银杏叶黄素的提取及紫外光谱表征

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1、浙江农林大学开放性实验论文项目名称银杏叶黄素的提取及紫外光谱表征学院班级理学院姓名王卉殊学期2012-2013年第一学期银杏叶黄素的提取及紫外光谱表征班级:应用化学112班姓名：王卉殊摘要：本实验用乙醇提取，通过氧化铝柱层析，用正己烷洗脱，得到的叶黄素。即可除去银杏叶中大量的醇溶性杂质，又可得到了纯净的叶黄素。将叶黄素用紫外分光光度计表征，确定其最大吸收波长。关键词：银杏叶，叶黄素，提取，柱层析，紫外分光光度计1文献综述1.1银杏叶的概述银杏叶（GinkgoLeaf）是近年来国内外药物开发和研究的热点之一，其脂溶性提取物主要成分为黄酮和内酯类化合物，已被广泛应用于心脑血管疾病的治疗。银杏叶，

2、性味苦甘涩平，内含双黄酮，经实验和临床证明，它具有降低血清胆固醇、扩张冠状动脉的作用，对于冠心病、高血压有一定的辅助治疗作用.[1]叶黄素是一种无维生素A活性的类胡萝卜素，属纯天然色素，无毒副作用，不溶于水，溶于油脂、乙醇等。叶黄素有八种异构体，以全反式为主，一般从植物中提取。叶黄素广泛存在于蔬菜、花卉、水果与某些藻类生物中，属于“类胡萝卜素”族物质，而类胡萝卜素是国际公认的具有防病抗病生理功能的天然物质，其主要功能是单线态氧的有效淬灭剂，能消除羟自由基，是脂类过氧化反应的断链抗氧化剂，在细胞和细胞膜中和脂类结合而有效的抑制脂类的氧化，对于人体疾病的预防发挥重要的作用。开发利用银杏叶黄素对于

3、丰富叶黄素来源，提高银杏叶的价值具有重大意义。[1]抗氧化剂是一种在植物中广泛存在的化学物质，能够和体内的自由基广泛结合，发挥抗氧化作用。自由基可以提高机体的氧化作用，杀死体内的有害菌并产生能量，但过量的自由基将损害细胞，危害健康。随着对抗氧化剂研究的不断深入，人们认识到不同的抗氧化剂在体内执行不同的生物学功能。叶黄素（Xanthophylls）是一种性能优异的抗氧化剂，是构成玉米、蔬菜、水果、花卉等植物色素的主要组分之一，叶黄素在甘蓝、羽衣甘蓝、菠菜等深绿色叶菜以及金盏花、万寿菊等花卉中含量最高。在南瓜、桃子、辣椒、芒果、柑橘、蛋黄中则含丰富的叶黄素前体－叶黄素酯。人类的眼睛黄斑区含有高浓

4、度的叶黄素，是构成人眼视网膜黄斑区域的主要色素[2]，但在人体内无法制造，必须靠含叶黄素的食物来补充，若严重缺乏这种色素，眼睛就会失明。1.2叶黄素化合物的研究进展国外对叶黄素的研究已有10多年的历史,在开发应用叶黄素方面,美国Kemin公司、瑞士Roche公司处于研究的前沿。除了美国和瑞士的公司外,日本和德国的一些公司也均有叶黄素及其保健产品的研究与生产。在国际市场上,含叶黄素的保健食品和营养补充剂的价格约为35～45美元ö瓶,其中50粒(胶囊)ö瓶,20mgö粒(胶囊),叶黄素产品的利润空间十分丰厚[3]。近几年,国内的青岛大学天然产物研究所、北京大学、中国农业大学等单位均开展了叶黄素研

5、究工作。广州市范乐医药科技有限公司与瑞士Roche公司合作生产的以叶黄素为主要有效成分的维视保软胶囊已经面世。但是,与国外的研究进展相比,国内的研究与生产水平还有一定差距。开发和研制高纯度叶黄素,研究其稳定剂型,拓宽其应用领域,使其产业化,将是我国研究人员今后的一项重要工作。1.1叶黄素化合物的提取方法分离及提取　　(1)、膜分离技术。　　用陶瓷膜微滤(MF)对浸提液进行精滤提纯，再用反渗透膜(R0)浓缩过滤液。这种工艺以膜分离技术为主体，替代了传统的酒精提纯和蒸发浓缩，工艺过程简单、色素溶液基本处于常温操作状态，既节约能源，又保证了色素产品的质量。　　(2)、干燥法提取叶黄素。　　研究出一

6、种新型转筒式干燥机，用来干燥和捶击金盏花或者万寿菊花瓣，可以从中提取叶黄素。当捶击比率不同时，捶击效率就在70%～90%之间波动。叶黄素的多少决定于干燥时间长度。但在相同的干燥时间里，70℃下干燥提取的叶黄素含量比60℃下提取的叶黄素含量要少。　　(3)、高效液相色谱分析法提取。　　以二氯甲烷(22.5mL)+乙腈(9.5mL)+甲醇(67.5mL)+水(0.5mL)为流动相，流量为1.0mL/min。使用光度检测器(波长为450nm)检测分离后的类胡萝卜素和叶绿素。样品进样体积为20μL。在此条件下，叶黄素、叶绿素b、叶绿素a、番茄红素(lycopene)、α-胡萝卜素和β-胡萝卜素的保留

7、时间分别为3.0、4.9、6.6、12.1、14.6和15.3min。取螺旋藻的培养液(通过测定光密度(560nm)得出培养液中螺旋藻干重于离心管中，离心后弃去溶液，加水洗涤后，加入2mL体积分数为90%丙酮水溶液，置于超声波发生器水浴上，使螺旋藻破碎。离心后取上层提取液用高效液相色谱法测定叶黄素/玉米黄质、β-胡萝卜素及叶绿素a的含量，其最高含量分别为：1.65μg/mg，2.15μg/mg和21.4μg/