用高倍显微镜观察叶绿体实验步骤

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1、活动目标1．使用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体的形态和分布。2．识别光学显微镜下的叶绿体和线粒体。背景资料1．相关知识地球上绝大多数生命活动所需能量的最终源头是太阳能。绿色植物是主要的能量转换者，完成这一能量转换的细胞器是叶绿体。叶绿体利用光能将二氧化碳和水合成糖类等有机物，同时产生氧。在高等植物细胞中叶绿体呈椭球形，长径5～10μm，短径2～4μm，厚2～3μm。高等植物的叶肉细胞中一般含50～200个叶绿体，可占细胞质的40%。叶绿体的数目因同种植物不同细胞类型、生态环境、生理状态而有所不同。在藻类细胞中，叶绿体形状多样，有网状、带状、

2、裂片状和星形等，而且体积巨大，长径可达100μm。线粒体是动植物细胞中重要的细胞器，与能量转换有关。线粒体一般呈粒状或棒状，因不同的细胞种类和生理状态而不同，可呈环形、哑铃形、线状、分支状或其他形状。线粒体数目因细胞种类和生理状态不同有所差异，一般在一个细胞中有数百到数千个。植物细胞因有叶绿体的缘故，线粒体数目相对较少；肝细胞中约有1300个线粒体，占细胞体积的20%；巨大变形虫中线粒体数目可达50万个；许多哺乳动物成熟的红细胞中无线粒体；酵母细胞中有一个大型分支状的线粒体。线粒体通常分布在细胞生命活动旺盛的区域。例如，在肝细胞中呈均匀分

3、布；在肾细胞中靠近微血管，呈平行或栅栏状排列；在精子中集中在尾的基部。线粒体在细胞质中可以向生命活动旺盛的区域迁移。2．实验原理（1）叶绿体的观察植物绿色部位的细胞中含有叶绿体。如果将叶片的横切片制成临时装片，就可以在显微镜下观察到叶绿体。某些植物幼嫩的叶也可直接用于观察叶绿体。（2）线粒体的观察线粒体是细胞进行有氧呼吸的主要场所，内含细胞色素氧化酶系。健那绿是一种碱性染料,可以专一性地对线粒体进行染色。与线粒体内的细胞色素氧化酶系发生作用时，染料始终保持氧化状态,呈蓝绿色;而线粒体周围的细胞质中的染料被还原为无色的状态。通过染色可以在高

4、倍显微镜下观察到呈现蓝绿色的线粒体。操作指南1．材料藓类、菠菜或黑藻的叶，人的口腔上皮细胞，洋葱内表皮细胞。2．用具显微镜，载玻片，盖玻片，滴管，镊子，消毒牙签。3．试剂及配制方法（1）试剂清水，健那绿染液。（2）试剂的配制方法①等渗溶液称取0．85gNaCl、0．25gKCl、0．03gCaCl2溶于100mL蒸馏水中。②健那绿染液先称取10mg健那绿溶于1mL等渗溶液中，用滤纸过滤。再取滤液加入49mL等渗溶液中，即为染色液。4．操作要点（1）制作临时装片①在观察黑藻前10min，用40°C的水浸泡黑藻的叶。这样的叶用于制作临时装片，

5、便于观察到黑藻的叶绿体随细胞质而流动。②在适宜的温度下制作人的口腔上皮细胞临时装片。可以将健那绿染液保持在37°C，尽可能使人的口腔上皮细胞在染色期间保持在生活状态。③用健那绿染液染色时，要染色10～15min。在此期间要适当添加染液，以保证细胞不干燥。（2）观察①观察时，注意通过调整光圈来调节反射光线的强弱，使进入物镜的光线不要太强。②按照正确的观察顺序，先用低倍镜找到观察的物像，通过移动临时装片选择单层的典型细胞，再转换高倍镜进行观察。分析讨论1．选择观察叶绿体的实验材料时，应注意什么问题？2．具有较多线粒体的细胞在功能上有什么特点？

6、3．为什么用健那绿染液作为观察线粒体的染色剂？4．细胞中的叶绿体和线粒体的共同特点是什么？评价建议操作步骤规范的操作方法分值得分安放显微镜及对光将显微镜放在实验台的正确位置上。调节粗准焦螺旋，使物镜上升至适当高度。转动转换器，使低倍镜对准通光孔，调节光圈和反光镜，使视野变明亮2分制片选取材料适量，无气泡2分低倍镜观察材料展放均匀，细胞图像清晰2分染色工作台清洁，材料无干燥现象2分高倍镜观察及效果将清晰物像移至视野中央，细胞图像清晰2分实验《使用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体》成绩