保肝消瘤胶囊抗肝癌的实验研究

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1、卫生毒理学杂志2004年3月第18卷第1期JHealthToxicolMarch2004Vol.18No中图分类号:R979.1文献标识码:A文章编号:1002一3127(2004)O1-0042-02·实验研究·保肝消瘤胶囊抗肝癌的实验研究李gi，杨素霞z，周淑珍，，刘国廉，(1.北京市预防医学研究中心，北京100013;2.解放军总医院泌尿外科;;3.北京市博莱特医药技术有限公司)关键词:保肝消瘤胶囊;抗肿瘤;裸鼠当前对肝癌的治疗，除早期手术治疗外，包括化1.4.4.2细胞增长倍数:将指数生长期细胞接种于培疗、放疗和生物疗法

2、等，虽有一定疗效，但因其毒副作养瓶中，10万个细胞/瓶，加人不同浓度药物，4d后计用较大，其应用受到一定限制。保肝消瘤胶囊是由白数。花蚊蛇草、天葵子、七叶一枝花、犀角、水红花子、鳖甲、1.4.4.3有丝分裂指数(MI):将指数生长期细胞接种砂仁、人参和蓬我术等20多味中药组成的复方，经精于预先放置盖玻片的静置瓶中，加入不同浓度药物，4练提取加工制成的纯中药制剂，具有软坚散强、活血化d后取出盖玻片，HE染色，计数有丝分裂细胞数。癖、破症消滞和扶正祛邪之功效。本研究通过荷瘤(肝1.4.4.4细胞形态:将生长于盖玻片上的细胞HE染癌)

3、裸鼠及体外人肝癌细胞实验模型，观察保肝消瘤胶色后，光镜下观察。囊对肝癌的抑瘤效果，为阐明其抗肝癌作用及临床应1.4.2荷瘤裸鼠模型抑瘤实验:取指数生长期肝癌细用提供实验资料。胞，制成单个细胞悬液，每只动物背部皮下接种3x1护个/0.2ml细胞，1周左右肉眼可见瘤体小结节，10d左1材料与方法右选择0.5cm以上瘤体直径的裸鼠随机分组。分阴1.1细胞系人肝癌细胞系(SMMC-7721)为上海第性对照组(灭菌蒸馏水)、阳性对照组(5一Fu)和药物二军医大学建株，用常规方法培养。组，每组约10只。药物组3个剂量分别为80,160,32

4、01.2药品保肝消瘤胶囊，250mg/粒。动物实验使用mg/kgBW保肝消瘤胶囊。采用经口灌胃，连续28d,前将药物碾碎，用蒸馏水制备成混悬液，消毒后备用。28d后处死动物，称量动物瘤体重。按下式计算药物体外细胞实验用的保肝消瘤胶囊经双蒸水浸泡、抽滤的抑癌率〔’}:除菌，制成工作液。工作液中保肝消瘤胶囊的相当浓阴性对照组瘤体重一给药组瘤体重抑癌率(%)x100%阴性对照组瘤体重—度为40mg/ml.5-氟尿}`A}(5-Fu)，江苏省南通市第二1.5统计方法采用SPSS11.0统计软件进行方差分制药厂生产。为本研究中阳性对照药，

5、浓度为25析。mg/mlo1.3动物雌性BALB/c裸小鼠，体重1825g，由军2结果与讨论事医学科学院实验动物中心提供。动物饲养于灭菌的2.1保肝消瘤胶囊对体外肝细胞增殖的影响隔离盒内。每盒5只动物，饮食消毒的水及特制饲料。2.1.1细胞毒作用:不同浓度(0,25,50,100,200及1.4方法400[Ag/ml)保肝消瘤胶囊处理的肝癌细胞，其克隆形成1.4.1体外细胞模型抑瘤实验:采用细胞生物学方率随药物浓度增加而降低，二者呈负相关，如图1所法川，进行观察。示。直线回归可得:，二一0.002lx+1.0174,R2=1.4

6、.4.1保肝消瘤胶囊的细胞毒性作用:将指数生长0.8746。经计算可得保肝消瘤胶囊的半数抑制浓度期细胞接种于15ml方瓶中，500个细胞/瓶，5瓶/剂ICS。为250j.g/mlo量，加人不同浓度药物，48h后洗脱，继续培养5d，计2.1.2对肝癌细胞增长倍数和有丝分裂指数的影响:数克隆数。存活分数以药物组克隆数除以对照组克隆经保肝消瘤胶囊和5-Fu处理的细胞增殖能力明显受数表示。抑制:细胞增长速度减缓，平均细胞增长倍数分别为阴作者简介:李煌(1968-)，女，助理研究员，研究方向:细胞毒理学。性对照的69.1%和29.6%，与

7、对照相比差异有非常显著性(P<0.01);有丝分裂指数下降，分别为阴性对照万方数据卫生毒理学杂志2004年3月第18卷第I期JHealthToxicolMarch2004Vol.18No体外观明显缩小，与阴性对照比，差异有非常显著性一O2O0IV，(P<0.01)。保肝消瘤胶囊治疗组抑瘤率在72.5%-︹乙Onn94.6%，保肝消瘤胶囊低、高剂量抑瘤率与5-Fu的抑招巾鹅6CU瘤率相近，可见保肝消瘤胶囊对肝癌组织生长有较强仲翻的抑制作用。4n薪U表2保肝消瘤胶囊对裸鼠移植性人肝癌的抑瘤效果、nU~药物剂量C组别动物数瘤体重量(9

8、)抑瘤率(%)I](mg/kg)050100150200250300350400保肝消启胶囊相当浓度(ug/ml)低剂量110.07t0.04中剂量100.36t0.48图1保肝消瘤胶囊对人肝癌细胞的细胞毒作用高剂量100.13土0.14阴性对照121.31土0