抗核抗体ana检测与临床应用ppt课件

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1、自身免疫抗体检测及临床意义抗核抗体（ANA）检测与临床应用ANA的靶抗原分布：细胞核整个细胞，包括细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期蛋白等。ENA：抗可提取核抗原，包括RNP/Sm,Sm,SS-A,SS-B,Scl-70和Jo-1等六种靶抗原抗核抗体的定义传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。对ANA的理解不再局限于核成分，而是指核酸和核蛋白抗体的总称ANA可见于多种疾病，特别是结缔组织疾病，常作为结缔组织病的诊断、病情判断和疗效观察的指标高滴度ANA则高度提示自身免疫性疾病在非结缔组织病中也可出现阳性；正常人中（特

2、别是老年人）也可出现阳性，但滴度低目前，ANA检测已成为临床上的一个极重要的自身免疫病的筛查实验。ANA检测的临床意义ANA检测的临床意义系统性红斑狼疮活动期非活动期药物诱导的红斑狼疮混合性结缔组织病（MCTD、Sharp综合征）类风湿性关节炎进行性系统性硬化症多发性肌炎及皮肌炎干燥综合征慢性活动性肝炎溃疡性结肠炎其它风湿病正常人95－10080－10010010020－4020－5085－9530－5070－8030－40265-10美国风湿学会(ACR)立场声明•HEp-2细胞包含大约100至150种自身抗原•其它初筛方法仅具有少量自身抗原…大约35%SLE患者和IFT-AN

3、A阳性患者在其它初筛实验中为阴性结果…建议：•IIFT-ANA仍然为ANA检测的金标准•医院或商业诊断所应用其它ANA检测方法时，必须要求为临床大夫提供足够的数据证明其它ANA检测方法与IFT比较具有同样或更高的敏感度和特异性•实验室在ANA报告当中必须注明ANA检测方法EUROIMMUNANA筛查:间接免疫荧光法(IFT)抗原谱完整(细胞核、细胞浆)检测ANA的金标准，具有很高的敏感性和特异性基质组合:HEp-2细胞+灵长类肝HEp-2细胞:筛查不同的自身抗体均质型核膜型核点型核糖体P蛋白着丝点型AMA核仁型高尔基体Scl-70溶酶体Sm/RNP肌动蛋白SS-A/SS-B

4、波形蛋白系统性红斑狼疮(SLE)ANCA相关性血管炎慢性炎症性结缔组织病(CICTD)干燥综合征(SS)SystemischerLupusErythematodes(SLE)dsDNA系统性硬化症(SSc)Scl-70andCenpBSS-AandSS-B慢性炎症性结缔组织病(CICTD)多肌炎/皮肌炎(PM/DM)MyositisProfile夏普综合征(MCTD)RNPRheumatoideArthritis(RA)EUROIMMUN系统性红斑狼疮(SLE)红斑狼疮的特点临床医生:容易误诊的一类致死性疾病免疫学家:所有免疫系统的要件均参与致病机理产生过程临床发病特点发病率

5、:40/100,000(北欧);200/100,000(黑人);250,000(美国)患者寿命:4年/50%(1950);15/80%(当前);20岁诊断/35岁死亡几率1:6以上受累;96%)EUROIMMUNSLE–各器官的表现关节炎(至少2个关节血液系统受累(贫血等;60%)狼疮肾炎(51%)浆膜炎(胸膜炎,心包炎;77%)神经系统受累(30%)皮肤(蝴蝶状皮疹,盘状狼疮;74%)系统性红斑狼疮(SLE)代表性的抗体抗dsDNA抗体抗核小体抗体抗Sm抗体抗核糖体P蛋白抗体30-90%50-95%5-10%5-15%EUROIMMUNEUROIMMUN核均质型HEp-2细胞/

6、猴肝HEp-2细胞猴肝抗dsDNA抗体-检测方法:IIFT,Farr-法(RIA),ELISAorBlotIIFTdsDNAHEp-2细胞绿蝇短膜虫高度特异性抗体;70%患者阳性，0.5%正常人或RA患者阳性滴度与疾病活动性相关，但不适用于所有患者抗体滴度上升但临床症状不明显的患者，抗体检测后5年内80%患者进入活动期抗dsDNA抗体与SLE最新版“Autoantibodies”描述不同实验方法的结果并无可比性：1、抗原来源不同；2、抗原展现形式不同；3、实验体系反应条件不同。核均质:抗核小体抗体(ANuA)靶抗原:dsDNA-组蛋白-复合物的构象决定簇方法:IIFAEL

7、ISA,Blot临床意义:SLE,阳性率50-95%(特异性100%)EUROIMMUN抗核小体ELISA:敏感性、特异性、疾病活动度ANuA与疾病的活动性相关性强(SLEDAIscore)分组SLE干燥综合症皮肌炎/多肌炎系统性硬化症类风湿/骨关节炎强直性脊柱炎健康对照组特异性n233414033602031225抗核小体阳性144(61.8%)1(2.4%)1(2.5%)1(3.0%)1(1.7%)0098.2%Suetal.,ClinImmunol122:115-120,