基因重组与基因工程课间作业

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1、第十四章基因重组与基因工程内容提要：细菌的基因转移包括接合作用、转化作用、转导作用等。当细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时，质粒DNA从一个细胞转移至另一个细胞，这种类型的DNA转移称为接合作用。通过自动获取或人为的供给外源DNA，使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型，这就是转化作用。由病毒携带将宿主DNA片段从一个细胞转移至另一细胞的现象或机制，称为转导作用。在接合、转化、转导或转座过程中，不同DNA分子间发生的共价连接即为重组。重组DNA技术是在人们对自然界基因转移和重组的认识基础上创立的新技术。为研究基因的结构与功能，从构建的基因组DNA文库或cDNA文

2、库分离、扩增某一感兴趣的基因就是基因克隆或分子克隆，又称重组DNA技术。一个完整的基因克隆过程应包括：1．分，即目的基因的获取及基因载体的选择。目的基因指科学家感兴趣的外源基因，其来源有几种途径：化学合成、PCR技术、基因组文库或cDNA文库中获得。载体是目的基因的携带者，常用的载体有质粒、噬菌体等。2．切，即限制性核酸内切酶的应用。限制性内切酶是识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶，是实现重组DNA技术的重要的工具酶。3．接，即将目的基因与载体连接形成重组体（或重组DNA）。4．转，即将重组体导入宿主菌（或细胞），根据采用的载体

3、性质不同，将重组体导入宿主菌的方法有转化、转染及感染。5．筛，即重组体的筛选与鉴定，将重组体导入宿主菌后，通过适当形式的培养板生长即可获得一定的抗药菌落。利用原位杂交，和Southern印迹或免疫学方法对抗药菌落进行筛选，获得含目的基因的转化子菌落，再经扩增、分离重组DNA获得基因克隆。重组DNA技术在疾病基因的发现，表达有药用价值的蛋白质，DNA诊断及疾病的预防等方面具有广泛应用价值，并促进了当代分子医学的诞生和发展。一、选择题【A型题】1．下列DNA序列属于回文结构的是（）A．ATGCCGTACGGCB．GAATTCCTTAAGC．GGCCGGCCGGCCD

4、．TCTGACAGACTGE．CTAGGGGATCCC2．DNA经限制性内切核酸酶切割后，断端易于首尾相接，自行成环。这是因为存在着（）A．钝性末端B．平端C．粘性末端D．5’端E．3’端3．限制性内切核酸酶的通常识别序列是（）A．粘性末端B．聚腺苷酸C．回文对称序列D．RNA聚合酶附着点E．甲基化“帽”结构4．pBR322是（）A．经人工改造的大肠杆菌质粒B．天然的大肠杆菌质粒C．天然的酵母质粒D．经人工改造的大肠杆菌噬菌体E．经人工改造的酵母质粒5．免疫球蛋白的生成是通过以下哪个过程（）A．转化B．转导C．转染D．转位E．溶原6．常用载体-质粒的特点（）A．

5、是线形双链DNAB．插入片断的容纳量比λ噬菌体DNA大C．含有抗药性基因D．含有同一限制性内切核酸酶的多个切口E．不随细菌繁殖而进行自我复制7．基因工程的操作程序可概括为（）A．切、转、接、筛、分B．转、接、筛、分、切C．接、筛、分、切、转D．筛、分、切、转、接E．分、切、接、转、筛8．cDNA文库指（）A．一个生物组织和细胞的全部基因信息B．一个生物组织和细胞的全部mRNA信息C．一个生物组织和细胞所表达的mRNA信息D．一个物种的全部mRNA信息E．一个物种的全部基因信息9．限制性内切核酸酶（）A．可将单链DNA任意切断B．由噬菌体提取而得C．可将双链DNA

6、序列特异地切开D．可将两个DNA分子连接起来E．不受DNA甲基化影响10．在重组DNA技术中，不常用的酶是（）A．限制性内切核酸酶B．DNA聚合酶C．DNA连接酶D．反转录酶E．DNA解链酶11．可作为重组DNA的目的基因的是（）A．mRNAB．tRNAC．rRNAD．基因组DNAE．mRNA和基因组DNA12．以质粒为载体，将外源基因导入受体菌的过程称（）A．转化B．转染C．感染D．转导E．转移13．最常用的筛选转化细菌是否含质粒的方法是（）A．营养互补筛选B．抗药性筛选C．免疫学方法D．PCR筛选E．分子杂交筛选14．α-互补筛选法属于（）A．抗药性标志筛选

7、B．酶免检测分析C．标志补救筛选D．原位杂交筛选E．免疫学方法15．F因子从一个细胞转移至另一个细胞的基因转移过程称为（）A．转化B．转导C．转染D．转座E．接合16．由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为（）A．转化B．转导C．转染D．转座E．接合17．发生在同源序列间的重组称为（）A．位点特异的重组B．非位点特异的重组C．基本重组D．随机重组E．人工重组18．在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的是DNA（）A．聚合酶B．解链酶C．连接酶D．拓扑酶E．内切酶19．在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指（）A．建立单克隆抗体B．建立多克隆抗体C．构建重

8、组DNA分子D．无性繁殖