abo、rh(d)血型鉴定

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1、ABO血型、Rh（D）抗原鉴定遵医附院输血科陈月宽139842682288608288ABO血型正、反定型目的：用于ABO血型鉴定，确保鉴定结果正确适用范围：受血者、献血者ABO血型鉴定使用器材和材料：离心机、标准血清、标准红细胞、吸管、玻片等方法：正定型和反定型原理：正定型是检测红细胞表面的抗原，用标准抗A和抗B分型血清测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原；反定型是检测血清（浆）中的抗体，用标准A型细胞和B型细胞测定血清中有无相应的抗A和（或）抗B抗体。Rh(D)血型定型目的：鉴定红细胞表面是否含有D抗原。适用范围：受血者、

2、献血者Rh(D)血型鉴定使用器材和材料：Rh抗(-D)标准血清、吸管、玻片等方法：玻片法原理：根据抗D抗体与对应红细胞抗原的凝集反应，区分Rh(D)阳性和Rh(D)阴性。ABO正定型及Rh（D）定型操作程序（玻片法）取玻片1张，用红笔将其划分为左、中、右三段，首先左端加入A型（抗-B）血清1滴，中端加入B型（抗-A)血清1滴，右端加入抗（-D）血清1滴，然后在左、中、右三段同时加入受检者3～5%红细胞悬液1滴，并分别混匀，放置一段时间后观察结果。注:红细胞悬液的制备:悬液浓度(%)压积红细胞(d)盐水(d)212.0ml(40)51

3、0.8ml(16)1010.4ml(8)2010.2ml(4)A型标准血清（抗-B）B型标准血清（抗-A）左、中端红细胞凝集说明此红细胞上含有A、B两种抗原，此血型为AB型抗（-D）血清与红细胞发生凝集，Rh（D）阳性，反之阴性。抗（-D）标准血清受检者3～5%红细胞悬液左端中端右端抗(-A)、抗(-B)、抗(-D)标准血清与红细胞悬液分别混匀放置一段时间后，标准血清与红细胞表面是否含有相应的抗原而产生不同的凝集现象，将ABO血型分为四种（即A、B、O、AB型），Rh(D)血型分为阳性、阴性二种。血型凝集示意图抗-B抗-A抗（-D）

4、血型：AB型Rh(D)：阳性抗-B抗-A抗（-D）血型：B型Rh(D)：阴性抗-B抗-B抗-A抗-A抗（-D）抗（-D）血型：A型Rh(D)：阳性血型：O型Rh(D)：阳性反定法（试管法）取小试管2支，分别标明A、B，并同时加入受检者血清各2滴，在A管加入3%～5%A型红细胞悬液1滴；B管加入3%～5%B红细胞悬液1滴，混匀，1000r/min离心1min或3000r/min，离心15秒，取出观察凝集情况。AcBc首先在A、B管中加入受检者血清各2滴加入Ac1滴加入Bc1滴混匀后离心观察结果离心机反定型（试管法）AcBc无凝集凝集血

5、型：A型ABO正反定型结果判断受检者红细胞与标准血清（正定型）受检者血清（浆）与标准红细胞（反定型）受检者血型抗-A抗-BAcBc+--+A-++-B--++O++--AB交叉配血试验盐水配血法目的：检测献血者与受血者之间血液是否相配，确保输血安全。适用范围：适用于血清完全抗体（IgM)的检测。使用仪器和材料：离心机、试管、试管架、生理盐水、显微镜等。原理：在电解质（生理盐水）溶液中，带正电荷的Na＋能降低红细胞表面的负电荷，减少了红细胞的排斥力而发生抗原抗体结合使红细胞凝集，从而发现配血不合。聚凝胺配血法目的：与盐水法相同适用范围

6、：适用于血清中不完全抗体(IgG)的检测仪器与材料：离心机、试管、试管架、聚凝胺试剂、吸管等。原理：聚凝胺是一种高价阳离子聚合物，溶解后能产生很多正电荷，能中和红细胞表面带有的负电荷，降低红细胞Zeta电位，并缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性凝集，这种凝集是可逆的。最后加入悬浮液，它具有中和凝聚胺阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果阴性；如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集不会散开，试验结果为阳性。盐水法操作程序：1、取小试管2支，标明主、次侧。主侧：受血者血清2滴加供血者3～5%生理盐水红

7、细胞悬液1滴；次侧：供血者血清2滴加受血者3～5%生理盐水红细胞悬液1滴。2、混匀，以1000r/min，离心1min，取出，先目测上层液体是否溶血，再轻轻摇动试管，检查红细胞是否凝集。3、结果判断：主、次两侧无凝集、无溶血，表示配血相合，可以输血；主、次侧有一侧凝集或溶血，表示配血不相合，不能输血。缺点：1、只能检测出完全抗体（抗-A、抗-B）引起的血型不合，对免疫性抗体引起的血型不合不能检出，有输血史或不明输血史及妊娠史不能用该法。2、本实验中的生理盐水对血清（浆）中的抗体有稀释作用，易导致配血结果假阴性。3、易受冷凝集素的干扰

8、。聚凝胺配血法1、在盐水配血法操作完后，主、次侧加入低离子强度溶液（LISS）0.6ml，混匀，置室温1min。2、主、次两侧加聚凝胺2d，混匀，置室温15s，3400r/min，离心10s，弃上清液后留0.1ml液体,轻摇试管,目测