高效液相色谱法同时测定烟叶中茄尼醇和辅酶q10的含量

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1、第2=卷第#期应用化学-JF?2=aJ?#2$$/年#月!!!+’(aD)DB>_Wa@*>b@cc*(DV+’D()[WZ!!!EH2$$/高效液相色谱法同时测定烟叶中茄尼醇和辅酶!的含量"#!李春英!赵春建!祖元刚（东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室!哈尔滨"#$$%$）摘!要!建立了一种同时测定烟叶中茄尼醇和辅酶&"$的反相高效液相色谱法。以匀浆萃取法作为样品的制备方法。色谱条件为：’(&)(*+",-色谱柱（%./0012#$00，#!0），柱温2#3；流动相为!（乙腈）4!（异丙醇）5,46，流速".#0*7089；使用二级管阵列检测器

2、，茄尼醇检测波长为2"#90，辅酶&"$检测波长为26#90；进样量2$!*。在该色谱条件下，茄尼醇和辅酶&"$的回收率分别为（"$$.$#:".2#）;和（<<.<6:".=/）;。方法简单、快速、高效，适合于烟叶中茄尼醇和辅酶&"$的测定。关键词!反相高效液相色谱，二级管阵列检测器，烟叶，茄尼醇，辅酶&"$中图分类号：>/#6?6!!!!!文献标识码：@!!!!!文章编号："$$$A$#",（2$$/）$#A$#2%A$%烟草（"#$%&#’(’&’)’$*+*?）属茄科（)JFE9EPQEQ）植物，其叶中的茄尼醇（)JFE9QRJF）和辅酶&"$［"，

3、2］［=S#］（+JQ9GH0Q&"$，+J&"$）具有显著生理活性。辅酶&"$对冠心病和动脉粥样硬化有明显疗效。而［/］［6］［,，<］茄尼醇除本身具有显著的抗溃疡和降血压作用外，同时也是合成辅酶&"$的必须原料，因此建立快速测定茄尼醇和辅酶&"$的方法有实际意义。茄尼醇或辅酶&"$含量的测定方法已有文献报［"$S"=］道，但应用高效液相色谱法同时对这2种成分进行含量测定尚未见报道。本文用二极管阵列检测器A反相高效液相色谱法同时测定了烟叶中茄尼醇和辅酶&"$的含量，考察了分析样品的提取方法，茄尼醇和辅酶&"$在同一色谱条件下均能较好分离和测定。"$实验部分

4、TEUQKR高效液相色谱仪系统，包括在线’Q气脱气系统，TEUQKRVQFUE/$$四元泵，TEUQKR2<

5、可见光谱仪（日本岛津）。乙腈、异丙醇为色谱纯试剂；甲醇、乙醇和丙酮均为分析纯试剂；茄尼醇对照品，含量"<$;（)8I0E公司）；辅酶&"$对照品，含量"<,;（)8I0E公司）；Y=2/品种烟草新鲜叶（含水率,$;），采自东北林业‘%‘%大学植物园。将茄尼醇和辅酶&"$配成=.<1"$I70*和/."1"$I70*的流动相溶解的对照品储备液。供实验使用的样品溶液由2.$I鲜烟叶和一定量提取溶剂置于匀浆萃取装置中，匀浆提取2次，每次"#089，合并提取液，在$.%#!0微孔滤膜过滤制得。%$结果与讨论%?"$样品提取溶剂选择因茄尼醇和辅酶&"$均是热不稳定物质

6、，鲜烟叶烘干会引起它们的降解，从鲜烟叶中直接提取极性较弱的茄尼醇和辅酶&"$，理应用极性弱的溶剂提取。由于鲜烟叶水分大，为了使提取溶剂能更好地进入细胞内部，选择了能与水互溶的、极性稍强些的甲醇、<#;乙醇和丙酮作为提取溶剂。精称2.$I鲜烟2$$#A$,A"<收稿，2$$#A"2A$,修回科技部科研条件升级改造项目（BCA2$$%A$<）资助通讯联系万方数据人：祖元刚，男，"<#%年生，教授，博士生导师；DA0E8F：GHIJKFLM8N?OF?P9；研究方向：植物化学和植物药物D第&期李春英等：高效液相色谱法同时测定烟叶中茄尼醇和辅酶+("的含量&!&叶若

7、干份，分别加!"#$甲醇、%&’乙醇和丙酮匀浆提取!次，每次(&#)*，合并提取液，测得茄尼醇和辅酶+("的提取率，结果见表(。表!"提取溶剂对茄尼醇和辅酶#!$提取率的影响%&’()!"*++),-.+)/-0&,-1.23.(4)2-.2-5)61)(7.+3.(&2)3.(&278.#!$,-./0*120134*-.%&’5134*-.6701-*08)0.9-:,-.4*0;-.<’"=&!"=&("=>%?@("8)0.9-:A-+("((="B("=C"C=&&DD从表(可以看出，甲醇、乙醇对茄尼醇和辅酶+("的提取率无显著差异，均高于丙酮，选

8、用%&’乙醇为提取溶剂。9=9"检测波长的选择将茄尼