02-最新分子生物学

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1、最新分子生物学实验技术梁国栋著科学出版社出版索书号：58.178/2分类号：022692内容介绍：本书着重介绍国际上近年发展起来的分子生物学及生物技术方面的新技术、新方法，突出一个“新”字。书中大部分章节是目前国际上的研究热点。如：DNA与蛋白质相互关系、抗体工程、噬体表面显示技术、蛋白质与蛋白质相互关系等。本书对一些有过介绍的，如基因文库构建及筛选，聚合酶链反应(PCR)、DNA测序、基因表达等一些基本实验方法也做了叙述。使本书成为一本较为全面的介绍分子生物学最新实验方法的参考书。因此本书即是一本实用性极强的介绍新技术、新方法的实验手册。也是一

2、本统揽当今分子生物学新理论、新进展的参考书。本书可供分子生物学、生物化学、生物技术、医药卫生以及农、林、牧等方面有关的科研、教学与技术人员参考之用。本书目录：序前言第1章DNA与蛋白质相互关系1.1细胞核蛋白质的提取1.1.1细胞核蛋白质的提取1.1.2细胞核提取物的快速制备法1.2凝胶滞后实验1.2.1凝胶滞后实验1.2.2超级凝胶电泳1.3干扰实验1.3.1甲基化干扰实验1.3.2尿嘧啶干扰实验1.4脱氧核糖核酸酶Ⅰ足迹分析1.5随机PCR1.5.1寡核苷酸的设计与合成1.5.2寡核苷酸的纯化1.5.3探针标记1.5.4凝胶滞后实验纯化探针1

3、.5.5特异结合序列的克隆与序列分析1.6核酸-蛋白质杂交实验1.6.1电泳及电转移1.6.2标记探针1.6.3蛋白质变性、复性1.6.4杂交及放射自显影参考文献第2章cDNA文库构建及目的基因的筛选2.1cDNA第一条链的合成locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewb

4、ayonets,duetomissedfatal,whennightcame2.1.1cDNA第一条链合成的策略2.1.2cDNA第一条链合成的操作步骤2.2cDNA第二条链的合成2.2.1置换合成法2.2.2PCR法2.3cDNA克隆的其他策略2.3.1加尾载体作引物引导cDNA合成——定向克隆2.3.2Okayama-Berg克隆法——定向克隆2.3.3末端加尾直接克隆——非定向克隆2.3.4加接头直接克隆——非定向克隆（双链cDNA末端无酶切位点）2.3.5加接头克隆——定向克隆（双链cDNA一端带酶切位点）2.3.6加连接于克隆——非定向

5、克隆（双链cDNA末端无酶切位点）2.3.7加连接子克隆——定向克隆（双链cDNA一个末端带有酶切位点）2.3.8PCR产物的直接克隆——非定向克隆2.3.9PCR产物的黏瑞克隆法——定向克隆（两个PCR引物均带酶切位点）2.3.10无连接酶克隆法2.4重组子的筛选与鉴定2.4.1根据遗传表型筛选2.4.2分析重组子结构特征的筛选法2.5构建cDNA文库新方法2.5.1减数cDNA文库2.5.2标准化cDNA文库2.6mRNA差示显示技术2.6.1基本原理和方法2.6.2优化反应条件2.6.3差异显示技术在生物医学中的应用2.6.4差异显示技术存

6、在的问题及改良措施2.6.5差异显示技术与相关方法的比较2.6.6差异显示技术的展望2.7人类基因组计划及后基因组计划2.7.1物理图谱的制作2.7.2测序及寻找新的功能因子2.7.3人类后基因组计划参考文献第3章抗体工程3.1基因工程抗体的免疫学基础3.1.1免疫应答3.1.2抗体的分子结构和功能3.1.3抗体基因的DNA重排3.1.4抗体库的产生3.1.5抗原抗体的结合3.2噬菌体表面表达技术与噬菌体抗体3.2.1表达Fab段抗体的pComb3载体系统3.2.2表达scFv单链抗体pHEN1和pCANTAB5E的载体系统locatedinth

7、eTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame3.2.3抗体基因在大肠杆菌中的转录和翻译3.2.4Fab抗体或scFv抗体在细胞膜间隙的组装3.2.5用于噬菌体抗体表达系统的大肠杆菌菌株3.3基因工程重组抗体——Fab抗

8、体3.3.1淋巴细胞的分离纯化3.3.2总细胞RNA的提取3.3.3cDNA的合成3.3.4PCR扩增Fab抗体基因3.3.5PCR产物