人乳头瘤病毒hpv核酸检测对比分析课件

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1、人乳头瘤病毒(HPV)核酸检测内容HPV与宫颈癌宫颈癌检测方法比较HPV核酸检测方法学比较临床使用宫颈癌妇科第二大癌症每年约有20余万妇女死于宫颈癌新发病:全球---50万/年我国---13.2万/年姓名：哈拉尔德·楚尔·豪森国籍：德国民族：日耳曼课题：发现人乳头瘤病毒（HPV）引发宫颈癌成绩：获得2008年度诺贝尔生理学或医学奖HaraldzurHausen宫颈癌什么是HPV？HumanPapillomavirus人乳头瘤病毒双链DNA无包膜病毒广泛分布于高等脊椎动物定向感染皮肤及粘膜的复层鳞状上皮HPV病毒

2、电镜照片Circular逆转录区域包括控制病毒基因组复制的基因序列E6、E7为两种致癌蛋白编码，它们是高危型HPV导致细胞变性的主要原因E1、E2、E4和E5负责病毒复制L1、L2为两种病毒外壳蛋白编码在预防HPV的疫苗中使用了L1HPV的类型已经鉴定的乳头状瘤病毒有200多种与人有关的约125种30-40种感染生殖道低危型：HPV6、11、42、43、44等中间型：HPV31、33、35、39、51、52、58、59、68高危型：HPV16、18、45、56等临床最重要的型：6、11、16、18、31、33、

3、35、38型8个亚型HPV感染HPV感染的途径和危险因素性传播直接皮肤接触母婴传播性行为混乱免疫抑制吸烟其他STD协同感染口服避孕药HPV感染率与发病率HPV感染与宫颈癌发病率变化图，IntJCancer1993,53:919HPV感染的不同阶段宫颈癌的癌前病变(CIN)CIN=CervicalIntraepithelialNeoplasia宫颈上皮内瘤样病变CIN宫颈不典型增生宫颈原位癌：宫颈上皮细胞发生癌变，但癌变未突破基底膜、间质无浸润。轻度（CINⅠ级）：病变局限在上皮层的1／3内中度（CINⅡ级）：病

4、变局限在上皮层的下2／3重度（CINⅢ级）：病变几乎累及全部上皮层，仅剩1－2层表面的正常鳞状上皮宫颈上皮细胞部分或大部分被不同程度异型细胞所替代定义宫颈癌的癌前病变(CIN)专家共识宫颈癌的“元凶”就是高危型HPV感染高危型HPV感染是宫颈癌的必要条件没有HPV感染，就没有宫颈癌防治HPV感染，就是防治宫颈癌1995年，国际癌症研究协会认为高危固定价HPV的持续性感染是宫颈癌的主要病因宫颈癌感染HPV病毒CIN早期浸润癌唯一知道病因的癌症唯一可以通过早期干预阻断的癌症5-15年内容HPV与宫颈癌宫颈癌检测

5、方法比较HPV核酸检测方法学比较临床使用分子水平细胞水平组织水平宫颈癌检测方法学发展过程1982年醋酸、碘液肉眼检测灵敏度为70.9%特异度为74.3%1996年新柏氏TCT灵敏度为80.8%特异度为51-60%2000年HPV核酸检测灵敏度为98.6%特异度为99%巴氏涂片灵敏度为50%以下特异度为？%1941年宫颈癌筛查发展史组织学检测肉眼观察阴道镜观察组织检查优点：操作简单，价格低廉，适宜作初步筛查；缺点：准确率低，人员素质要求高，病人痛苦程度大。细胞学检测传统巴氏涂片液基细胞学传统巴氏涂片（CV）液基薄

6、层细胞学技术(TCT)自动细胞学检测系统（LCT）计算机辅助细胞检测系统（CCT）细胞学检测的假阴性液基细胞学检测假阴性结果高达20%水平差的地方更高原因分析：1、视野局限2、人为因素1）取标本、片子制备2）技术差异3）耐心、责任心细胞学检测的假阳性1、凹空细胞是HPV感染的主要形态学改变，但不是特异性改变2、HPV正在清除阶段细胞学检测的性价比低TCT阴性要求每年做同样的检查HPV阴性可以把筛查时间延长到3-5年HPV检测TCT检查卫生部《宫颈癌筛查及早诊早治指南》核酸检测直接检查导致宫颈癌的元凶---HPV

7、病毒灵敏度高，特异性好操作简便，可作为疗效评估和监测指标宫颈癌筛查三方案最佳方案：HPV核酸检测+液基细胞基本方案：醋酸白实验一般方案：HPV核酸检测+传统巴氏涂片中国癌症研究协会推荐方法内容HPV与宫颈癌宫颈癌检测方法比较HPV核酸检测方法学比较临床使用HPV第一代核酸检测产品产品：HC2、港龙13型原理：杂交捕获技术特点：检测核酸、不分型、不能科学定量、检测时间长计算机判读15minDNA-RNA杂交60min抗体捕获60min化学发光检测30minDNA分解45minHPV核酸第二代检测产品产品：凯普21

8、型、亚能23型、透景26型、达安19型、港龙29型原理：膜条杂交、液相杂交特点：可以分型，而且高低危都能做需要杂交、时间长。5-10个小时不等。开放式杂交、极易导致实验室生物污染。结果需肉眼判读，增加人为误差。不能定量HPV核酸第三代检测方法产品：上海之江13型分型检测试剂原理：分别采用HPV13种型别的特异性引物及荧光探针，应用PCR+Taqman技术，对HPV13种型的特异性核酸片