生物：5.1《dna的粗提取与鉴定》教案（新人教版选修1）高二

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1、DNA的粗提取与鉴定教学目标：1、知识与能力目标理解DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理，初步掌握DNA的粗提取和鉴定方法，理解相关溶液的作用机理，培养学生的分析能力，通过实验使学生能够简述科学探究的基本过程。2、情感态度与价值目标通过探索培养科学的怀疑精神和创新精神；通过实验结果，学生树立生命物质性的观点。教学重点：提取DNA的相关原理和步骤教学难点：提取DNA的相关原理和步骤教学过程：开门见山：讲解本实验的目的是提取DNA和DNA的鉴定，其中提取DNA是本实验的重点和难点。提出问题：“DNA主要存在于什么结构上？”“如何提取DNA？”“选什么材料好？”达成共识：1、造适宜材料

2、：选动物细胞，易打破细胞结构2、破坏细胞膜、核膜结构，得核物质。3、将DNA与蛋白质等物质分开，得DNA4、去掉DNA中杂质，提纯DNA。探究实验原理：屏幕展示表格1NaCl2mo1/LNaC10.14mo1/LNaC10.015mo1/LDNA 蛋白质表格2 DNA蛋白质杂质95%酒精不同浓度的NaC1溶液可溶解或析出DNA。95%酒精可提取DNA。填表1：NaCl2mo1/LNaC10.4mo1/LNaC10.015mo1/LDNA最大最小变大蛋白质解聚最大变小填表2：DNA蛋白质杂质95%酒精不溶可溶可溶通过对实验原理的预习，表格的比较，使学生明确了各溶液的用途，保证理解实验。请学生代表

3、简述DNA提取实验步骤投影展示实验设计思路：鸡血细胞液①aDNA释放②bDNA与蛋白质的分离③cDNA析出④dDNA浓缩（提纯）获得鸡血细胞核物质：提核物质→溶解→析出→溶解→析出实验步骤：引导学生讨论、回忆并回答目的①~⑨。①防止血凝。②加速血细胞破裂。③溶解DNA。④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L，促DNA最大限度地析出。⑤使含DNA的黏稠物被留在纱布上。⑥使含DNA的黏稠物尽可能多地溶于溶液中。⑦除去含DNA的滤液中的杂质。⑧提取DNA。⑨A：出现蓝色。B：无变化讨论与结论：投影给出如下讨论提纲，供学生讨论。（1）DNA粗提取过程中的关键是哪几步？（2）提取鸡血中的

4、DNA时，为什么要除去血液中的上清液？（3）DNA的直径约为2nm，实验中出现的丝状物的粗细是否表示一个DNA分子直径的大小？学生分组进行讨论并发表讨论结果。教师对讨论进行全程指导，并与学生一起归纳总结。（1）a．提取鸡血细胞的核物质。应用低渗原理和机械搅拌，可得到最大量的DNA。b．析出DNA黏稠物。加蒸馏水要慢，搅拌要轻。c．沉淀DNA时，必须用冷酒精。（2）提取DNA，去除杂质是关键。由于上清液是血液中的血浆部分，不含DNA，所以要除去（含蛋白质）。（3）实验中出现的丝状物是肉眼可以观察到的，这种丝状物的直径要比DNA分子的直径2nm大许多倍，所以实验中出现的丝状物并不表示一个DNA分子

5、的直径。实验结论：细胞中有DNA，DNA遇二苯胺试剂在沸水浴中变蓝色。教学目标巩固1．实验中步骤1和步骤3都需要加入蒸馏水，两次加入的作用相同吗？为什么？2．实验中NaCl的物质的量浓度为2mol/L和0.14mol/L对DNA有何影响？3．DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成A．砖红色　B．橘黄色　C．紫色D．蓝色补充知识：1、鉴定DNA的其他方法用紫外灯照射法鉴定DNA效果很好。具体鉴定方法如下。1．配制染色剂。用蒸馏水配制万分之五的溴化乙锭（EB）溶液。2．将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上，再滴一滴EB溶液染色。3．将蜡纸放在紫外灯（260nm）下照射（暗室中），可见橙红色的萤光（DNA的

6、紫外吸收高峰在280nm处）。2、DNA粗提取与鉴定的另一种方法1．材料用具新鲜菜花（或蒜黄、菠菜）。塑料烧杯，量筒，玻璃棒，尼龙纱布，陶瓷研钵，试管，试管架，试管夹，漏斗，酒精灯，石棉网，三角架，火柴，刀片，天平。研磨液，体积分数为95%的酒精溶液，二苯胺试剂，蒸馏水。2．方法步骤A．DNA的粗提取（1）准备材料：将新鲜菜花和体积分数为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室，至少24小时。（2）取材：称取30g菜花，去梗取花，切碎。（3）研磨：将碎菜花放入研钵中，倒入10mL研磨液，充分研磨10min。（4）过滤：在漏斗中垫上尼龙纱布，将菜花研磨液滤入烧杯中（有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行

7、离心，用1000r/min的旋转频率，离心2~5min；取上清液放入烧杯中）。在4℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液。（5）加冷酒精：将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%的酒精溶液中，并且玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液（玻璃棒不要直插烧杯底部）。沉淀3~5min后，可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转，絮状物会缠在玻璃棒上。B．DNA的鉴定（1）配制二苯胺试剂：取0.1mLB液；滴入到