SNT0764-2011新城疫检疫技术规范.pdf

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1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜０７６４—２０１１代替ＳＮ／Ｔ０７６４—１９９９，ＳＮ／Ｔ１１０９—２００２，ＳＮ／Ｔ１１１０—２００２，ＳＮ／Ｔ１６８６—２００５新城疫检疫技术规范犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲狆狉狅狋狅犮狅犾犳狅狉狀犲狑犮犪狊狋犾犲犱犻狊犲犪狊犲２０１１０５２０发布２０１１１２０１实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局犛犖／犜０７６４—２０１１前言本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准代替ＳＮ／Ｔ０７６４—１９９９《出口家禽新城疫病毒检验方法》、Ｓ

2、Ｎ／Ｔ１６８６—２００５《新城疫病毒中强毒株检测方法荧光ＲＴＰＣＲ法》、ＳＮ／Ｔ１１０９—２００２《新城疫微量红细胞凝集抑制试验操作规程》和ＳＮ／Ｔ１１１０—２００２《新城疫病毒分离及鉴定方法》。本标准与ＳＮ／Ｔ０７６４—１９９９、ＳＮ／Ｔ１１０９—２００２、ＳＮ／Ｔ１１１０—２００２和ＳＮ／Ｔ１６８６—２００５相比，主要技术变化如下：———增加了临床诊断；———增加了反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）；———删除了毒力测定的鸡胚平均致死时间（ＭＤＴ）和静脉致病指数（ＩＶＰＩ）。本标准修改采用ＯＩＥ

3、《陆生动物诊断试验和疫苗手册》（２００９版）（ＭａｎｕａｌｏｆＤｉａｇｎｏｓｔｉｃＴｅｓｔｓａｎｄＶａｃｃｉｎｅｓｆｏｒＴｅｒｒｅｓｔｒｉａｌＡｎｉｍａｌｓ）中第２．３．１４章。本标准与ＯＩＥ第２．３．１４章相比，主要技术差异如下：———本标准完全采用了ＯＩＥ规定的病原分离与鉴定、血凝和血凝抑制试验方法；———本标准增加了ＯＩＥ中提及但没有详细操作规程的反转录聚合酶链反应、荧光反转录聚合酶链反应的具体试验步骤；———本标准删除了ＯＩＥ中提及但没有详细操作步骤的酶联免疫吸附试验。请注意本文件的某些内容

4、可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国珠海出入境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中华人民共和国北京出入境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国内蒙古出入境检验检疫局。本标准主要起草人：徐海聂、胡永强、罗宝正、谷强、张常印、薄清如、廖秀云、王云华、沙才华、管恩平、邱阳、朱广勤、王海艳。本标准所代替标准的

5、历次版本发布情况为：———ＳＮ／Ｔ０７６４—１９９９；———ＳＮ／Ｔ１１０９—２００２；———ＳＮ／Ｔ１１１０—２００２；———ＳＮ／Ｔ１６８６—２００５。Ⅰ犛犖／犜０７６４—２０１１新城疫检疫技术规范１范围本标准规定了禽类新城疫的临床诊断、病毒分离与鉴定、血凝和血凝抑制试验、反转录聚合酶链反应、荧光反转录聚合酶链反应的操作规程。本标准适用于进出口禽类及其产品中新城疫的检疫。２规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件

6、，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ６６８２分析实验室用水规格和试验方法３临床诊断３．１发病症状新城疫简介参见附录Ａ。当禽出现以下部分或全部情形时，可作为初步诊断的依据之一：ａ）发病急，死亡率高；ｂ）体温升高，极度精神沉郁，呼吸困难，食欲下降；ｃ）粪便稀薄，呈黄绿色或黄白色；ｄ）出现扭颈、翅膀麻痹等神经症状；ｅ）免疫禽群出现产蛋下降。３．２病理变化当禽出现以下肉眼可见的病变时，可作为初步诊断定性的依据之一：ａ）全身粘膜和浆膜出血，以呼吸道和消化道最为严重；ｂ）腺胃粘膜水肿，乳头和乳头间

7、有出血点；ｃ）盲肠扁桃体肿大、出血、坏死；ｄ）十二指肠和直肠粘膜出血，有的可见纤维素性坏死病变；ｅ）脑膜充血和出血，鼻道、喉、气管粘膜充血、偶有出血，肺可见淤血和水肿。当禽出现上述病变时，应进行实验室确诊。４实验室诊断４．１病毒分离与鉴定４．１．１设备、材料和试剂４．１．１．１器材：生物安全柜、离心机、Ｖ型微量血凝板、微量可调移液器、恒温箱等。１犛犖／犜０７６４—２０１１４．１．１．２抗生素：青霉素、链霉素、卡那霉素和制霉菌素等。４．１．１．３９日龄～１１日龄ＳＰＦ鸡胚、１日龄ＳＰＦ雏鸡。４．１．１．４

8、ｐＨ７．０～７．４，０．０１ｍｏｌ／Ｌ等渗磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）：配制方法见附录Ｂ。４．１．１．５０．２ｍｏｌ／Ｌ磷酸氢二钠：配制方法见附录Ｂ。４．１．１．６阿氏液：红细胞保存液，配制方法见附录Ｂ。４．１．１．７１％鸡红细胞（ＲＢＣｓ）：配制方法见附录Ｂ。５４．１．１．８拭子：脱脂棉球直径约０．４ｃｍ，１．０３４×１０Ｐａ高压蒸汽灭菌１５ｍｉｎ。４．１．１．９新城疫病毒标准阳性血清和标准阴性血清：由指定单位提供。４．１．２样品采集和制备４．