ampicillin氨苄青霉素溶液、储存液的配制方法

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时间:2018-08-03

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1、Ampicillin氨苄青霉素干粉氨苄青霉素溶液(储存液)的配制方法-----------------------------------------------------华越洋★华越洋氨苄青霉素溶液:为浓度为50mg/ml的氨苄青霉素溶液,用于分子生物学和组织培养(防止微生物污染和抗菌性筛选)★原理:为能使细菌细胞内层的transpeptidase(转肽酶)失活从而抑制细菌细胞壁的合成。抗体机制:抗性基因bla能特异性表达外周质酶,该酶可切割氨苄青霉素的β-内酰胺环从而使之失活。★保存:-20℃保存华越洋氨苄青霉素干粉简介:华越洋氨

2、苄青霉素为白色晶体或粉末,分子式是C16H19N3O4S,分子量为349.41。溶于稀酸和稀碱,微溶于水和甲醇,几乎不溶于氯仿、96%乙醇、乙醚、乙酸乙酯和固定油。无臭,味苦。抗革兰氏阳性及阴性菌,用于分子生物学和组织培养(防止微生物污染和抗性筛选)。氨苄青霉素时常被用于分子生物学上,作为细菌(如大肠杆菌)吸收基因(如质粒)的测试。测试会将一组基因,连同已编码抗氨苄青霉素的基因插入细菌中。该细菌会被放于充满氨苄青霉素的环境下培育,直至成功制造卞所需的基因。氨苄青霉素是殺菌性的抗生素。能滲透革蘭氏陽性菌及部份革蘭氏陰性菌。經由結合在細菌細

3、胞壁上的青霉素結合蛋白(penicillin-bindingproteins,PBPs),阻礙細菌合成細胞壁的第三及最後階段,最終引致細胞裂解。分子结构:★氨苄青霉素溶液(储存液)的配制方法目的:配制500ml的50mg/ml氨苄青霉素贮存液。实验用品的准备:足够量的2ml的EP管,滤头(内装有两层滤膜)、两个50ml的离心管、注射器,以上用品除注射器外都要进行高压灭菌;注意:(1)滤头灭菌前,安装滤膜时,不要旋得太紧,待灭菌后使用前于超净台上用力旋紧,以防漏液。(2)EP管,滤头、两个50ml的离心管灭菌后要进行烘干。抗生素溶液的配制

4、:(1)称取25g的氨苄青霉素粉末,倒入盛有200—300ml去离子水的烧杯中,最好在烧杯上面盖个东西(封口膜或者干净的滤纸),以防止粉末飘出,轻摇烧杯,可见氨苄青霉素粉末迅速溶解。(2)待氨苄青霉素粉末溶解完,加去离子水至500ml,稍等几分钟让粉末完全溶解,以免过滤时堵塞滤膜。氨苄青霉素溶液的过滤除菌及分装:(1)取出旧报纸包裹的滤头,用力旋紧,备用。(2)用注射器吸取配制好的溶液,然后把滤头安在注射器上,缓缓推动注射器活塞,把溶液经滤膜推至50ml的离心管中,直至把两个离心管都注满。注意:动作用缓和,一只手拿着活塞,一只手拿着滤头

5、,使滤出液出口正对着离心管,还要防止染菌。(3)把50ml离心管中已除菌的氨苄青霉素溶液分装到2ml的EP管中。(4)重复(2)、(3)直至把500ml溶液分装完毕。(5)在EP管上做好标记,包括名称、日期等。(6)把做好标记的盛有氨苄青霉素的EP管于-20℃保存

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