高纯天然辣椒红素和β-胡萝卜素的rp-hplc制备方法研究

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1、高纯天然辣椒红素和β-胡萝卜素的RP-HPLC制备方法研究2010年第12期总第35卷中国调味品CHINACONDIMENT食品添加剂高纯天然辣椒红素和l3一胡萝卜素的RP—HPLC制备方法研究余朝琦，王安，李崇瑛(成都理工大学材料与化学化工学院，成都610057><9)摘要：文章用C。制备柱(10×150mm，10m)，乙醇一水混合溶剂洗脱，建立了制备型反相高效液相色谱法(RP—HPLC)，从皂化后的辣椒红色素粗品中成功制备了高纯天然辣椒红素和B一胡萝卜素，产物纯度均达到了<9<9。关键词：制备

2、型RP-HPLC；辣椒红素；G一胡萝卜素中图分类号：TS264．4文献标识码：B文章编号：1000—<9<973(2010)12—0087—02PreparativeRP-HPLCfornaturaIcapsanthinandp-caroteneYUChao—qi，WANGAn，LIChong—ying(CollegeofMaterialsandChemistry&ChemicalEngineering．ChengduUniversityofTechnology，Chengdu61005<

3、9，China)Abstract：ThenaturalcapsanthinandB—carotenewereisolatedandpurifiedbypreparativereversedphasehighperformanceliquidchromatographywithC18column(10X150mm，10gm)andethanol—wa—tereluent，thepurityoftheproductsreached<9<9．Keywords：PreparativeRP—HPLC；cap

4、santhin；8一carotene随着世界各国相继禁止使用某些合成色素，尤其是2005年出现的“苏丹红”事件之后，人们对食用天然色素开始更加青睐L1]。我国的辣椒红素具有充足的原料资源，且辣椒红素因其色泽优势、保健作用及B一胡萝卜素伴生品而成为了提取天然红色素的首选对象[3]。然而目前市场上的辣椒红色素产品的纯度及色价都较低，对辣椒红色素进行进一步纯化是非常必要的[4]。本论文以辣椒红色素粗品为原料，建立了制备高纯天然辣椒红素和胡萝卜素的反相高效液相色谱制备法，一次进样操作即可获得<9<9的纯度

5、，与传统溶剂萃取法相比，该方法可以不问断地重复进样完成高效率提纯，为建立更先进的自动化工业提纯技术提供了一种新的思路。1仪器和试剂1．1仪器岛津高效液相色谱仪LC-10A日本岛津公司(加装0．2mL进样环和10mC1810mm×150mm制备柱)，电光分析天平精度1／100000北京科学仪器厂，真空泵AP-01P天津奥特赛恩斯仪器有限公司，超声波清洗器KQ22O0DB昆山市超声波仪器公司。1．2试剂辣椒红色素粗品食用级四川1省德阳长秀天然色素厂，辣椒红素标准品日本化工株式会社，G一胡萝卜素标准品美

6、国Sigma公司，氢氧化钠分析纯上海有机化工试剂研究所，乙醇分析纯成都市科龙化工试剂厂，实验用水为自制重蒸水，其它试剂均为分析纯。收稿日期：2010—0<9—13*通讯作者基金项目：四川省应用基础基金项目“高纯天然色素制备方法研究”(项目编号O4JY02<9—00<9—2)作者简介：余朝琦(1<964一)，女，工程师，主要从事色谱分离与分析测试研究。一87—2010年第12期总第35卷中国调味品CHINACoNDIMENT食品添加剂2结果与讨论2．1制备色谱装置及仪器条件本实验将LC-10A分析型

7、高效液相色谱仪通过加装0．5mLPEEK进样环、制备柱和三通分流阀，组成了制备型高效液相色谱装置，见图1。制备色谱条件为：C18制备柱(10m，10ram~150mm)；洗脱剂为乙醇：水为9><>95：5(V／V)；流速为2mL／min；检测波长为460nm；进样体积为0．5mL。图1RP—HPLC制备色谱装置Fig．1PreparativeRP-HPLC2．2色素粗品的皂化辣椒红色素是一种脂肪类色素，辣椒红色素粗品中所含有的多种不饱和脂肪酸会以谱峰重叠的方式影响辣椒红素的色谱纯化，本实验采用的皂

8、化条件为：用10％的氢氧化钠乙醇溶液(乙醇浓度为5O)作皂化溶液，按1g色素20mL的比例添加皂化溶液，在5O℃下皂化2h，皂化液经过离心后取上层清液备用。由于辣椒红素在碱性溶液中易分解，因此皂化后应尽快完成色谱制备。2．3纯化制备与产物收集制备色谱中，优化色谱条件的原则是在分离度满足要求的前提下，纯化时间应尽可能短以提高生产效率。最终优化的从辣椒红色素粗品皂化液中制备辣椒红素和胡萝卜素的色谱的条件为：C。制备柱；洗脱剂为乙醇：水为<>95：5(V／V)；流速为2mL／min；检测