耐力、抗阻运动对衰老小鼠骨骼肌细胞外基质胶原蛋白的影响

耐力、抗阻运动对衰老小鼠骨骼肌细胞外基质胶原蛋白的影响

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时间:2018-08-30

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1、2018届研究生硕士学位论文学校代码:10269学号:51151000026耐力、抗阻运动对衰老小鼠骨骼肌细胞外基质胶原蛋白的影响院系:体育与健康学院专业:运动人体科学研究方向:运动与适应指导教师:卢健教授论文作者:杨洲2018年5月14日Dissertationformaster’sdegree2018UniversityCode:10269StudentCode:51151000026Theeffectsofenduranceandresistanceexerciseontheextracellularmatr

2、ixcollagenofskeletalmuscleinagingmiceDepartment:CollegeofPhysicalEducationandHealthMajor:KinesiologyResearchField:AdaptiontoexerciseSupervisor:ProfessorLuJianAuthor:YangZhouCompletedinJune,2018杨洲硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名职称单位备注陈彩珍教授华东师范大学答辩主席漆正堂高级工程师华东师范大学答辩委员李海鹏副教授浙江工

3、业大学答辩委员刘微娜副教授华东师范大学邱林利华东师范大学华东师范大学硕士学位论文论文摘要我国正快速进入人口老年化阶段,甚至有人预测在2025年出现人口负增长。老年人患肌肉衰减综合症(Sarcopenia)的概率不低,骨骼肌中卫星细胞(Skeletalmusclestemcells)的增生是防治肌肉衰减综合症的关键。骨骼肌卫星细胞处于细胞外基质(Extracellularmatrix,ECM)中,于基底膜的下方,该微环境中含较多的胶原蛋白I(CollagenI),基底膜主要成分是胶原蛋白IV(CollagenIV),

4、卫星细(骨骼肌)需穿过基底膜才能完成受损骨骼肌的修复。衰老恶化骨骼肌卫星细胞所处的微环境,主要体现在胶原沉积、增厚以及刚度升高,不利于骨骼肌的修复。基质金属蛋白酶(Matrixmetalloproteinases,MMPs)能降解胶原蛋白,运动能影响MMPs和基质金属蛋白酶抑制剂(Tissueinhibitorofmetalloproteinases,TIMPs)的表达,从而影响胶原蛋白,改变骨骼肌卫星细胞细胞所处的微环境。目的:通过对小鼠9周的耐力与抗阻运动的干预,检测小鼠腓肠肌中TIMP-1、TIMP-2、MM

5、P-2、MMP-9、CollagenI、CollagenIV的表达水平,探讨耐力与抗阻运动对小鼠腓肠肌中TIMP-1、TIMP-2、MMP-2、MMP-9、CollagenI、CollagenIV表达水平的影响。阐述其中变化机制,为促进骨骼肌再生以及Sarcopenia的防治提供相关参考。方法:BalB/C雄性小鼠18只,10月龄,体重31.2-31.5g,。随机平均分为三组,第一组为安静对照组(C),第二组为抗阻运动组(R)、第三组为有氧运动组(A)。A组小鼠以0.8km/h的速度在跑台进行40min耐力跑运动,

6、每周运动3天,周一、周三、周五运动,运动9周;R组小鼠以金字塔式负重进行爬梯运动,每周运动3天,周一、周三、周五运动,运动当天共5组,第一组三次,第二组二次,第三组一次,第四组二次,第五组三次,组间休息120s,次间休息60s,运动9周。金字塔式负重负荷分别是,第一周第一组0%体重、第二组20%体重、第三组40%体重、第四组20%体重、第五组0%体重;第二周第一组20%体重、第二组30%体重、第三组60%体重、第四组30%体重、第五组20%体重;第三华东师范大学硕士学位论文周第一组30%体重、第二组40%体重、第三

7、组80%体重、第四组40%体重、第五组30%体重;第四周第一组40%体重、第二组50%体重、第三组100%体重、第四组50%体重、第五组40%体重;第五周第一组50%体重、第二组60%体重、第三组120%体重、第四组60%体重、第五组50%体重;第六周第一组60%体重、第二组70%体重、第三组140%体重、第四组70%体重、第五组600%体重;第七周、八周、九周的抗阻运动方案与第六周相同。C组小鼠不施加任何干预。每次运动前所有小鼠进行称重,每周所有小鼠进行四肢抓握力测试,每只小鼠测三次,取均值。九周运动干预后,所有

8、小鼠脱颈处死。天狼猩红染色检测腓肠肌CollagenI容积分数;免疫荧光检测CollagenIV面积;WesternBlotting检测腓肠肌CollagenI、CollagenIV、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白水平;RT-PCR检测腓肠肌TIMP-1、TIMP-2mRNA水平。结果:(1)三组小鼠在体重、腓肠肌湿重和腓肠肌肌肉质量

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