黄瓜绿斑驳花叶病毒的分子检测及云南分离物的序列分析

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1、第31卷第3期扬州大学学报(农业与生命科学版)Vo1．31NO．32O10年9月JournalofYangzhouUniversity(AgriculturalandLifeScienceEdition)Sep．2010黄瓜绿斑驳花叶病毒的分子检测及云南分离物的序列分析吴鑫。，丁元明，何月秋，李吴，李克海，王绍君，周剑(1．云南省出入境检验检疫局，云南昆明650228；2．云南农业大学植物保护学院，云南昆明650224)摘要：选取黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)全基因组中MPCP3UTR的保守序列(位于全基因组中第5692～6335位点之间)，设计1对特异性PCR检测引物，对云南

2、省疑似带有CGMMV的病叶进行血清学检测和RT—PCR检测，并将目的片段的基因序列与GenBank中登录的CGMMV其他分离物相对应的序列进行比对和分析。结果表明：已报道的CGMMV主要分为4大类群，云南分离物属于第1类群；云南分离物与辽宁分离物亲缘关系最近，可能源于同一株系。关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒；检疫性有害生物；RT—PCR检测；血清学检测；序列分析中图分类号：S436．421文献标志码：A文章编号：1671—4652(2O10)03—0075—06Moleculardetectionofcucumbergreenmottlemosaicvirusandsequencea

3、nalysesofYunnanisolatesWUXin“，DINGYuan-ming，HEYue-qiu，LIMin，LIKe-hai，WANGShao-jan，ZHOUJian(1．YunnanEntr-ExitlnspandQuarBur，Kunming650228，China；2．CollofPlantProt，YunnanAgricUniv，Kunming650224，China)ABSTRACT：Cucumbergreenmottlemosaicvirus(CGMMV)wasonememberofgenusTobamovirusanditwasquaran—tinep

4、estissuedbyChinesegovernment．ThisstudydesignedonepairofspecificPCRprimerbasedonMP—CP3UTRconservedsequencesinCGMMVcompletegenomeanddetectedleafsampleswithserologyandRTPCRtechnology．ComparisonoftheaimedgenesequenceofYunnanisolateswithotherisolatesloginedinGenBankwasconductedandanalyzed．Theseque

5、nceanalyseresultshowedthat：thereportedCGMMVwasdividedintofourpopulationsmainly；YunnanisolatesbelongedtOIpopulation；geneticrelationshipofYunnanisolateswasclosetOLiaoning，theymayorigina—tedfrOrllonestrain．KEYWORDS：cucumbergreenmottlemosaicvirus；quarantinepest；serologicaldetect；RTPCRdetect；genes

6、equenceanalyse；thegeneticrelationship黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumbergreenmottlemosaicvirus，CGMMV)是烟草花叶病毒属(Tobam—ovirus)成员之一，首次在黄瓜上发现，由Ainsworth记述。该病毒主要通过种子传播，也可通过花粉或接触传播，但常见瓜类病毒的传播介体蚜虫不能传播；可侵染黄瓜、西瓜、甜瓜、南瓜、瓠子等多种葫芦科作物。该病毒分布广泛，世界上许多国家均有报道。Kawai等使用改良ELISA检测了黄瓜带毒种子。Kim等_2使用高密度乳胶微粒凝集试验(HDIPAT)、ELISA、RTPCR及生物学方法，

7、检测了葫芦种子中病毒。Choi_3在韩国西瓜、黄瓜、甜瓜上分离到CGMMV。Yoon等叫利用RT—PCR技术明确了来自黄瓜的Kyurigreenmottlemosaicvirus分离物是CGMMV中的1个株系。Varveri等使用双抗收稿日期：2009—07—22基金项目：农业部重大植物疫情检测和风险预警关键技术研究项目(2008IK264)；云南省自然科学基金资助项目(2008CD198)作者简介：吴鑫(1985)，女，江苏扬州人，云南农业大学硕士研究生，主要从事植物有害生物检