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时间:2018-09-16
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1、第!"卷第#期西南林学院学报$%&’!"(%’#!))"年*月+,-.(/0,12,-3456231,.623.78,006962:;’!))"湿地松丛生芽增殖的研究!何月秋,叶建仁"",池树友(南京林业大学森林资源与环境学院,江苏南京!&))#<)摘要:以湿地松无菌苗顶芽为外植体,诱导湿地松丛生芽的形成,诱导率可达&))=’研究激素水平、基本培养基、继代周期、蔗糖浓度对湿地松丛生芽增殖的影响,结果表明:当>?@/为&ABC0,(//为)’)#ABC0时,最高增殖率可达D"’<&=,最高增值倍数为EF&&;在"种基本培养基G8.,5HI,&C!I2
2、,&C!9G,H>中,G8.比较适合丛生芽的增殖和生长;当培养基中蔗糖浓度为E=时,能够形成健壮的丛生芽;每隔!)天继代&次,既能保持外植体的幼嫩状态,也能提高丛生芽的生长速度’关键词:湿地松;组织培养;丛生芽;增殖中图分类号:2<*&F!E>F)"文献标识码:/文章编号:&))#?<&<*(!))"))#?))&E?)E湿地松是一种优良的造林树种,其生长迅速,中冷藏E周后,取出用洗洁精清洗干净,)’&=高锰干形通直,松脂含量高,对松材线虫和松毛虫具有酸钾溶液浸泡&!K,流水冲洗&K,在超净工作台较强的抵抗性,在我国南方广为引种栽植’然而,上剥除种
3、壳,<)=酒精浸泡#)L,无菌水冲洗#次,由于松针褐斑病(!"#$%&’()#($$#)#&*$)的严重危然后用)’&=的氯化汞溶液浸泡#AMN,无菌水冲害,其进一步的发展受到了很大的限制[&]’目前,洗EO"次’移入HG/培养基中培养成无菌苗,备所建立的湿地松抗病种子园已经进入结实阶段’用F组织培养方法能够快速、高效繁殖优良材料以满!"#丛生芽的诱导足生产的需求,缓解抗性种子供不应求的矛盾’切取培养!)O!"P的湿地松无菌苗带子叶顶南京林业大学自&**D年开展湿地松抗松针褐斑["]芽进行丛生芽的诱导,诱导培养基在朱丽华的病无性系的组织培养研究工作
4、以来,以子叶为外基础上稍加改进’植体诱导湿地松的愈伤组织,并建立其悬浮培养!"$丛生芽的增殖体系[!,#]’随着研究工作的进一步开展,目前以湿在诱导培养基上接种的外植体,待丛生芽长地松成熟胚、离体胚无菌苗、无菌实生苗等为外植至!QA左右,切取单芽置于添加有不同浓度的>体,成功地建立其器官发生的组织培养再生体系,[E,"]?@/和(//的G8.培养基上进行增殖实验’并且获得的试管苗移栽成活’尽管湿地松丛生筛选出比较适合的激素水平(>?@/&ABC0,(//芽的诱导率很高(*"=以上),其丛生芽的生根率也在>)=以上,试管苗移栽成活率达到D)=,但丛)
5、’)#ABC0)后,在此基础上同步进行丛生芽增殖生芽的增殖比较困难,增殖系数不高,并且随着增的基本培养基的筛选,继代周期、继代次数的筛殖代数的增加,丛生芽出现生长势衰弱、老化、死选,蔗糖浓度的筛选’亡等现象’因此,为实现湿地松抗病家系的试管!"%培养条件苗工厂化生产,系统研究丛生芽的增殖非常必要’以上培养基在诱导丛生芽时,添加#)BC0蔗糖,而在丛生芽增殖时则添加E)BC0蔗糖;卡拉胶!材料与方法<’)BC0,;4"’D;&!&J高温高压灭菌&"AMN’整!"!外植体的培养个培养过程均在光照培养室中完成,温度!"R精选优良的抗性湿地松种子放置在EJ
6、冰箱!J,每日光照&EK,光照强度!)))ST’!收稿日期:!))"?)>?)*""为通讯作者基金项目:江苏省高等学校研究生创新计划F万方数据作者简介:何月秋(&*<"?),女,四川大邑人,博士生,主要从事抗病育种方面的学习与研究’第-期何月秋等:湿地松丛生芽增殖的研究’.!"#计算方式表’3,,不同浓度对湿地松丛生芽诱导的影响!个月后统计芽的诱导率和增殖倍数")*+,3,,外植体分化数诱导率丛生芽生长势*’)*’)%个%个%#(%/0·1(%/0·1诱导率(#)$分化芽数(个)%接种芽数(个)-".("(!-(-(’((芽点很小,生长缓慢&’((
7、#-".("(--(-(’((芽点较小,生长缓慢增值倍数$有效芽数(个)%接种芽数(个)-".("(4-(-(’((芽点大,生长迅速-".("(.-(-(’((芽点较大,生长迅速$结果与分析$"$湿地松丛生芽的增殖$"!湿地松丛生芽的诱导相关资料显示,多数研究者能够建立湿地松本试验结果表明,尽管单独使用细胞分裂素)组织培养的再生体系,以获得其再生植株"而对*+,就能诱导湿地松丛生芽的分化(以-"./0%1诱导成芽丛后的中间繁殖体如何大量快速繁殖研为宜,诱导率达)2"!(#),但分化后的丛生芽生长究较少"本试验探讨影响湿地松丛生芽增殖的不比较缓慢,且
8、老化严重"由表’可知,当培养基中同激素浓度及激素组合,并已经能够诱导出生长添加适量的3,,时,无菌苗顶芽的丛生芽诱导率正常
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