试验各种试剂的配制方法

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1、组织培养实验有关试剂的配制:MS培养基储备液的配制成分1升储备液用量(mg)每升培养基取用量(ml)20*储备液1(大量元素)NH4NO3KNO3CaCl2.2H2OMgSO4.7H2OKH2PO4330003800088007400340050200*储备液2(微量元素)KIH3BO3MnSO4.4H2OZnSO4.7H2ONa2MoO4.2H2OCuSO4.5H2OCoCl2.6H2O16612404460172050555200*储备液3(铁盐)FeSO4.7H2ONa2.EDTA.2H2O556074605200*储备液4(有机成分)肌醇烟酸盐酸吡哆醇盐酸硫胺素甘氨酸2000010

2、0100204005次氯酸纳消毒液:取30ml次氯酸纳溶液,用蒸馏水定容至100ml。现配现用。75%的酒精:75ml的95%的酒精加水定容至95ml。0.2%的升汞溶液:称取HgCl220克,加蒸馏水至4000ml。1N盐酸:取8.25ml的浓盐酸,加蒸馏水定容至100ml。1NNaOH:称8gNaOH,用蒸馏水定容至200ml。0.1mg/ml的2,4-D溶液:取25mg的2,4-D,加入少量95%的酒精和1N的NaOH溶解,再加蒸馏水定容至250ml。0.1mg/ml的6-BA溶液:取25mg的6-BA,用少量1N的盐酸溶解,再加蒸馏水定容至250ml。遗传转化与GUS基因检测的试剂

3、配制LB培养基的配制:将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH(10~15ml)调整pH至7.0,再补足水至1L10ml的10mmol/l的AS(乙酰丁香酮)母液(100x)配制:称19.6mg的AS,先溶于少量甲醇中,然后慢慢加蒸馏水定容至10ml,过滤除菌,分装成200ul/管(每组1管),使用时将200ul的AS母液加入20ml的MS液体培养基中。50mmol/l的磷酸钠缓冲液(pH7.0):A液:取NaH2PO4.2H2O3.12g溶于蒸馏水,定溶至100ml。B液:取Na2HPO4.12H2O7.17g溶于蒸馏水,定溶100ml。

4、取A液39ml与B液61ml混合,定容至400ml,调PH至7.0。50mmol/L铁氰化钾母液:称3.295g,用蒸馏水定容至200ml50mmol/l亚铁氰化钾母液:称4.224g,用蒸馏水定容至200ml。0.5mol/lEDTA母液(pH8.0):药品分子量100ml500mlEDTANa22H2O372.2418.6g93.06g双蒸H2O80ml400ml用NaOH调PH至8.06g10gDdH2O定容至100ml500mlGUS检测液的配制:100mgGluc,先溶于1ml的DMF。取80ml50mmol/l的磷酸钠缓冲液(pH7.0),加入1ml50mmol/L铁氰化钾、1

5、ml50mmol/L亚铁氰化钾和2ml0.5mol/lEDTA(PH8.0),再加入已溶解的Gluc,再加20ml的甲醇,混匀。(配制方法参考《现代植物生理学实验指南》p348)将配好的GUS检测液分装于1.5ml的小管中(1ml/管,1组1管),-20°C保存备用。鲜花保鲜及超氧物歧化酶活性测定50mmol/l的磷酸钠缓冲液(pH7.0):A:NaH2PO4.2H2O3.12g溶于蒸馏水,定溶至100ml。B液:Na2HPO4.12H2O7.17g溶于蒸馏水,定溶至100ml。取A液39ml与B液61ml混合,定容至400ml。PH7.0。50mmol/l的磷酸钠缓冲液(pH7.8):取

6、A液8.5ml与B液91.5ml混合,定容至400ml。PH7.8。SOD提取液:50mmol/L磷酸缓冲液[含0.1mmol/LEDTA;0.3%(w/v)TritonX-100;4%(w/v)聚乙烯聚吡咯烷酮(pvpp,polyvinylpolyrrolidone),pH7.8]pvpp比较难溶,多晃动几次,再静置一会,慢慢就会溶解。14.5mmol/Ldl-甲硫氨酸:即2.163克/L,称2.163g,用蒸馏水定容至1L(较难溶,需稍微加热)。3umol/LEDTA:每500ml中加3ul0.5mol/L的EDTA母液,用50mmol/L磷酸缓冲液配制。2.25mmol/LNBT(1

7、.84克/L):称0.092克,溶于50ml的50mmol/L磷酸缓冲液磷酸缓冲液中。避光保存,现配现用.60umol/L核黄素:称2.25mg溶于100ml的50mmol/L磷酸缓冲液中,避光保存,现配现用。10000ppm6-BA:即0.01克/L,称25mg6-BA,先加少量酒精和1mol/L的NaOH溶解。再用蒸馏水定容至250ml。0.25mg/ml的GA母液:称25mg的GA,先用少量95%的酒精溶解,再用水

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