高活性苎麻脱胶菌制霉菌素抗性菌株的选育-生物技术通报

高活性苎麻脱胶菌制霉菌素抗性菌株的选育-生物技术通报

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1、高活性苎麻脱胶菌制霉菌素抗性菌株的诱变选育(生物技术通报2009.12)曾莹1,向新柱2(1.湖北工业大学生物工程学院武汉430068;2.武汉科技学院武汉430073)摘要:利用制霉菌素抗性来筛选高渗透性突变株,提高黑曲霉菌对苎麻纤维的脱胶能力,使微生物脱胶能用于工业生产实践之中。分别用紫外线、硫酸二乙酯、亚硝酸作为诱变剂对黑曲霉3.0.2菌株进行诱变处理。以制霉菌素抗性为遗传标记,从突变菌株中定向筛选得到一株高活性苎麻脱胶菌黑曲霉3.0.2-26。在以未经刮制的苎麻韧皮为主要碳源,0.7%(NH4)2SO4为氮源,添加0.05%KCl;0.05%MgSO4;0.1%K2HPO4;

2、0.1%酵母膏;Tween800.1%的培养液中,接入黑曲霉3.0.2-26,置30℃下,150r/min处理30hr左右,脱胶苎麻纤维的残胶率平均为14.43%。关键词:诱变育种,定向筛选,制霉菌素抗性,苎麻脱胶菌,黑曲霉.中图分类号:TS192.55文献标识码:AMutationBreedingofNystatinresistantmicroorganismwithhighRamieDegummingactivity.ZengYing1,Xiangxinzhu2,(1.CollegeofBioengineering,HubeiUniversityofTechnology,Wuha

3、n,430068)(2.WuhanInstituteofScienceandTechnology,Wuhan,430073)Abstract:InordertoimprovetheramiedegummingcapabilityofAspergillusnigerstrain,Nystatinresistancewasemployedforscreeninghighpermeablemutationstrainsothatmicroorganismdegummingcanbeappliedintoindustrialproduction.TheAspergillusniger3.0.

4、2strainwasmutatedbyUVlight,DES,andnitritetreatment.ThestrainAspergillusniger3.0.2-26,whichhashighramiedegummingactivitywasselectedoutfromallthemutantsusingNystatinresistanceasthegeneticmarker.Aspergillusniger3.0.2-26wasinoculatedintothemediumcontainingunwiperedraminebastasthemaincarbonsource,0.

5、7%(NH4)2SO4asnitrogensource,inadditionwith0.05%KCl;0.05%MgSO4;0.1%K2HPO4;0.1%yeastextract;Tween800.1%.Thisincubationlasted30hrat30℃and150r/min,theaverageresidualgumcontentoframiefiberwas14.43%.KeyWords:mutationbreeding;directivebreeding;nystatinresistance;degummingstrainoframie;Aspergillusniger

6、.苎麻脱胶是影响苎麻纤维纺织加工的关键,传统的化学法脱胶不仅对苎麻纤维有一定的损伤,会严重污染环境,而且破坏了苎麻纤维本身具有的多种对人体有益的保健功能,残留的化学物质影响人体健康。[1]生物法脱胶则是利用微生物或微生物产生的酶将胶质分解。其作用条件温和,对纤维损伤小,还能提高苎麻纤维的光泽度,而且生物法脱胶耗水少,污染轻,有利于环境保护[2-3]。多年来,国内外在微生物脱胶方面进行了一系列的研究,但因所筛选到的脱胶菌株脱胶关键酶活力不高或分泌的酶系不全,苎麻经微生物脱胶处理后仍然不能达到纺织工业生产上对苎麻纤维的要求,而未能完全替代化学脱胶广泛应用于工业生产中[4-6]。为了提高菌

7、株脱胶的能力,一个重要方法是进行诱变育种。而选用合适的诱变剂及特殊的筛选方法(即“筛子”)是提高诱变效果的关键所在。本研究试图对筛选得到的一株苎麻脱胶菌分别用紫外5作者简介:曾莹(1953-),女,教授。研究方向为产酶菌株的选育。E-mail:zengyin1227@126.com线、硫酸二乙酯、亚硝酸作为诱变剂进行诱变处理,以Nystatinr为标记,定向筛选得到高活性苎麻脱胶菌。1.材料与方法1.1材料原麻未经刮制的有壳苎麻由湖北省咸宁市天化麻业公司提

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