不同处理方法对草果种子生活力测定的影响

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1、不同处理方法对草果种子生活力测定的影响作者：杨耀文，普春霞，刘小莉，杨加龙，钱子刚【摘要】目的建立草果种子生活力测定的方法，为种子保存、种苗生产提供依据。方法采用TTC(四唑)法测定8组不同处理的草果种子生活力。结果草果种子存在吸涨损伤，8组不同处理方法在不同程度上避免吸涨损伤;草果种子对0.5%TTC染色反应比1.0%TTC敏感。结论室温浸泡4h，25℃恒温浸湿48h的处理能有效避免吸涨损伤，0.5%TTC染色48h以测定草果种子生活力。【关键词】草果种子;生活力;吸涨损伤　草果Amomumtsao-koCrevostetLemaire为姜科豆蔻属多年生宿根草本植物[1，2]

2、，果实入药，以个大、饱满、气辛香者为佳[3]。草果为芳香化湿药，入脾、胃二经，暖脾和胃，理气宽中，治心腹痛，止呕补胃，下气，消酒毒[4]。草果是云南特产的中药材和调味品，约占全国产量的百分之九十五[3]。TTC(四唑)染色方法测定种子生活力，方法简便快捷，适用范围广，新采收种子、休眠种子、储存多年种子都可以用此方法，而且结果准确[5～7]。本文采用TTC法[5～9]对草果种子生活力进行了初步研究，为快速了解种子潜在的发芽能力，为种子的保存和生产、以及药材生产提供依据[6，7]。目前，草果种子生活力测定未见相关文献报道。8　　1材料和方法　　草果Amomumtsao-koCrev

3、ostetLemaire种子采自高黎贡山标坡居群，该居群位于N24°50.289′E98°46.501′;海拔2070m。2007-10采收，室内自然干燥，用牛皮纸袋存放。随机抽取200粒种子，随机分为8份，每份25粒种子，分别做8种不同的处理[10](见表1)，将处理后的种子剥去假种皮，沿种脊小心地通过胚中心切成两瓣，分别放入培养皿内，注入TTC溶液浸没剖面，分别采用1.0%和0.5%TTC溶液在30～35℃下进行不同染色时间的处理，观察种子切面，根据种胚各部分的染色反应，确定种子有无生活力。种胚全部染色的为有生活力种子，子叶有1/3以下不染色的也是有生活力的种子;种子完全不

4、染色的为无生活力种子;胚染成浅红色的为染色浅、生活力弱的种子[9]。每组实验重复4次。经统计分析，确定草果种子生活力测定方法。　　2结果与讨论　　2.10.5%TTC染色观察草果种子生活力用0.5%TTC溶液对各组种子染色并统计(见表2)，染色488h，有生活力种子平均数量E组最大，为18.00，B组最小，为2.25;无生活力种子平均数量B组最大，为13.50，H组最小，为5.50;生活力弱种子平均数量A最大，为13.13，E组最小，为1.00。表1不同处理方法48h染色有生活力种子平均数量的比较　表20.5%TTC染色48h种子生活力统计　　2.21.0%TTC染色观察草果种

5、子生活力用1.0%TTC溶液染色各组种子并统计(表3)。表31.0%TTC染色48h种子生活力统计图10.5%TTC染色不同染色图21.0%TTC染色不同染色时间有生活力种子平均数的变化时间有生活力种子平均数的变化　　2.3TTC浓度用0.5%或1.0%TTC染色，有生活力种子平均数都是E组最高(表1)。0.5%TTC染色，各组对染色的反应时间存在差异：E组染色6h，D组染色10h，F组染色24h，A组、C组、G组染色27h，H组染色31h，有生活力种子平均数开始缓慢增多。1.0%TTC染色，各组对染色的反应时间差异不如0.5%TTC染色的差异明显：A、E、F、G、H组染色24

6、h，B、C、D组染色34h，有生活力种子平均数开始缓慢增多(图1、2)。在实验过程中，草果种子经48h染色，0.5%TTC染色较1.0%TTC染色颜色更红，容易观察计数。可能提示草果种子对0.5%TTC染色更为敏感。　　2.4染色时间两种不同浓度TTC染色6～48h，有生活力种子逐渐被染成红色，被染成红色的有生活力种子数量随着染色时间的延长而增多。染色时间达到488h时，有生活力种子数量均达到最高值，在实验中观察到继续增加染色时间，有生活力种子数无增多现象,随着时间的延长，TTC染液会在培养皿壁形成朱红色的沉积，可能也会影响染色结果，所以染色时间不宜超过48h。　　2.5吸涨损

7、伤种子猛烈吸水后，吸水不均匀，产生局部坏死，这就是吸涨损伤[10]。避免吸涨损伤可以保证生活力测定更为准确，同时提示种子萌发时应考虑避免吸涨损伤，提高萌发率。　　各组实验的结果比较可看出草果种子存在吸涨损伤(表1)。A组和B组比较，室温下随着种子浸泡时间延长，吸涨损伤更加严重;C组和D组比较，室温下随着种子浸湿时间延长，吸涨损伤减轻。B组和D组比较，室温下种子浸泡48h引起的吸涨损伤大于种子浸湿48h;A组和C组比较，室温下种子浸泡24h引起的吸涨损伤大于种子浸湿24h。　　A组、B组、G组