血细胞分析仪的应用及形态学复检

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1、血细胞分析仪的应用及形态学复检ProgramofUrbanandRuralCounterpartSupportonClinicalLaboratoryTechnologyStandardDevelopmentandTraining2021/7/10城乡对口支援临床检验技术标准制定及培训主要内容一、血细胞分析仪发展简史二、血细胞分析仪检测原理三、血细胞检验图形及临床应用四、如何保证检验结果的准确性血细胞形态学复检血细胞分析仪性能评价及全面质量管理血液分析产品的发展历程17世纪列文虎克原始的显微镜1674年列文虎克《伦敦皇家学会哲学学报》------第一篇对红细胞的

2、正式记载1855年发明了用于计数血细胞的计数板改良Neubauer计数板1879年埃尔利希(德国)发明活体染色法2021/7/10一、血细胞分析仪发展简史库尔特原理血细胞是相对不良导体，当其悬浮于电解质溶液中通过检测微孔时，会改变微孔内外原来恒定的电阻，结果产生电脉冲。脉冲的大小代表了通过微孔血细胞的体积大小，脉冲的数量代表了通过微孔血细胞的数量。WallanceH.Coulter20世纪40年代后期，美国人库尔特发明并申请了粒子计数的设计专利。2021/7/10基于Coulter原理的血细胞计数在1953年获得美国发明专利同年和他的兄弟约瑟夫（Joseph）开创

3、了自己的公司，并成功的设计和制造出了可以计数血细胞的专用仪器，然后开始了在这一领域的商业运作华莱士.库尔特约瑟夫.库尔特2021/7/10血细胞分析仪的发展历史70年代血小板与红细胞同时计数80年代，在8项检测基础上加上红细胞指数、三个直方图的报告，不仅提供是否贫血，且可对贫血的类型和原因进行分析；90年代，将激光、射频、化学染色计数应用于对细胞特性的分析，五分类血液分析仪出现并得到广泛的应用VCS原理激光法原理荧光染色法化学染色法血细胞分析仪的现状血常规检验多参数化有的仪器可以提供40~50种测量或计算参数，有的甚至还整合了免疫化学参数，如CD3,CD4等以及C

4、反应蛋白水平。多功能合成扩展已经不仅仅局限在进行常规血细胞分析，近年来它增加了许多扩展的功能。例如将网织红细胞(RET)的计数和分析功能加入其中。检测速度的提高增加了自动进样系统，测定速度加快，一般可以达到每小时80~100个样品。血细胞分析仪产品的系列化和流水线化2021/7/10数字化图像分析或仪器视觉技术进入血细胞形态学检验利用单克隆抗体标记技术提高仪器识别细胞能力同机检测血细胞和血浆内化学或免疫学指标机内“专家诊断系统”的临床应用实现血细胞分析仪与标本前处理仪器、生化分析仪、免疫分析仪更便捷的全自动流水线血细胞分析仪技术展望2021/7/10二、血细胞分析

5、仪的检测原理红细胞、血小板计数原理白细胞分类计数原理血红蛋白检测原理2021/7/10platelets（一）红细胞、血小板计数原理电阻抗法（库尔特原理）2021/7/10红细胞与血小板的检测在同一通道，小红细胞，细胞碎片及血小板自身的聚集等对血小板计数及平均血小板体积的影响较大，血小板直方图能反映这些变化，出现异常血小板直方图，根据图形的变化可了解血小板计数的准确性。（大于右侧阈值考虑为红细胞）（二）白细胞分类计数原理白细胞三分群计数原理白细胞五分类计数原理2021/7/10根据白细胞体积大小，可初步确认细胞分群第一群（30-90fl）：小细胞群，主要分布的是淋

6、巴细胞第二群（90-160fl）：中间细胞群，主要包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞，核左移的各阶断幼稚细胞或白血病时白血病细胞第三群（160fl以上）：大细胞群，主要是中性粒细胞白细胞三分群计数原理小细胞群中间细胞群大细胞群2021/7/10仪器测定的细胞大小指加入溶血素后的白细胞大小血浓缩图片：可见中性粒细胞，淋巴细胞，单核细胞，嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞溶血剂处理后的白细胞：白细胞膜缩于细胞核上，只能见大，中，小三群细胞核，淋巴细胞最小，单核细胞次之，分叶核粒细胞最大2021/7/10白细胞三分群计数原理白细胞经特殊溶血素处理后，细胞失水，各群细胞体积

7、分布差异增加。分布范围：35-450fl(256个通道)白细胞可以根据体积大小区分为三个群三分群血细胞分析仪的缺陷2021/7/10方法学单一，非特异性检测（1）仅分大小，不辨其他特性，相同大小的颗粒易误计数（2）中间细胞包含了多种细胞，和成熟WBC分类有很大差异干扰大，异常标本的处理能力差（1）MID增多:可能是MONO、EOS、BASO、BLAST增多（2）LYM干扰：PLT、NRBC、FWBC（3）PLT干扰：RBC、PLT本身、FWBC等（4）异常颗粒或信号的干扰三分类结果仅为初步结果，要求我们进行形态学检验白细胞五分类计数原理激光与细胞化学法容量、电导、

8、光散射法电