HPLC法测定扶桑花中槲皮素的含量.doc

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1、HPLC法测定扶桑花中槲皮素的含量【摘要】目的建立扶桑花中槲皮素的含量测定方法。方法采用HPLC法，色谱柱为DikmaplatisilODS柱(250mm×4.6mm,5μm)，流动相为甲醇0.5%磷酸水溶液(体积比30∶70)，流速1.0mL·min-1，柱温30℃，检测波长360nm。结果槲皮素进样量在0.0416～0.416μg范围内与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为98.95%，RSD为1.09%(n=6)。结论该方法操作简便、快速、准确，可用于扶桑花药材的质量控制。【关键词】扶桑花;槲皮素;高效液相色谱法　Abstract:ObjectiveTodev

2、elopamethodforthedeterminationofquercetininFlosHibisciRosaesinensis.MethodsHPLCwasperformedusingaDikmaplatisilODScolumn(250mm×4.6mm,5μm)withmethanol0.5%phosphoricacidsolution(30∶70)asmobilephaseunderaflowrateof1.0mL·min-1.Thecolumntemperaturewas30℃,andthedetectionwavelengthwas360nm.Re

3、sultsThecalibrationcurveofquerceinwaslinearwithintherangeof0.0416-0.416μg,andtheaveragerecoverywas98.95%withtheRSDof1.09%(n=6).ConclusionThismethodisconvenient,reproducibleandaccurate,andcanbeusedinqualitycontrolofFlosH.Rosaesinensis.　　Keywords:FlosHibisciRosaesinensis;quercetin;HPLC　

4、扶桑花(FlosHibisciRosaesinensis)为锦葵科植物朱槿(HibiscusrosasinensisL.)的花，原产于我国，现广泛栽培于热带、亚热带地区，是我国及印度、斯里兰卡等国家和地区常用的民间药。据本草记载，扶桑花主治肺热咳嗽、咯血、鼻衄、崩漏、白带、痢疾、赤白浊、痈肿毒疮等症[1]。近年来，印度、巴基斯坦等国家对扶桑花抗生育(抑制排卵和着床、抑制精子生成)、抗肿瘤、抗痉挛、促生发、保护心脏、降血压、降血糖、降血脂[2～5]等活性进行了广泛研究，揭示了扶桑花极其重要的开发价值。我国对扶桑花的药学研究和临床应用较少，其丰富的资源亟需开发。　　目

5、前，我国扶桑花仅有地方质量标准，且仅对药材的基源和性状进行鉴别[6]，尚无药效成分含量测定等方面鉴别的报道。扶桑花含有多种黄酮类化合物[1]，其中，槲皮素及其糖苷具有抗氧化、抗肿瘤、抗流感、抗衰老、抗血栓、降血压、护心等作用[7]，是扶桑花的主要药效成分之一，主要以槲皮素3二葡萄糖甙、槲皮素3，7二葡萄糖甙等形式存在[1]。槲皮素的含量测定主要采用高效液相色谱法，但因槲皮素的存在形式不同而测定的色谱条件各异[8,9]。本文对扶桑花中槲皮素的提取及HPLC测定方法进行分析，为完善扶桑花药材质量标准、扩大其临床应用奠定基础。　　1仪器与试药4　　仪器：上海天美LC

6、2000型高效液相色谱系统(LC2030紫外检测器、T2000P色谱工作站);德国赛多利斯BP211D精密电子天平。　　试药：槲皮素对照品(中国药品生物制品检定所，批号100081200406，供含量测定用)。扶桑花采自广州、中山、惠州等地，经广东药学院中药鉴定学教研室刘基柱老师鉴定为锦葵科木槿属植物扶桑的花。样品批次见表1，色谱条件分析采用批次2。提取用试剂均为分析纯，色谱分析用甲醇、磷酸为色谱纯，水为超纯水。表1扶桑花样品批次　　2方法与结果　　2.1色谱条件　　色谱柱为DikmaplatisilODS色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相为甲醇0.

7、5%磷酸水溶液(体积比30∶70)，流速1.0mL·min-1，检测波长360nm，柱温30℃，进样量20μL。理论板数按槲皮素计算大于5000，分离度大于1.5。色谱图见图1。　　2.2溶液的制备　　2.2.1对照品溶液的制备精密称取槲皮素对照品适量，加甲醇制成104μg·mL-1的溶液，即得。　　2.2.2供试品溶液的制备将扶桑花药材阴干，粉碎，过3号筛，取粉末约1g，精密称定，加甲醇50mL，加热回流1h，滤过，滤液蒸干，残渣加20%盐酸15mL溶解，加热回流1h，迅速冷却，用石油醚萃取3次，每次15mL，合并水相，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至