云南省玉米灰斑病菌孢子相关生物学特性研究

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1、第３７卷第６期西南师范大学学报（自然科学版）２０１２年６月Ｖｏｌ．３７Ｎｏ．６ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｏｕｔｈｗｅｓｔＣｈｉｎａＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ）Ｊｕｎ．２０１２文章编号：１０００－５４７１（２０１２）０６－００５１－０６云南省玉米灰斑病菌孢子相关生物学特性研究①卢灿华１，罗雁新１，沙本才１，吴毅歆１，毛自朝１，何月秋１，２１．云南农业大学农学与生物技术学院，昆明６５０２０１；２．云南农业大学农业生物多样性国家工程中心，昆明６５０２０１摘要：为探明玉米灰斑病在云南省发病较重的原

2、因，该试验在田间条件下，采用人工喷雾接种玉米灰斑病菌，研究玉米灰斑病潜育期、病斑产孢、孢子飞散以及菌龄、温度、湿度和光照对孢子萌发的影响．结果表明：昆明地区玉米灰斑病在感病品种会单４号上的潜育期为１２～１３ｄ；病斑产孢量随显症天数的增加呈单峰曲线，显症后２４～２７ｄ病斑产孢量达到最大值；玉米灰斑病菌孢子主要在夜间飞散，风或雨有助于孢子的飞散与传播；菌龄对孢子萌发影响较大，随菌龄的增长，孢子萌发率降低；在１０～３０℃时，分生孢子均能萌发，但以２２℃最适，３５℃以上或４℃时均不能萌发；水滴有利于孢子萌发，光照对孢子萌发影响较小．关键词：

3、玉米灰斑病；潜育期；病斑产孢；孢子飞散；萌发中图分类号：Ｓ４３５．１３１文献标志码：Ａ玉米灰斑病又称玉米尾孢菌叶斑病，是由半知菌亚门玉蜀黍尾孢菌Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａｚｅａｅ－ｍａｙｄｉｓＴｅｈｏｎ［１］ａｎｄＤｏｎｉｅｌｓ侵染引起的叶部病害，近年来在北半球造成大量的经济损失．该病最早于１９２５年在美国伊［１］［２］利诺斯州南部的亚历山大县发现，在我国最早于１９９１年在辽宁省丹东地区危害．起初发现玉米灰斑病［３］时，由于其发生频率较低，症状在玉米生长后期出现，产量损失少，并未引起人们的重视．近２０年来，［４］［５］［６］由于全球气候变

4、化，玉米种质资源抗性差，病原菌菌株分化，土地免耕和品种单一化种植以及化学［７］杀菌剂成本高、防效不稳定等原因，玉米灰斑病危害程度不断加重．目前灰斑病在我国的黑龙江、辽宁、［４］吉林、河北、山东、湖北、重庆、四川和云南等省市均有发生，该病在华北、华中和华东地区发病较轻，而在西南山区发生较为严重．该病自２００２年于云南省龙陵县首次发生以来，至２０１０年在全省均有发生，特别是在山区，甚至无一地块幸免，引起的损失因年份、地理环境和品种而异，产量损失一般在５％～３０％之间，严重时产量损失可达６０％以上，甚至绝收．［８－９］湿度是影响玉米灰斑病

5、发生和流行的重要环境因子，相对湿度在９０％以上，且持续时间较长有利［９］于病害的发生和扩展．不同地区气候条件、品种布局和栽培方式各异，玉米灰斑病的发病严重程度不一．为探明玉米灰斑病在云南省发病较重的原因，笔者在田间条件下，人工接种玉米灰斑病孢子，观测病斑产孢和孢子飞散，并在实验室内观测孢子萌发的特性，以期为该病的防治提供依据．１材料与方法１．１品种栽培管理和接种玉米品种：种植玉米高感品种会单４号，用于测定病菌的产孢能力．试验地按南北向设置，采用宽窄①收稿日期：２０１１－０３－２９基金项目：云南省科技支撑计划资助项目（２００６ＮＧ１９

6、）；云南省农业产业技术体系资助项目．作者简介：卢灿华（１９８５－），男，云南洱源人，硕士研究生，主要从事分子植物病理学研究．通信作者：何月秋，教授．５２西南师范大学学报（自然科学版）ｈｔｔｐ：／／ｘｂｂｊｂ．ｓｗｕ．ｃｎ第３７卷行种植，宽行８０ｃｍ，窄行４０ｃｍ，株距２５ｃｍ．玉米苗移栽后管理同常规．［１０］病菌菌株：将－８０℃冰箱保存的菌种于玉米叶粉碳酸钙琼脂培养基（ＭＬＰＣＡ）上活化后，转接于放有玻璃珠的液体马铃薯汁蔗糖（ＰＳ）培养基中，于２５℃，１２５ｒ／ｍｉｎ摇床上培养１５ｄ，将菌液均匀涂布于玉米叶粉培养基上培养８ｄ，用含０

7、．０１％Ｔｗｅｅｎ－２０的灭菌水洗下孢子，制成体积分数为１×１０５６个／ｍＬ～１０的悬浮液，于玉米大喇叭口期，傍晚采用喷雾法接种．１．２试验方法１．２．１病斑产孢量的测定接种后，待出现明显病斑时，从田间病株上取大小为３ｃｍ×３ｃｍ的病样，一部分置于２５℃的恒温培养箱中黑暗保湿２４ｈ，另一部分直接将病样放入２５℃的恒温培养箱中黑暗培养，不保湿．两种方法均用５ｍＬ无菌水洗下孢子，用血球计数法在显微镜下读取病斑孢子数．每隔３ｄ取样１次，每次６个重复，各重复读取５个数值．１．２．２孢子飞散的观测玉米灰斑病菌孢子飞散的观测采用玻片法，每次于早

8、上１０：００开始观测，将医用凡士林均匀涂布于载玻片上，放于接种田的垄间固定位置，观测１天内孢子的飞散，每隔２ｈ换１次载玻片，并及时在显微镜下观察记录孢子数．采用ＨＯＢＯＨ８温湿记录仪记录田间温度和相对湿度．２００８年的观测日期是９月２