pten基因在小鼠胚胎着床过程中作用的实验研究

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1、PTEN基因在小鼠胚胎着床过程中作用的实验研究作者:陈晓玲,杨戎,贾咏存,刘孝云,魏莎莉单位:重庆医科大学公共卫生学院生殖生物学研究室,重庆,400016提要:目的 探讨PTEN基因小鼠胚胎着床过程中的作用。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(real-timefluorescencequantitativePCR,FQ-PCR)分别检测未孕及孕1、3、4、5、7d(分别记为d0、d1、d3、d4、d5、d7)小鼠子宫内膜PTEN基因mRNA的表达和子宫角注射反义寡核苷酸观察胚泡着床数。结果 FQ-PCR测得妊娠的子宫内膜组织

2、PTEN的表达高于未妊娠的子宫内膜组织,且随着妊娠天数的增加呈现逐渐增加的趋势,到妊娠第5天达到最高。子宫角注射PTEN反义寡核苷酸后胚泡着床数明显减少。结论 PTEN在妊娠早期子宫内膜持续表达,可能参与了胚泡着床。  关键词:PTEN;子宫内膜;植入;FQ-PCR;子宫角注射  中图法分类号:R-33;R321.3;R394.2   文献标识码:APTENgeneexpressioninmouseendometriaincreasesduringembryoimplantationCHENXiao-ling,YANGRo

3、ng,JIAYong-cun,LIUXiao-yun,WEISha-li(LaboratoryofReproductiveBiology,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China)  Abstract:Objective ToinvestigatetheeffectofPTENgeneinthemouseuterusduringembryoimplanta-tion.Methods Real-timefluorescencequantitativePCR(FQ-PCR

4、)wasusedtodetectPTENmRNAex-pressedintheendometriaofthenonpregnantmiceandthelatepregnantmice(day1,day3,day4,day5andday7),with20micesacrificedateachfixedday.Outofanother203-dayregnantmice,tenreceivedPTENantisenseoligonucleotideatthehornofuterusandtenreceivednormalsa

5、linetocounttheblastocystsatpregnantday8.Results ThePTENmRNA/β-actinmRNAinpregnantmicewashigherthanthatofnonpregnantmice,graduallyhoistedasdayspassedby,andreachedthehighestatpregnantday5.ThenumberofblastocystsinthemicethatreceivedPTENantisenseoligonucleotidewa

6、sfewerthanthatreceivednormalsaline.Conclusion PTENpersistentlyexpressesinmouseendometriaduringtheearlypregnancyandmaybeparticipateintheregulationprocessofmouseblastodystimplantation.  Keywords:PTEN;endometrium;implantation;real-timefluorescencequantitativePCR;intr

7、auterineinjection  PTEN是位于人类染色体的10q23的肿瘤抑制基因,编码一种双特异性的蛋白磷酸化酶,能够脱去丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸残基的磷酸[1]。序列分析表明,该蛋白质与张力蛋白和辅助蛋白有很大的同源性[2],促进细胞凋亡的发生。它在体外同时具有脂质磷酸酶和蛋白水解酶的活性。近年的研究表明,它在胚胎发育、着床,细胞迁移,和细胞凋亡等中发挥重要的作用[1,3]。胚胎着床和胎盘形成过程会发生一系列的细胞间相互作用,细胞增值,侵入以及细胞凋亡等,导致着床点处组织重建。细胞凋亡可能在胚胎发育和多余细胞清除方

8、面起关键性的作用。本研究采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-timefluorescencequantitativePCR,real-timeFQ-PCR)定量分析PTEN在妊娠早期子宫内膜的表达,用子宫角注射法观察PTEN反义寡核苷酸对胚泡着床的影响,初步探讨它在小鼠胚泡着床过程中的作用,为进一步

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