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《无色孔雀石绿、环丙沙星和四环素残留的分析检测》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、无色孔雀石绿、环丙沙星和四环素残留的分析检测TurboFlow联合LC-MS/MS方法进行食物样品中孔雀石绿、无色孔雀石绿、环丙沙星和四环素残留的分析检测简介:为了保证食物供应链的安全性和全球健康风险管理的有效性,对食品和农产品中化学物质残留水平进行精确的检测是非常必要的。而化学物质的残留分析要求检测技术具有足够高的灵敏度,能够在污染物的最大检出限(MRL)或最大检出限(MRL)水平以下从给定样品中检出被污染物并对其进行定量。另外,因为食品安全相关规定日益严格,所要检测的样品数量也在不断增大,因此分析
2、技术是否具备高通量处理样品的能力也是非常关键的。随着水产业持续快速的发展,人们对水产养殖过程中未批准药物和不安全化学物质的使用也越来越关注。孔雀石绿(MG),是一种三苯甲烷类人工合成有机化合物,既是染料,也是高效杀菌剂,而且价格低廉。因此它在水产养殖过程中被广泛使用,特别是在亚洲地区。(孔雀石绿、无色孔雀石绿的化学结构式见图1)图1孔雀石绿、无色孔雀石绿的化学结构式孔雀石绿(MG)在代谢过程中降解成无色孔雀石绿(LMG),研究发现:无色孔雀石绿在含脂肪的鱼的器官中会发生累积现象,因为人们在已经检测不到
3、孔雀石绿的样品中仍然会发现无色孔雀石绿的残留。而研究证明,无论是孔雀石绿还是无色孔雀石绿,都有潜在的致癌活性。因此,在许多国家,包括美国、加拿大和欧盟,孔雀石绿已经被禁止作为兽用药在水产养殖业使用。因为一些化学物质被禁止在动物肉类加工制作的食品中使用,欧盟法规规定了这些物质的最低允许限量(MRPL)。鱼肉中有关孔雀石绿和无色孔雀石绿的残留总量的最低允许限量为2μg/kg(ppb)。环丙沙星是一种广谱性抗菌素(化学结构式见图2),属于氟喹诺酮家族的成员之一。氟喹诺酮类是近年来人工合成的一系列新型杀菌性抗
4、菌药物,因其抗菌谱广、抗菌活性强等特点而广泛应用于畜禽饲养业和水产养殖业的多种感染性疾病的防治当中。然而,食品中氟喹诺酮类残留会诱导人类致病菌产生耐药性。因此,随着氟喹诺酮类药物在动物源性食品中的广泛应用,其残留问题越来越引起社会各界的广泛关注和有关部门的高度重视。FDA禁止动物食品中氟喹啉的超标使用。欧盟法规规定氟喹诺酮类药物?恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星的总量在所有生产食品的动物肌肉和猪肝脏中的最大残留限MRLs分别为100μg/kg(ppb)和200μg/kg(ppb)。图2环丙沙星的化学结构式
5、四环素是一种聚酮类抗生素,它对一些革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌具有高效作用(化学结构式见图3)。和其他兽用抗生素一样,四环素用于食用动物后,在动物体内和畜禽产品中会有残留现象,残留的四环素同样会使得人们对这些药物的耐药性提高。欧盟兽药残留也对此作了相关规定,四环素在所有生产食品的动物肌肉和猪肝脏中最大残留限MRLs分别为100μg/kg(ppb)和300μg/kg(ppb)。图3四环素的化学结构式ThermoScientific针对以上残留检测需求提出了相应的解决方案--AriaTLX系统,该系统是将T
6、urboFlow技术与TSQQuantumAccess质谱技术进行完美结合。它为LC-MS/MS质谱配置了在线样品提取功能,与传统的脱机提取方法相比,该方法进行食品中化学物质残留分析更快捷,更可靠。TurboFlow技术通过扩散溶解、尺寸排阻、柱层析技术将蛋白等一些大分子物质滤掉,将小分子保留。工作人员可以直接注射检测样品进入LC-MS系统进行分析,大大的简化了样品制备过程,并提高了检测通量。研究目标:验证该技术与液液提取或固相萃取等传统技术相比具备的以下优势:样品分析所需的总时间减少了,同时降低了食
7、品中的离子抑制和基质效应的影响。实验条件:1.样品制备乙腈提取法:虾(具头)、罗非鱼和猪肝脏分别各称取3~4g,与30ml乙腈充分混匀,室温放置10min,上层液体被移入到0.22?m的微孔离心管中,10000rpm离心10min,转移上清到50mL玻璃闪烁瓶中,即为制备的样品。该样品制备过程总共需要25min。标准溶液配制:1mg/L的孔雀石绿、无色孔雀石绿、环丙沙星、四环素混合溶液为储存溶液,用甲醇将之稀释到0.1mg/mL(1000?g/ml)。标准溶液是通过梯度稀释的方法将储存溶液稀释到合适浓
8、度并加入到三个已制备样品中,其浓度范围为10?g/kg~5ng/kg。以上总的样品制备过程大致需要30到40分钟。2.TurboFlow方法AriaTLX-1系统ThermoFisherScientific,Franklin,MA:多柱模块(MCM)允许6根上样柱和6根分析柱一次性检测,使得方法开发更为容易。首先,上样柱能使得每一种分析物都达到高的回收率。由于所有的被分析物都溶解在一种储存溶液中,运行所需时间就被最大程度地缩短了。所选择的分析柱也具有高的
