精子形态学分析课件

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1、1本课件精子染色均采用Diff-Quik染色精子形态学分析及生精细胞检查《WHO5》2010版南京军区南京总医院戈一峰戈一峰,男,1973年3月出生,中共党员,副主任医师、副教授,江苏省青年联合会第十、十一届委员会委员,医疗卫生界别秘书。现就职于南京军区南京总医院生殖医学中心,从事生殖遗传学的实验室和临床诊疗工作,在辅助生育和习惯性流产的免疫治疗等方面具有专长,2004年11月-2005年7月参加联合国驻利比里亚特派团维和军事行动,2010年1月参加中国人民解放军赴海地地震救援行动,历年在国内外核心学术期刊上以第一著者发表论文十多篇,参编学术专著12部。EpididymisPros

2、tateSeminalvesiclesVasdeferensBulbo-urethralglandAmpullaurethralskeletalmusclecorpuscavernosumvasculaturePelvicn.ParasympatheticNS(cranio-sacraloutflow)Inferiormesentericg.SympatheticNS(paravertebralganglia)AutonomicNS精液的形成射精不存在于体内精子生成过程精子生成与受精过程背景全球精液检测标准化的需求,WHO制定了人类精液实验室操作手册,用于临床实

3、验室和科研。7第五版2010年第一版1980年第二版1987年第三版1992年第四版1999年8WHO11980WHO31992WHO52010WHO21987WHO41999中文翻译本9WHO5th主要内容10精液分析精子制备质量保证标准方法可选择试验研究性试验精子制备精子冷冻附录正常形态精子通过观察来自受孕女性生殖道,特别是经性交后试验从宫颈粘液或从卵子透明带表面回收的精子有助于定义具备潜在受精能力的精子。使用这些标准,对所有男性而言,其正常形态精子百分率的范围大致为0-30%,很少超过25%。这个低数据自然产生一个低的临界值(仅为3-5%)。经过“透明带选择”的精子,正常形态

4、率仍然低,约8-25%。11WHO不同版本精子形态学内容比较篇幅染色方法观察方法参考值第一版10页改良勃-利二氏染色巴氏染色显微镜40倍物镜下观察80.5±19.4%第二版13页吉姆萨染色改良巴氏染色勃-利二氏染色相差显微镜40倍物镜下观察;也可用100倍油镜,明视野观察50%第三版13页湿片法吉姆萨染色改良巴氏染色勃-利二氏染色Shorr染色×100油镜亮视野观察湿片法30%第四版15页改良巴氏染色Shorr染色Diff-Quik法×100油镜亮视野及至少×10的目镜下观察*15%第五版49页巴氏染色Shorr染色Diff-Quik法×100油镜亮视野及至少×10的目镜下观察4%

5、(下限)1213精子形态学检查受关注头部:椭圆形,长3.7~4.7µm、宽2.5~3.2µm,长宽比1.3~1.8µm,顶体区40%~70%,不超过2个小空泡。空泡大小〈20%,顶体后区冰含任何空泡。中段:细长、规则,长度3.3~5.2µm,大约与头部长度相等,主轴与头部主轴成一直线,宽度0.5~0.7µm,残留胞质〈头的1/3。尾部:比中段细,均一,长约45(均为头部长度的10倍),没有锐利折角,可以自身卷曲呈环状。精子形态学检查受关注正常精子形态14精子头部的分析参数精子包括头、颈、中段、主段和末段。严格的精子形态学判断标准为:只有头和尾都正常的精子才认为是正常的。所有处于临界

6、形态的精子应该认为是异常。精子头外形上应该是光滑、轮廓规则、大体上呈椭圆形。顶体可清晰分辨,占头部的40%~70%。顶体区没有大空泡,并且不超过2个小空泡,空泡大小不超过头部的20%。顶体后区不含任何空泡。15精子中段与主段的分析参数中段应该细长、规则,大约与头部长度相等。中段主轴应与头部长轴成一条直线。残留胞浆只有在过量时才被认为是异常的,即胞浆超过了精子头大小的1/3时被认为过量残留胞浆。主段应该比中段细,均一,其长约45μm(约为头部长度的10倍)。尾部应没有显示鞭毛折断的锐利折角。主段可以自身卷曲成环状。16对精子形态缺陷的认识人类精液标本中含有各种各样畸形的精子。精子异常

7、发生和一些附睾的病理改变常常与畸形精子百分率升高有关联。精子的形态缺陷通常是多重的。畸形精子一般都会导致较低的受精潜能,这取决于畸形的类型,也可能有异常的DNA。形态缺陷常伴有DNA碎片的增加、染色体结构异常、不成熟染色质和非整倍体。虽然也考虑精子尾(中段和主段),但是头部的形状更为重要。17精子头部、颈部和中段缺陷定义头部缺陷:大头、小头、锥形头、梨形头、圆头、不定形头、有空泡的头(超过2个空泡,或者未染色的空泡区域占头部的20%以上)、顶体后区有空泡、顶体区过小或

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