gcbi测序系列5-生物样本的收集方法及建库流程

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1、生物样本的收集保存方法及测序建库的基本流程刘艳奎GCBI生物技术中心上海其明信息技术有限公司生物样本的收集保存方法Page2生物样本类型细胞组织血液Page3其他细胞收集保存方法Page4提取RNA:贴壁细胞：细胞培养好后，去除培养液，用PBS快速的洗一遍,将PBS弃干净,直接加入TRIZOL，并吹打裂解细胞，待细胞裂解完全后,即可收集样本，-80储存。（不必胰酶消化）悬浮细胞：细胞培养好后,3000RPM离心5MIN,去除培养液,用PBS快速的洗一遍,将PBS弃干净,直接加入TRIZOL，并吹打裂解细胞，待细胞裂解完全后,-80储存。TRIZOL用量：

2、106的细胞需要1MLTRIZOL。提取DNA：收集细胞后，离心去除培养液，PBS快速洗2次，弃掉PBS，保存于-80°C冰箱。组织样本的收集方法Page5提取RNA:样本离体后,用生理盐水迅速洗一遍,装管后迅速投入液氮速冻30分钟,转移至-80度保存。RNALATER作用：如样本无法立即液氮，分离组织（薄膜状的组织等）注：植物样本处理方法均可参照组织样本。组织样本的用量：以脂肪组织为例，一般黄豆大小的样本即可提出5-10UG的TOTALRNA。提取DNA:样本离体后,用生理盐水迅速洗一遍,装管后迅速投入液氮速冻30分钟,转移至-80度保存。注意事项：1

3、、要用冻存管保存组织样本（不可用EP管），并且管盖不宜拧的过紧，以防止从液氮取出时管子炸裂，样本损失。2、用油性记号笔直接在样本管上标记样本名称，如果用标签纸或胶带粘贴，在长期的低温状态下很容易脱落，照成样本信息丢失。血液样本的收集保存方法Page6提取DNA:血液抗凝收集后，-80度保存提取RNA:1、采用PAXgenebloodRNAtube收集,注意收集血液后混合均匀需室温至少放置2小时，详细操作参照PAXgene说明书。2、全血加TRIZOLLS裂解液保存，详细操作参照TRIZOLLS说明书。如需血液中的特定细胞：需新鲜血液抗凝分离细胞，按照细胞

4、样本处理保存。注：抗凝剂不可以使用肝素其他样本类型收集保存方法石蜡样本：石蜡块或石蜡切片常温保存血清、血浆、尿液等液体样本提取DNA:样本收集后，-80保存。提取RNA:样本收集后，加入3倍体积的TRIZOL，迅速摇匀后，-80保存。外泌体：提取DNA:样本收集后，-80保存。提取RNA:样本收集后，加入TRIZOL，放置5分钟后，-80保存。Page7测序建库的基本流程Page2生物样本类型DNA建库RNA建库Page3DNA建库Page5RNA建库Page5预告第六讲全基因组测序结果解读_SNP4月28日星期四20：00Page13联系我们微信QQ服

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