a001 sod说明书05.3.11-1222

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1、超氧化物歧化酶（SOD）测试盒货号：A001目录试剂盒的介绍………………………………………………………………………2测定意义……………………………………………………………………………2测定原理……………………………………………………………………………2试剂盒有效期和保存条件…………………………………………………………2实验中所需的仪器和自备的试剂…………………………………………………2总SOD的测定……………………………………………………………………3高脂血症血清（浆）中SOD的测定……………………………………………6红细胞中SOD的测定…………………………………

2、…………………………9总SOD与分型SOD的测定方法⒈抽提法测CuZn-SOD………………………………………………………………12⒉SDS和KCl抑制Mn-SOD测定CuZn-SOD………………………………………16⒊KCN抑制CuZn-SOD测定Mn-SOD………………………………………………19参考值……………………………………………………………………………22注意点……………………………………………………………………………22试剂盒优点………………………………………………………………………23附录：SOD标准曲线的制备……………………………………………………

3、.2424试剂盒的介绍本试剂盒采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SuperoxideDismutaseSOD)活力，可测血清(浆)、脑脊液、胸水、腹水、肾透析液、尿液、红细胞、白细胞、血小板、心肌培养细胞、肿瘤培养细胞、各种动植物组织细胞及亚细胞水平(线粒体、微粒体)中的SOD活力，并可检测微生物、药物、食品、饮料、化妆品中的SOD活力。既适用于常规检验工作，又能满足科研工作的需要。测定意义.超氧化物歧化酶（SOD）对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用，此酶能清除超氧阴离子自由基（O2－·）保护细胞免受损伤。因而SOD活力的高低与衰老、肿瘤、炎症、自身免

4、疫病、血液病、心血管病、肾脏病、消化系统疾病、辐射、药物作用等有着密切的联系，对疾病的病因学探讨、诊断、治疗、术后的观察有着重要意义。测定原理通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子自由基（O2－·）,后者氧化羟胺形成亚硝酸盐，在显色剂的作用下呈现紫红色，用可见光分光光度计测其吸光度。当被测样品中含SOD时，则对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用，使形成的亚硝酸盐减少，比色时测定管的吸光度值低于对照管的吸光度值，通过公式计算可求出被测样品中的SOD活力。高等动物细胞内只有二种SOD即铜锌-SOD（CuZn-SOD）与锰-SOD(Mn-SOD),二者相加等于总

5、SOD(T-SOD)。KCN可抑制CuZn-SOD活力，而Mn-SOD活力不变，而经样本前处理过的样本中Mn-SOD活力丧失，但CuZn-SOD活力不变。试剂盒有效期和保存条件本试剂盒保存期：6个月；贮存温度：4℃，注意4号试剂不可放在0℃以下，否则酶会失效，所用塑料吸嘴尖要干净，最好消毒，或者用蒸馏水将新吸嘴尖头反复冲洗，一定要避免菌类及重金属离子污染。实验中所需的仪器和自备的试剂1.550nm的分光光度计2.37℃恒温水浴锅3.台式离心机4.微量式移液器5.蒸馏水6.冰醋酸（分析纯）24总超氧化物歧化酶（T-SOD）活力的测定一、试剂的组成与配制：（一）、10

6、0管试剂盒的组成与配制：1、试剂一：贮备液：10ml×1瓶（天冷时或放冰箱会有部分结晶析出，需热水浴溶解后再用）；试剂一应用液的配制：用时每瓶加蒸馏水稀释至100ml，4℃保存。2、试剂二：液体10ml×1瓶，4℃～10℃保存。3、试剂三：液体10ml×1瓶，4℃～10℃保存。4、试剂四：液体350μl×2支，4℃保存，不可冷冻；4号稀释液5ml×2瓶，4℃保存。用时二者按1∶14稀释，可以一次稀释，也可以分次稀释。配好的试剂四4℃保存，不可冷冻。配好后可保存2~3个月。注：所用吸嘴最好为专用且消毒处理过。5、试剂五：粉剂×1支，用时加70℃~80℃热双蒸水75m

7、l溶解后备用，若加热过程中水分蒸发减少，此时必须用蒸馏水补充至75ml，配好后的试剂避光4℃冷藏。6、试剂六：粉剂×1支，用时加蒸馏水75ml溶解后备用，配好后的试剂避光4℃冷藏保存。显色剂的配制：按照试剂五∶试剂六∶冰乙酸=3∶3∶2的体积比配成显色剂，4℃避光冷藏。（二）、50管试剂盒的组成与配制：1、试剂一：贮备液：5ml×1瓶（天冷时或放冰箱会有部分结晶析出，需热水浴溶解后再用）；试剂一应用液的配制：用时加热蒸馏水稀释至50ml，4℃保存。2、试剂二：液体5ml×1瓶，4℃～10℃保存。3、试剂三：液体5ml×1瓶，4℃～10℃保存。4、试剂四：液体350

8、μl×1支