微生物的培养和分离选修1答案

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1、微生物的营养和培养(人教版选修1)一微生物的实验室培养(p14-20)1.营养物质供其生长繁殖的营养基质液体培养基固体培养基是否加入琼脂选择培养基鉴别培养基选择培养基只允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他微生物生长2.固体培养基菌落种群3.碳源、氮源、水、无机盐、生长因子。硝酸盐等无机氮源,CO2,糖类等有机物,N2,CO2,NH3,糖类等有机物,硝酸盐等无机氮源以及含氮的有机物。4.某细菌培养基的配方蛋白胨葡萄糖NaCl牛肉膏蒸馏水含量10g10g2g0.4g1000mL提供的主要营养碳源、氮源、生长因子碳源无机盐碳源、氮源、生长因子-----------5.防止外来

2、杂菌入侵,(1)空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子),煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒(酒精擦拭、氯气消毒)、紫外线消毒、石炭酸或煤酚皂溶液消毒等。(2)器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内所有的微生物,包括芽孢和孢子。灼烧灭菌(接种环、接种针等)、干热灭菌(玻璃器皿和金属用具等)、高压蒸汽灭菌等(培养基、培养皿等),高压蒸汽灭菌法。(3)酒精灯火焰,灼烧灭菌,接种环、接种针等6.3)pH4)灭菌,高压蒸汽灭菌法5)倒平板,酒精灯火焰,倒置(即皿盖在

3、下,皿底在上),平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。7平板划线和稀释涂布平板法,通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面,经过数次划线后培养可以分离得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落,接种环1)操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使下一

4、次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。图略,见书18页2)以免接种环温度太高,杀死菌种。3)划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,在稀释度足够高的菌液中,聚集在一起的微生物将被分散成单个细菌,从而在培养基表面形成单个

5、的菌落。三角玻璃刮刀火焰附近。用移液管吸取1ml培养的菌液,注入9ml无菌水,用手指轻压移液管的橡皮头,吹吸3次,充分混匀,这样稀释了101倍,以此类推。8.颜色、形状、大小等,说明培养基上出现了其他菌,可能是培养基或者接种过程未达到无菌操作。设置空白对照9.固体斜面培养基,4℃冰箱保存,菌种容易污染或产生变异。甘油管藏法。相关习题12345678910111213141516ABCACABCDACBDABDBABCDB17.(1)异养需氧型与氧结合生成水(2)异养厌氧型(3)①基因突变②初级(即生长所必需的)生长因子③细菌a1能合成营养物质乙,细菌a2能合成营养物质甲(或两者

6、分别能合成对方所不能合成的营养物质)18.(1)碳源、氮源、生长因子、无机盐、水分(2)固体分离和计数(3)①防止培养基的温度过高使培养皿因受热不均而破裂②防止培养基的温度过高而杀死接种在其上的微生物③让微生物在适宜的温度下快速生长繁殖19.(1)温度酸碱度易培养生活周期短(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3)比例合适(4)鉴定(或分类)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生.(6)灭菌20.(1)碳源无机盐水生长因子(2)高压蒸汽灭菌(3)恒温培养箱无菌水(4)多高(5)盐(或NaCl)选择性培养基二微生物的分离和计数(人教版选修1p21

7、-p26)1.耐高温的TaqDNA聚合酶,70-80℃高温条件。2.仅以尿素为唯一氮源的培养基3仅以纤维素为唯一碳源的培养基4有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。只允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基5.稀释涂布平板法、显微镜直接计数等,稀释涂布平板法,菌落,活菌。菌落数,活菌,菌落数。30-300,低,当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。6.排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度

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