现代仪器分析论文

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1、淮海工学院课程设计报告书题目：现代仪器分析方法的应用研究东港学院系（院）：郁洲书院专业：化学工程与工艺班级：D化工091姓名：殷驰骏学号：5109304312010年12月1日紫外-可见分光光度法在血清铜的测定中的应用1．基本知识紫外—可见光吸收光谱的本质   可见和紫外吸收光谱是在电磁波辐射的作用下，多原子分子的价电子发生跃迁而产生的分子吸收光谱，它又称为电子光谱。紫外—可见光的波长范围在100～800nm，根据能量的大小可分为三个区域：·100～200nm：远紫外(又名真空紫外)区域，·200～400nm；近紫外区域，·400～

2、800nm：可见区域．   可见和紫外分光光度法，波长单位采用纳米表示，纳米现写作nm(nanometer，长度为l0-9m)；或μm(长度为10-7cm)来表示，两者长度相等。波长愈短，能量愈高。2．分光光度计的一般结构   紫外—可见分光光度计是在比色计的基础上发展起来的。目前就其光路设计来分,可分为单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长双光束分光光度计三种。紫外和可见分光光度计基本结构由光源、单色器、样品室、检测器及显示单元等几部分组成。(1)光源   紫外和可见分光光度计常用两种光源：可见部分常用钨灯或碘钨灯，使用波长范

3、围320nm～3.5μm，碘钨灯能量较大，寿命较长。紫外部分常用氢灯或氘灯，使用波长范围在160～300nm左右。   近年来有的利用激光作为光源，由于方向性好，亮度高，单色性好，相干性好．大大提高了仪器的时间分辨率、波长分辨率和灵敏度。(2)单色器   单色器是仪器的主体，其作用是将光源来的光色散成各种波长的光，以供选用。常用的有棱镜或光栅。玻璃棱镜仅适用于可见光区，天然水晶棱镜适用于紫外光区。棱镜产生色散的原理，是由于不同介质中折射率的变化，若石英棱镜的折射率为n，入射角为i，进入空气中折射率为n0，θ角度为(图Ⅴ-7)，则有等

4、式：==n即折射率的不同能将混合光色散成各种不同波长的光线。出光狭缝的单色器波长，是棱镜转动变化的结果。   棱镜色散范围较广，波长可覆盖185～2500nm，而且185—300nm的分辨率优于光栅，但谱线排列均匀度较差，得不到均—的分辨率。在可见和近红外区的色散和分辨率的误差更大于光栅。   光栅由—系列能够反射光线的平行小沟构成，根据衍射干涉原理，能够色散成范围较广的不同波长光线符合等式：mλ=d(sini+sinθ)式中：i——入射角θ——衍射角λ——波长d——小沟间距离m——衍射级数(0，±1，±2……)   光栅分辨率好，

5、且能保证波长的高度精确性，特别是在可见区和近红外区要优于棱镜，但次级谱线重叠，杂散光影响较大，需配用一系列分级滤光片。光栅单色器的组成基本上与棱镜相同，也是由反射镜、光狭缝与光栅组成。(3)样品室   为避免杂散光，样品室需密闭，内涂黑色，比色杯的光程、形状、容量各不相同，可根据样品情况加以选择。可见光用玻璃比色杯，紫外光用石英比色杯。(4)检测器   检测器的作用是把光学信号转变为电信号，在分光光度计中常用硅光敏电池、光电管和光电倍增管。硅光敏电池常用于可见和近红外光的检测，光电管只起光电转换作用，没有放大的功能。在分光光度计中常

6、用的是光电倍增管，它是由光电管和高增益的放大器组成，以负高压-200～-1000V调节阴极，并作用于倍增电极(Dynode)，由光电阴极逸出的电子通过倍增电极的放大作用而抵达阳极。可检测的波长在200～900nm之间，尤其对200～600nm波长范围的检测灵敏度量高。3.3，5一diBr—PADAP自动化分析法测定血清铜铜是人体所必需的微量元素，为多种氧化酶的辅基，对维持人体正常生理功能起重要作用，体内铜过多或过少都会导致生理机能的紊乱⋯1。目前，临床上多采用络合剂显色的手工比色法[·引，而应用自动生化分析仪测定血清铜的分析方法则不

7、多见。本文参考有关文献【4】，通过加速血清铜解离和使蛋白稳定措施的研究，报道了以2一(3，5一二溴一2一吡啶偶氮)一5一二乙氨基酚(3，5一diBr—PADAP)为显色剂，双试剂两点终点法自动化测定血清铜的新方法。该法与5一Br一脚自动分析法相比，灵敏度高、试剂空白小，准确、快速，更值得临床推广应用。1材料与方法I．1仪器与试剂uv一2201紫外分光光度计(日本岛津)、贝克曼CX一2O全自动生化分析仪、pH一3C酸度计(上海雷磁分析仪器厂)。铜标准液；15．70t~mol／L。试剂一：含双氧水、吐温一80、铜解离剂、pH4．0乙酸一

8、乙酸钠缓冲液。试剂二：含3，5一diBr—PADAP、曲拉通X一100、氟化钠。1．2方法贝克曼CX一20测定参数：标准液浓度15，70，样品样30I，测定方法两点终点法，副(主)波长700am／570hill，测定点(16)(31)