专题2 动物细胞工程

专题2 动物细胞工程

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时间:2018-08-08

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1、专题2细胞工程2.2动物细胞工程一、知识与技能目标1、掌握动物细胞培养的过程和条件、动物体细胞核移植的过程,并了解它们的前景及存在的问题。2、知道动物细胞融合的概念、方法及单克隆抗体的制备与应用,并正确理解动物细胞融合的原理。二、过程与方法目标1、运用细胞的基础知识,深刻理解这两项技术的原理,并理解这些技术的新进展。2、结合免疫原理、融合原理以及动物细胞培养,全面理解单克隆抗体的制备过程,利用动物细胞培养技术对杂交瘤细胞进行体外培养和体内培养可生产出专一性强,灵敏性高的抗体。三、情感与价值观目标通过对

2、动物细胞培养技术发展史及单克隆抗体具体应用的学习,体验现代生物科技日新月异的发展及与现代医学的联系,坚定自己投入到自然科学发展中的信心。四、教学过程v植物细胞工程常用的技术手段有哪些?、动物细胞工程常用的技术手段:动物细胞培养、、、单克隆抗体是其他动物细胞工程技术的基础是。一、动物细胞培养技术1、概念:动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织,将它分散成,然后,放在适宜的培养基(培养基)中,让这些细胞和。2、原理:(通过分裂增殖)例1、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器

3、官或组织,其主要原因是这样的组织细胞( ) A.容易产生各种变异B.具有更强的全能性C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强一般取动物或动物的组织、器官,因为分化程度低,增殖能力强4、过程加培养液剪碎取健康动物的组织块细胞悬浮液单个细胞(用酶或酶处理分散成)装入瓶内制成作用:去掉组织细胞间传代培养原代培养⑴在进行动物细胞培养时,用分散细胞,说明细胞间的物质主要是。不用胃蛋白酶分散细胞的原因是:动物细胞培养适宜的PH为,此环境下胃蛋(2.0)活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性。⑵生长特点(在培养瓶或

4、培养皿中生长)①细胞贴壁生长:培养瓶中的悬浮液细胞,紧贴培养瓶内壁才能生长。要求培养瓶或培养皿的内表面,易于。②接触抑制:当培养瓶中内壁生长细胞彼此时,细胞不再分裂⑶原代培养:将动物组织消化后的培养称为原代培养⑷传代培养:将贴满细胞壁的细胞用酶处理,然后分瓶继续培养,继续增殖,这样的培养过程称为传代培养。注意:①上述过程中,在第一培养瓶中培养就是原代培养,之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养②传代培养的细胞一般传至代就不易传下去了,,一般来说细胞传至10~50代增值缓慢甚至停止,部分细胞的会发生变化

5、(遗传物质未改变);当继续培养(50代后)有少部分还发生向细胞方向发展(遗传物质发生改变)。目前使用或保存的的细胞为代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。③目前不能用动物培养的方法获得完整的动物个体。(高度分化的动物细胞无全能性,核有全能性)④动物细胞培养无脱分化过程5、动物细胞培养条件:⑴、无菌、无毒的环境(即对培养液和所有培养用具进行处理)添加一定量的:以防培养过程中的定期更换:以便清除,防止对细胞自身造成危害。⑵、营养(培养基的成分):、、、、、⑶、温度和PH温度:适宜温度与动物体温相近,哺乳动物

6、多以为宜,PH:⑷、气体环境:主要是O2和(95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养)CO2的主要作用:培养时通常采用培养皿或松盖培养瓶,置于95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养6、动物细胞培养技术的应用v大规模培养生产生物制品(如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体)v动物细胞是基因工程技术中常采用的受体细胞,基因工程也离不开动物细胞的培养。v获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮v培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,判断某种物质的v为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据例2、植物细胞和动物细胞培

7、养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质固体培养基培养基特有成分蔗糖、植物激素葡萄糖、动物血清培养结果植物体细胞群体培养目的获得细胞或细胞产物二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1、概念移植:将动物的一个细胞的,移入一个已经去掉细胞核的中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体。用的方法得到的动物称为克隆动物。核移植移植(难度高)受体细胞:细胞2、体细胞核移植过程(以克隆高产奶牛为例)取体细胞电刺激使两细胞融合,供体核进入受体卵母细胞。去核的卵母细胞将供体细胞注入细胞

8、(次级卵母细胞)去核供体细胞培养高产奶牛(供体)用物理或化学方法激活受体细胞生出小牛将胚胎移入母牛体内构建重组胚胎注意:⑴用与核移植的供体细胞一般都选用传代代以内的细胞⑵用核移植得到的克隆动物不是对体细胞供体动物进行100%的复制3、体细胞核移植技术的应用前景⑴.加速家畜改良进程,促进优良畜群繁育⑵保护濒危动物⑶转基因克隆动物作为生物反应器,生产医用蛋白⑷治疗人类疾病,作为移植供体4、体细胞核移植技术存在的问题许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷,如体型过大

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