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1、丹皮中丹皮酚的测定方法研究许先融（学号：0806503164）中山市五桂山镇广东药学院08中药分析与鉴定1班[528458]摘要：牡丹皮为毛茛科芍药属牡丹的干燥根皮，是具有抗菌消炎作用的常用中草药，其含有多种有效成分。而丹皮酚是起镇痛消炎、抗菌等作用的主要活性成分。随着中药现代化的进展，对中药有效成分的分离提取、含量测定已成为新的热点课题。本文主要对丹皮中丹皮酚的测定方法进行详细综述。关键词：丹皮丹皮酚测定分析牡丹皮为毛茛科植物牡丹PaeoniaSuffruticosaAndr.的干燥根皮。本品为历版《中国药典》收载品种,具有清热凉血、活血化
2、瘀功能。丹皮中主要有效成分为丹皮酚,经药理研究证明具有抗炎、镇痛、解痉等药理作用。我国牡丹皮产地很多,但其有效成分丹皮酚的含量有很大差别。产地对丹皮酚含量的影响 《神农本草经》载曰：“土地所出,真伪陈新,并各有法。”说明了产地的重要性。我国牡丹分布广，资源丰富，其活性成分丹皮酚的含量差异很大。为了探讨和建立不同产地丹皮药材的质量控制方法和指标，范明等［1］18个省区不同产地的丹皮中丹皮酚含量测定结果显示，其中以云南产（5.94%）牡丹皮含量为最高,宁夏产（3.83%）次之，而河南、福建产（1.58%）最低，可见产地对药材质量影响较大。胡世林等
3、［2］对7个产地的丹皮酚含量进行研究，发现安徽铜陵的“凤丹皮”含量最高，各产地平均含量为1.08%～2.51%。杨洁［3］测定的丹皮酚平均含量在上述范围内，含量最高的为四川产丹皮，其次为安徽产丹皮，福建产丹皮含量最低。通过研究认为，丹皮质量好坏不应该忽略产地对其有效成分的影响。所以提供有效的测定方法非常关键。本文采用各种牡丹皮中丹皮酚的含量测定方法,为鉴定不同地区的牡丹皮提供依据。1丹皮酚提取分离方法1．1蒸馏－煎煮法蒸馏-煎煮法蒸馏－煎煮法蒸馏-煎煮法是指先蒸馏提取挥发性成分，药渣再加水提取的方法，适用于含挥发性成分药材的提取。丹皮酚随蒸气
4、馏出后，在冷藏状态下大量析出，滤过干燥即可用于成型，保存方便且转移率较高［4］，但其提取率远低于醇提法［5］；提取过程中选择适宜的pH范围使丹皮酚溶解，并确保溶液贮存过程中的稳定已成为丹皮酚提取液体制备过程中的关键，在蒸馏过程中可以加盐、先加碱后加酸等提高提取率，研究认为加盐蒸馏法是丹皮酚提取的最优方法；为了提高其在水中溶解度，通常采用有机溶剂、助溶剂、表面活性剂等途径来解决问题，有文献报道将其制成β-环糊精包合物来提高其稳定性和生物利用度，能降低其挥发性，增加其溶解度［6］。1．2醇提法醇提法以无水乙醇为溶剂，40℃温度下回流提取，即可将丹
5、皮酚提取出来。醇提法提取工艺简单，有效成分提取多，似应为牡丹皮提取的最佳方法，但问题在于醇提液的后处理困难，因丹皮酚熔点低、挥发性强，实际生产中难于仅除去乙醇而不损失较多的丹皮酚，且提取过程中受热温度越高、时间越长,丹皮酚的含量和收率就越低［7］。1.3CO2超临界流体萃取法 应用超临界萃取法是当前中草药有效成分提取的一个发展方向，具有提取温度低、时间短等优点。在15MPa，52℃的提取条件下，2.5h后其丹皮酚提取液为淡红棕色液体，冷藏后自动分层，上层为淡黄色液体，下层为淡红棕色固体［8］。CO2超临界流体萃取法提取的丹皮酚量少，远低于文献
6、报道值，该方法能萃取出大量脂溶性成分。因CO2是非极性物质而酚苷类成分极性较大，故未能将该类萃取出来，这也是导致总提取物收率较低的一个原因［9］。为提高丹皮酚及酚苷类成分的收率，并保持本方法的提取特点，可考虑进一步优化提取条件并加入夹带剂，这方面的工作还有待深入研究。2，丹皮酚含量测定方法 2．1紫外可见分光光度法(Ultravioet2VisibleSpec2trophotometry,UV)紫外可见分光光度法具有操作简单、费用较低等优点。但由于该法基本上没有分离能力,样品处理要求严格,故常被用于一般要求不很严格的测定以及中药材炮制方法、处
7、理条件的比较、制剂工艺选择等方面。丹皮酚具有一定的挥发性,光谱法中样品处理一般都用水蒸气蒸馏或直接蒸馏法提取,以减少混入杂质,通常蒸馏液稀释后于274nm处测定吸收度。周玉生等[10]用该法测定了牡丹皮中丹皮酚含量,比较了不同加工方法的丹皮酚的含量:取已加工的牡丹皮样品适量,置蒸馏瓶中,加水约120mL,蒸馏后得馏出液约有95mL,稀释后在274nm测定吸收度。结果发现,水洗50℃烘干损失率最高,为34.96%;白酒喷淋晾干,损失率最低,为11.19%。2.2高效液相色谱法杨洁等［11］采用HPLC法，结果显示丹皮酚在0.01～0.55μg/
8、ml范围内线性关系良好(r=0.9996)，平均回收率99.87%，RSD为1.46%。该法简便、快速，重现性好，精度高，适用于牡丹皮中丹皮酚的定量分析。实验中试用
