人核迁移蛋c刺激人造血干细胞增殖分化为巨核细胞研究

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1、人核迁移蛋C刺激人造血干细胞增殖分化为巨核细胞研究作者:陈彦球,葛怡琛,徐培林,杨燕【摘要】目的:研究人核迁移蛋C(hNUDC)促进人脐血来源的CD34+细胞增殖、分化为巨核细胞的作用。方法:使用DynalCD34体外分离系统收集人脐血CD34+细胞,无血清甲基纤维素半固体法体外培养CD34+细胞12d后,显微镜下观察hNUDC对CD34+细胞分化增殖为小、中、大巨核细胞集落的形态、数目的影响;无血清液体培养体系培养CD34+细胞10d后,流式细胞术检测hNUDC对CD34+细胞分化增殖为CD41+细胞的表达率及其DNA倍性的影响。

2、结果:hNUDC能够明显促进CD34+细胞分化增殖形成中小型CFUMK集落,可显著增加巨核细胞表面标志物CD41+的表达,CD41+细胞中DNA倍性显著地高于血小板生成素。结论:hNUDC对促进造血干细胞增殖和分化为巨核细胞具有重要作用。【关键词】人核迁移蛋白;巨核细胞;DNA倍性[Abstract]AIM: TostudytheeffectofhumannucleardistributionC(hNUDC)onhumanmegakaryocyteproliferationanddifferentiationfromcordblo

3、odCD34+cellsinvitro.METHODS: HumanCD34+cellswereisolatedusingtheDynalCD3413ProgenitorCellSelectionSystemfromumbilicalcordblood.TheCD34+cellswerethenculturedinserumfreemethylcellulosesemisolidmedia,themorphologicaspectsandnumberofsmall,mediumandlargeCFUMKcolonieswereo

4、bservedandscoredontheday12bymicroscopyanalysis.TheCD34+cellswereculturedinserumfreeliquidmedia,cellswereremovedonday10andformationofCD41+inhumanmegakaryocyteanditsDNApolyploidizationofnuclearwereanalyzedonaFACsortflowcytometer.RESULTS: hNUDCsupportedtheformationofsmall

5、andmediumCFUMKcolonyinserumfreesemisolidmedia.Furthermore,hNUDCinducedaremarkableincreaseinexpressionofthemegakaryocytecellsurfacemarkerCD41+andstimulatedtheCD41+DNApolyploidizationmoreeffectivelythanTPO.CONCLUSION:hNUDCmayplayanimportantroleinmegakaryocyteproliferat

6、ionanddifferentiation.[Keywords]hNUDC;Megacaryocyte;DNApolyploidization[摘要]目的:研究人核迁移蛋C(hNUDC)促进人脐血来源的CD34+细胞增殖、分化为巨核细胞的作用。方法:使用DynalCD34体外分离系统收集人脐血CD34+细胞,无血清甲基纤维素半固体法体外培养CD34+细胞12d后,13显微镜下观察hNUDC对CD34+细胞分化增殖为小、中、大巨核细胞集落的形态、数目的影响;无血清液体培养体系培养CD34+细胞10d后,流式细胞术检测hNUDC对CD3

7、4+细胞分化增殖为CD41+细胞的表达率及其DNA倍性的影响。结果:hNUDC能够明显促进CD34+细胞分化增殖形成中小型CFUMK集落,可显著增加巨核细胞表面标志物CD41+的表达,CD41+细胞中DNA倍性显著地高于血小板生成素。结论:hNUDC对促进造血干细胞增殖和分化为巨核细胞具有重要作用。[关键词]人核迁移蛋白;巨核细胞;DNA倍性血小板生成素(thrombopoietin,TPO)在体外具有调节巨核细胞增殖、成熟和血小板形成的功能[1]。但研究发现TPO基因敲除小鼠的血小板计数虽然比正常小鼠降低了85%,但这些小鼠并没

8、有发生出血现象,仍具有形态正常的巨核细胞和血小板[2]。因此推测,很可能存在有其他因子,与TPO一起参与巨核细胞和血小板生成的调控过程。核迁移蛋白C(nucleardistributionC,NUDC)在核迁移中起着关键的作用,NUD

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