一律使用B=1CM的比色皿，此时A=KC六、实验结果与讨论n根据所做图线分析染料浓度与吸光度之间呈什么关系。若染料相对应浓度发生变化，是否影响它们两者之间的关系。氯浓度标准曲线绘制氯浓度标准曲线绘制溶液的配制：磷酸盐缓冲

3、液：无水磷酸氢二钠：24.0064g无水磷酸氢二钾：45.9988g乙二胺四乙酸二钠：0.8022g碘酸钾储备液：1.0055g碘酸钾标准溶液：碘酸钾储备液：10ml碘化钾：1.0g氢氧化钠：80.0004g硫酸溶液：54.00ml98%的浓硫酸N,N-二乙基-1,4-苯二胺硫酸盐（DPD）：98%浓硫酸2.0ml无水DPD硫酸盐：1.0998gEDTA二钠：0.2007g所有溶液都配制成1000ml的溶液待测液的配制序号碘酸钾标准溶液/ml硫酸溶液/ml氢氧化钠溶液/ml磷酸盐缓冲液/mlDPD试剂/ml氯含量/ug101155020.5115553111551043115530551155

4、5061011551007151155150氯浓度标准曲线铁标准曲线的绘制铁标准曲线的绘制方法1.方法原理亚铁在pH3~9之间的溶液中，可与邻菲啰啉生成很稳定的橙红色络合物。高铁离子可以通过还原剂还原成亚铁进行测定。测量波长在510nm处，用邻菲啰啉分光光度法可测量Fe2+、Fe3+及总铁含量。2.方法适用范围此方法适用于一般环境水和废水中铁的监测，最低检出浓度为0.03mg/L，测定上限为5.00mg/L。对铁离子大于5.00mg/L的水样，可适当稀释后再按照本方法进行测定。3.仪器及试剂3.1使用仪器分光光度计，10mm比色皿3.2试剂3.2.1铁标准贮备溶液称取0.7020g硫酸亚铁铵，

5、溶于(1+1)硫酸50mL中，转移至1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液含铁浓度为100μg/mL。3.2.2铁标准使用液准确移取标准贮备溶液25.00mL置于100mL容量瓶中，加水至标线，摇匀。此溶液含铁浓度为25.0μg/mL。3.2.3盐酸(ρ1.19g/mL)，(1+3)盐酸溶液3.2.4盐酸羟胺溶液盐酸羟胺溶液[ρ(NH2OH·HCl)=100g/L]：称取10g盐酸羟胺溶于水中，稀释至100mL。3.2.5缓冲溶液：40g乙酸铵加50mL冰乙酸用水稀释至100mL。3.2.6邻菲啰啉溶液：邻菲啰啉溶液：称取0.5g邻菲啰啉溶于水中，加数滴盐酸帮助溶解，稀释至100m

6、L。3.2.7饱和乙酸钠溶液4.铁标准曲线的绘制方法4.1标准曲线的绘制将25.0μg/mL的铁标准溶液稀释5倍，变成5mg/L的铁标准溶液。再依次移取铁标准液0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL置于50mL比色管中，加(1+3)盐酸1mL，100g/L盐酸羟胺溶液2~3mL，再加适量蒸馏水，在水浴中加热。然后冷却至室温，加一小片刚果红试纸，滴加饱和乙酸钠溶液至刚果红试纸刚刚变红，加入5mL缓冲溶液和邻菲啰啉溶液2mL，加水至标线，摇匀。显色15min后，用10mm比色皿，以空白调零，在510nm处测量吸光度。由经过空白校正的吸光度对铁的含量作图。4.2总铁的测定采样后立

7、即将样品用盐酸酸化至pH为1，分析时取一定量混匀水样至50mL比色管中，加(1+3)盐酸1mL，100g/L盐酸羟胺溶液2~3mL，再加适量蒸馏水，在水浴中加热，以保证全部铁的溶解和还原。若仍有沉淀应过滤除去。4.3Fe2+的测定采样时将2mL盐酸放在一个100mL具塞的水样瓶内，直接将水样注满样品瓶，盖紧瓶塞以防氧化，一直保存到进行测量和显色。分析时只需取适量水样，直接加入缓冲溶液和邻菲啰啉溶液