茯苓皮与茯苓块中多糖含量测定

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1、万方数据第22卷第4期2009年12月黔南民族医专学报JournalofQiannanMedicalCollegeforNationalitiesVoL22No．4DeC．2009茯苓皮与茯苓块中多糖含量测定李俊艳1，魏学军2，(1．黔南民族医学高等专科学校附属医院药剂科。贵州校。贵州都匀558003)石朝珊2都匀558000；2．黔南民族医学高等专科学【摘要】目的：比较两种商品茯苓中多糖含量，指导临床用药。方法：以茯苓多糖得率作为指标，采用硫酸一苯酚法测定。结果：茯苓块中多糖含量(12．35％)高于茯苓皮(10

2、．64％)。结论：临床用药时，首选茯苓块。【关键词】茯苓皮；茯苓决；多糖；含量测定【中图分类号】R84．1【文献标识码】A【文章编号】1008—4983(2009)04—0243—02中药茯苓是多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核，具有利水渗湿，健脾宁心的功能。现代研究证明茯苓多糖具有增强免疫、抗肿瘤作用⋯，临床上用复方茯苓多糖注射液治疗肿瘤。茯苓较常用的商品药材有茯苓块和茯苓皮，本文对两种药材进行多糖含量测定和比较，为临床用药提供依据。l材料与方法1．1材料紫外分光光度计，电子天平，电热恒温水浴锅，离心机；葡萄糖标准品，

3、苯酚，硫酸，无水乙醇，丙酮，乙醚，(以上试剂均为分析纯)样品均购自贵州省黔南州医药公司，经黔南医专魏学军老师鉴定为茯苓的干燥菌核。1．2方法采用苯酚一硫酸法口1测定总多糖含量。2结果2．1粗多糖的提取与精制称取药材各20g，加水煎煮提取两次，合并提取液，提取液以纱布过滤，放冷。离心5rain(2000r／min)，分取上清液，滤液加醇使含醇量达80％，静置过夜。过滤，残渣先后用无水乙醇、丙酮、乙醚多次洗涤，于60。C减压干燥即得。2．2多糖的含量测定2．2．1对照品溶液的制备精密称取105。C干燥恒重的标准葡萄糖

4、100mg，精密称定，置100“量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度即得。2．2．2苯酚液的配制取苯酚100g，加铝片0．1g与硫酸氢钠0．05g，蒸馏收集180～182℃馏分，称取此馏分5g，加水100ml，置棕色瓶中即得。2．2．3标准曲线的制备精密吸取对照品溶液0．1，0．2，0．3，0．4、0．5，0．610．7、0．8、0．9ml，分别置25rnl刻度试管中，加入5％苯酚溶液1．ooIIll，摇匀，迅速滴加浓硫酸5．00ml，加水至总体积lOIIll，摇匀，静置5min，置沸水浴中加热15min，再置冷水浴中10

5、min，补充失去的水分至刻度。以2IIll蒸馏水同法操作作为空白对照，在490nln处测定曲线，回归方程为：A=0．0695C+0．001l，r=0．9994(it／．=8)。试验结果表明，多糖含量以葡萄糖计，在0．0016～0．0096mg范围内与吸收度呈良好线性。2．2．4供试品溶液的制备精密称取多糖10．Omg置100ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀作贮备液。2．2．5换算因素的测定精密吸取贮备液2IIll，按“2．2．3”项下方法测定吸收度，从回归方程中求出供试液中含量，按下式计算因素：f=W÷(

6、C×D)，式中W为多糖的重量(mg)，C为多糖液中葡萄糖的浓度，D为多糖的稀释因素，测得：f=1．34。2．2．6加样回收率测定精密称取样品粉末20．0mg，加入一定量的干燥下标准葡萄糖，按供试品溶液制备和含量测定方法操作，测得回收率为99．12％，变异系数为1．08％。2．2．7含量测定精密吸取贮备液2lIll，按“2．2．3”项下方法测定吸收度，从回归方程中求出供试液中葡萄糖含量，按(下转第247页)作者简介：(1977一)，女，贵州独山县人，药师，主要从事临床药品调配工作。·243·万方数据第22卷第4期2

7、009年12月黔南民族医专学报JournalofQiannanMedicalCollegeforNationalitiesVoL22No．4Dec．2009样本有较好的附着力，既可省略粘片剂，又可简化实验步骤和节省经费支出。3．3湿盒选择一个平整的试管架将玻片放在架上，再将其放入水浴锅盖上盖子进行保温，因水浴锅内有足够的湿度，玻片上的试液不会干燥，确保了实验的顺利完成，简单实用。3．4荧光抗体的影响及重复使用荧光抗体因生产厂家不同价格差异较大．本实验采用两种价格不同的荧光抗体作对比，发现实验结果无明显差别，证明可

8、根据实验精度要求和经费情况选择合适价位的试剂。本实验还证实荧光抗体至少可以重复使用一次，并不影响实验结果。间接免疫荧光法方法大多实验条件要求较高，导致一些实验室难以开展。本实验结果表明，在实际工作中可以根据现有条件及实验要求对实验做一些改进、简化，既省力又省钱，同样可以达到预期效果。致谢：本实验得到贵阳医学院免疫教研室左丽教授、陈阿英、杨艳、崔冬冰、龙世祺、赵青，黔南民族