KONT真菌显色MIC药敏与ROSCO药敏纸片的对比研究.doc

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1、KONT真菌显色MIC药敏与ROSCO药敏纸片的对比研究【关键词】念珠菌；微生物敏感性试验；耐药性　　［摘要］目的：研究KONT真菌显色MIC药敏与丹麦ROSCO药敏纸片扩散法检测酵母菌对抗菌药物敏感性结果的差异，方法：同时应用两种方法检测79株临床分离酵母对抗真菌药物的敏感性，并进行分析结果。结果：两种方法所策酵母菌对抗真菌药物的总符合率为98.2％，经配对χ2检测，差异无显著性（P>0.05）。结论：KONT真菌显色MIC药敏试剂盒与丹麦ROSCO药敏纸片扩散法具有较好的重复性，而KONT真菌显色药敏具

2、有操作简便，结果易判断，快速提供准确结果，具有在临床上应用盒进一步推广的前景。　　［关键词］念珠菌；微生物敏感性试验；耐药性　　随着高效广谱抗生素的滥用，以及使用免疫拟制剂。肾上腺皮质激素。抗肿瘤药物、器官移植、导管插入或获得性免疫缺陷综合症等因素，真菌感染日益严重，抗真菌药物的广泛应用导致出现真菌的耐药现象［1］。因此，开展真菌的体外药敏试验，指导临床合理用药已受到越来越多的关注［2］，为了寻求一种既准确可靠、方便易行，又与临床疗效相符合的检测方法，我们应用KONT真菌显色药敏试剂盒与丹麦ROSCO药敏纸片扩散

3、法，分别对临床分离的79株酵母菌做药敏测试，探讨其结果的准确和一致性。　　1　资料与方法　　1.1　一般资料　　1.1.1　试验菌　我院2005年1月至2005年6月确诊为酵母菌感染病例的标本共79份，其中呼吸道标本中分离率最高，与相关报道相似［3］，用法国生物梅里埃ATB细菌鉴定系统ID32C板条和BIOKONT16C酵母菌鉴定板条（温州康泰生物科技有限公司提供）鉴定。经2次以上培养为同一种酵母菌后确定为病原菌，其中包括白色念珠菌57株、热带念珠菌13株、光滑念珠菌3株、季也蒙念珠菌3株、克柔念珠菌2株、近平滑

4、念珠菌1株。　　1.1.2　标准质控菌　为了保证测定的标准化和可信度，采用参考菌株白色念珠菌（ATCC64548）作对照。由温州康泰生物科技有限公司提供。　　1.1.3　KONT真菌显色MIC药敏试剂盒　由温州康泰生物科技有限公司提供的FUNGUS7试剂盒。　　1.1.4　ROSCO药敏片和培养基　购于广州乐通泰生物科技有限公司。3　　1.2　方法　　1.2.1　FUNGUS7真菌显色MIC药敏试剂盒药敏测定　用无菌水制备酵母菌悬液并调成2Mcfarland浊度，取100μl加入培养液中混匀，取药敏板一块，每孔加

5、100μl，30℃～35℃孵育20h～24h，每孔加显色液1滴，5min后根据显色判断结果（红色为耐药；淡绿色为敏感）。　　1.2.2　ROSCO药敏纸片药敏测试　用无菌盐水制备酵母悬液并调成0.5McFarland浊度，再用生理盐水1∶1稀释（克柔念珠菌1∶10稀释）。用棉签将所制菌液挤干后均匀涂步至RPMI1640平板上，待表面干后分别贴上药敏纸片。并用标准菌株做质控。30℃～35℃孵育20h～24h后读取结果，如果生长不足再延长至48h。　　1.3　统计学方法　采用配对χ2检验进行数据处理。　　2　结果　　

6、2.1　各质控菌株测定均在质控范围内，2种酵母菌药敏试验结果　见表1～表7。　　表1　5氟胞嘧啶（5FC）对照结果（略）　　注：结果符合率=（78/79）×100％=98.7%χ2检验：P>0.05对照无差异。　　表2　两性霉素B(AMB)对照结果（略）　　注：结果符合率=（79/79）×100％=100%χ2检验：P>0.05对照无差异检验　　表3　制霉菌素（NYS）对照结果（略）　　注：结果符合率=（78/79）×100％=98.7%χ2检验：P>0.05对照无差异　　表4　咪康唑（MIC）

7、对照结果（略）　　注：结果符合率=（75/79）×100％=94.9%χ2检验：P>0.05对照无差异　　表5　益康唑（ECO）对照结果（略）　　注：结果符合率=（77/79）×100％=97.5%χ2检验：P>0.05对照无差异　　表6　伊曲康唑（ITC）对照结果（略）　　注：结果符合率=（76/79）×100％=96.2%χ2检验：P>0.05对照无差异　　表7　氟康唑（FLU）对照结果（略）3　　注：结果符合率=（77/79）×100％=97.5%χ2检验：P>0.05　　比较结果见

8、表8。　　表8　不同菌种对2种方法检测的耐药率比较（略）　　实验结果提示，KONT真菌显色MIC药敏试剂盒与丹麦ROSCO药敏纸片扩散法结果符合率基本一致。两种方法的总符合率为：（540/553）×100％=98.2％，经配对χ2检验，差异无显著性（P＞0.05）。丹麦ROSCO药敏纸片扩散法接种液浓度的控制尤为重要，过浓会导致唑类药物拟菌圈判断困难，过浓或过淡都会导致拟