枯草芽孢杆菌芽孢中的芽孢衣解析

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1、枯草芽孢杆菌芽孢中的芽孢衣·108·文章编号：1000—1336(2005)02-0108-03《生命~2oo5年25卷2期CHEMISTRYOFLIFE2005，25(2)●MiniReviews枯草芽孢杆菌芽孢中的芽孢衣刘燕秦玉昌(中国农业科学学院饲料研究所，北京100081)摘要：芽孢衣是赋予芽孢对有机溶剂和溶菌酶的抗性，以及对外界出芽诱导物的感应能力的保护性结构。该文主要介绍由枯草芽孢杆菌(bacillussubtilis)所形成的芽孢的芽孢衣中已鉴定的主要蛋白质，及其基因表达调控和应用等方面的研究进展。关键词：芽孢衣：形态建成蛋白质

2、(morphogeneticprotein)；表面展示蛋白质中图分类号：Q934芽孢是某些革兰氏阳性细菌用于抵抗不良环境的休眠结构。从开始形成到结束大约需要8～10h。在芽孢形成的初期，首先是经历不对称分裂形成大小不等的两个细胞。大的为母细胞(mothercel1)，小的为前芽孢(forespore)。各自包裹一部分染色体。然后前芽孢内陷进入母细胞，形成大细胞中包裹小细胞的形式。大小细胞经历不同的发育过程，前芽孢最终发育为芽孢，而母细胞则为前芽孢的发育提供营养和结构成分。收稿日期：2004一l1—30作者简介：刘燕(1982一)，女，硕士生，

3、E—mail：liuyanllh@yahooCom．Cn芽孢的高度抗性主要依赖于高度脱水的核心(core)及包裹芽孢的两层结构：皮层(thecortex)和芽孢衣(thesporecoat)。在芽孢衣的组装过程中基因表达的调控无疑是不可缺少的，但存储于蛋白质本身或辅助蛋白质的结构信息对蛋白质的正确定位也起到很重要的作用。已分离出几种指导其他蛋白质正确定位的形态建成蛋白质：并提出了芽孢衣的初步组装模型。芽孢衣蛋白质的自我组装已经成为研究生物大分子自我组装的模型。芽孢还被用作载体，利用其芽孢衣蛋白质来展示其他外源蛋白质。1．芽孢衣的形态和蛋白质组

4、成病毒载体，即新构建的CRAd、作为阳性对照的含巨细胞病毒启动子的腺病毒(AdCMV—E1A)及作为阴性对照的复制缺陷型腺病毒，以比较新构建CRAd的效力：还需设定检测时间及设定病毒不同的感染复数(multiplicityofinfection，MOI)，以综合评价其复制水平和溶瘤能力：此外。还要构建体内实验的动物模型。临床前评价应包括体外和体内实验两部分。体外实验在细胞培养基础上进行．如感染病毒后正常及靶肿瘤细胞成活率分析：而病毒复制能力分析则可采用Western印迹法、空斑测定(plaqueassay)及逆转录酶聚合酶链反应技术fRT—P

5、CR)等。体内实验在构建动物模型后，瘤内注射一定量的病毒．监测异种移植瘤生长情况并跟踪小鼠成活期；还需小鼠尾静脉注射病毒，一定时间后，取小鼠肝、脾等器官进行组织病理分析以评价新构建CRAd载体的毒性m1。近几年来，CRAd已成为有前途的新型癌症基因治疗载体。尤其它在临床前实验阶段所显示出的强有力的溶瘤作用．为实体瘤的治疗带来了新的希望。而且，随着对病毒生物学方面知识不断深入的了解，将引导我们在增强病毒靶向型、基因转移效率、肿瘤特异性复制的调控及在人体内的稳定性方面进行更为深入的研究，从而构建出复制效率更高、特异性更强、应用范围更广的CRAd载

6、体参考文献KirnDeta1．NatMed．2001．7：78l一787DoroninKetaf、JWm．2ooO．74：6l47—6l55KanervaAeta1．／ntJCancer,20o4．1l0：475—480NettelbeckDMeta1．CancerRes，2002，62：4663-4670HallenbeckPLefaf．HumGeneTher,l999．1O：l72l—l733YuDCefaf．CancerRes．20o1．6l：5l7—525]akubczakJLeta／．CancerRes，20O3．63：1490-1

7、499YamamotoMeta1．Gastroenterology．2003．125：l203一l2l8Kancl'vaAetaf．C,eneTher,20o4．1l：552—559HuangQeta1．c抽CancerRes．2004．10：l439—1445IrvingJeta1．CancerGeneTher,20o4．1l：l74一l85SongJS．BiosciBiotechnolBiochem．2004．8：l634—1639●小综述A《生命的化学>2005年25卷2期CHEMISTRYOFLIFE2005，25(2)

8、外膜内膜皮层外膜内膜皮层BCD图l芽孢衣组装模型【11MC，母细胞；FS，前芽孢；JA，CotjA；jc，CotjC；A，CotA；M，CotM；H，CotH；D，