发酵菌体中辅酶q10的提取及其测定方法

《发酵菌体中辅酶q10的提取及其测定方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第22卷第2期无锡轻工大学学报2003年3月JournalofWuxiUniversityofLightIndustryV.1.22Mar.N20o0.23文章编号:1009一038X(2003)02一0059一04发酵菌体中辅酶Q1。的提取及其测定方法王根华，钱和’，肖刚(江南大学食品学院，江苏无锡214036)摘要:利用紫外分光光度法研究并确定了从发酵菌休中提取辅晦Q10的工艺条件，即900C回流30min和石油醚萃取等，结果表明，未用皂化法提取、紫外分光光度法测定发酵菌体中输酶q。含童，不但具有较好的重现性和琏定性，而且其平均[7收率9)达(101.3613.4)

2、%,RSD为3.1%(n=3).关银词:辅酶Q10;提取;测定中图分类号:Q5-3文献标识码:ATheMethodofExtractingandDetectingofCoQlofromCultureWANGGen-hua,QianHe,XiaoGang(SchoolofFoodScienceandTechnology,SouthernYangtzeUniversity,Wuxi214036,China)Abstract:UVspectrophometerwasusedtodetectCoQ10inthispaper,andwegotthemostsuitableextr

3、actingprocedureasfollowing:Wetculturewasdistilledat90℃for30min,andextractedwithpetroleumethertwice.Theresultshowedthatthismethodhadgoodrepeatibilityandstability,andtheaveragerecoveryofCoQtawas(101.36士3.4)%,withRSD(n=3)of3.1%.Keywords:coenzymeQt0(CoQ1a).extraction;measurement辅酶Q1o(Coenzym

4、eQt0，简写为COQ10)，又称就是辅酶Q1。产生菌的生产能力及如何从发酵菌体泛酿，是一种类维生素类物质，脂溶性苯的衍生物.中提取辅酶410.为此，作者利用紫外分光光度法研它在自然界中分布广泛，主要存在于酵母、植物叶究了提取发酵菌体中辅酶Q1。的方法—皂化提取子和种子及动物的心脏、肝脏和肾脏中[[1,21.辅酶法，旨在为微生物发酵法生产辅酶Q1。的工作奠定410是细胞呼吸链上的一种递氢体，是细胞自身产基础.生的天然抗氧化剂、细胞代谢激活剂.各种生物均1材料与方法含有一种特有的辅酶Q,除鼠外，脊椎动物均含有辅酶Qto，人类亦如此1.1仪器与试荆国外一般利用合成法或微生物

5、发酵法生产辅751型紫外分光光度计:上海仪器分析厂制造.酶410，我国目前还停留在从动物组织中提取该产HP1100高效液相仪:美国安捷公司制造;辅酶Q10品阶段.在辅酶Q1。的各种生产方法中，最具发展前标准样品:日本协和发酵公司(由中国科学院提景的生产方法是微生物发酵法.该方法的关键技术供);甲醉、石油醚等试剂、无水乙醇均为分析纯.收稿日期2002一08-02;修回e期:2002-12-10.作考简介:王根华(197，一)，男.江苏盐城人.食品科学与工程硕士研究生;，为责任作者万方数据无锡轻工大学学报第22卷1.2培养墓1.7稳定性实验种子培养基:葡萄糖20g/l;蛋白

6、陈10g/L;酵称取发酵菌体5.0g，按照1.4所述方法提取，母膏2创L;NaCl5g/L;pH7.0.发酵培养基:玉米并按1.5.2所述方法测定吸光度(A值)，每隔1h浆20岁L;蛋白脏10g/L;酵母膏2g/L;NaCl5测定一次，连续3h考察其稳定性，g/L;MgSO4.7H200.1g/L;pH7.0.1.8加样回收率测定1.3发酵菌体的制备精确称取3份同批次发酵菌体5.Og、各加入辅将辅酶Q10产生菌活化后，接入300mL发酵培酶Q,。标样约。.5mg，按照1.4所述方法提取，并按养基中，在30℃振荡(200r/min)培养20h，收集发1.5.2所述方法测定

7、提取液中辅酶Qi。含量，扣除发酵液,4000r/min离心30min,倾去上清液，得到菌酵菌体中辅酶Q。的总质-R(0.66mg)，计算Q体，用蒸馏水充分洗涤，离心，称量发酵菌体质量，收率.备用.1.9高效液相色谱验证实验结果的可命性1.4皂化法提取辅酶Q,0用高效液相色谱(HPI.C)测定发酵液中辅酶将菌体移入150mL圆底烧瓶内，加入。.7g焦Q1。的含量，色谱条件:ZY110色谱柱，250mmx4.6性没食子酸，2.5gKOH,19mL甲醉，7mL蒸馏mm不锈钢色谱柱，填料为十八烷基硅烷键合硅胶，水[[3]混匀在90℃水浴锅中回流3