沙棘粉对衰老模型小鼠脑组织MDA和GSH含量的影响及其抗疲劳效果的研究

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1、沙棘粉对衰老模型小鼠脑组织MDA和GSH含量的影响及其抗疲劳效果的研究作者:陈轶玉,乔慧,陆培培,黄成【摘要】采用昆明小鼠为实验对象，通过饲喂不同比例的沙棘粉饲料4周以后，在抗疲劳实验中，以血清乳酸脱氢酶(LDH)活力、血乳酸(BLA)、肌糖原(MG)、肝糖原(LG)等4个生理参数为指标观察沙棘粉的抗疲劳效应，结果表明，饲喂4周沙棘粉剂的小鼠，其LDH、LG含量均显著高于对照组；其抗疲劳时间亦显著增长，且抗疲劳实验30min和60min后的血乳酸水平均低于对照组。在检测小鼠脑组织的MDA和GSH含量时发现4％～6％剂量沙棘粉能降低MDA含量，提高GSH含

2、量，表明沙棘粉能拮抗D-半乳糖的损伤，达到维生素相同效果。【关键词】沙棘粉；衰老小鼠；脑组织氧化还原物质；抗疲劳效果沙棘制品不仅可以作为饵料中的维生素源，还可制成供人类食用的产品。沙棘果享有“维生素仓库”和“神秘果”之称，沙棘果中含有丰富的生物活性物质，具有祛痰、利肺、养胃、健脾等功效，对心血管系统、免疫系统、抗肿瘤、抗衰老、抗炎、抗辐射损伤等方面均有显著的药理效应［1］。可以预见，沙棘制品的市场前景十分可观，而目前我国沙棘资源浪费严重。因此开发利用此资源已迫在眉睫。西部地区政府及种植户迫切希望高等学校、科研院所开展沙棘资源开发利用的研究，本实验采用沙棘

3、果的干粉作为实验材料，通过饲喂昆明鼠4周以后，进行其抗疲劳效果的研究，为沙棘资源开发利用提供基础性实验参数。1材料与方法动物来源及实验场所实验动物选自南京安立默实验动物繁殖调剂中心，在分组前选用了出生日龄及体重都基本相同的昆明小鼠；实验场所为南京大学药业有限公司动物房。实验分组取小白鼠147只，随机分成7个大组，每组均为21只，组1作为饲喂添加复合维生素的对照组，组2作为饲喂无复合维生素饲料的空白对照组，组3～组7作为饲喂添加比例不同的沙棘粉饲料实验组，小鼠均单笼饲养4周。饲喂剂量及配方每日投喂足量饲料和水，各组饲料配方如表1。表1各组配方成分表LDH活

4、力、BLA、MG、LG含量测试抗疲劳实验前，从每组取小鼠3只，眼眶放血制血清送检，测试乳酸脱氢酶活力、肌糖原和肝糖原，LDH活力，参数King氏法测定［2］。抗疲劳实验抗疲劳试验依陈奇方法［3］，将饲喂4周的小组分别取12只按小鼠体重10%负重砝码，于水温25～27℃、40cm深、直径为20cm的标本瓶中游泳，进行抗疲劳试验。待其头部没入水下5秒时迅速捞起，记录游泳时间，待其恢复30min后各取6只眼眶放血，制备血清，待送检测试BLA，各组剩余6只待其恢复60min后再眼眶放血，制血浆送检测试BLA。考虑到在对每一只鼠的每一次取血操作时，对动物造成不同程

5、度伤害性刺激，由此引起的抗疲劳强度无法保持一致，故而设计成每一个实验测定都分批取样，进行一次性采血。小鼠脑组织MDA、GSH含量取饲喂4周的小鼠，每组6只，断颈处死，迅速取出大脑，用冰冷的PBS缓冲液制备10%脑匀浆，离心后取上清液进行MDA和GSH含量测定。测定步骤按试剂盒说明书进行，MDA、GSH测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。2结果饲喂4周后各组小鼠LDH活力、MG、LG与BLA值见表2。饲喂4周后各组小鼠血液指标初始值，各组取6只小鼠眼眶测试MG、LG、BLA和LDH，因这批动物取自抗疲劳动物之前，故称为初始数值，表2为测试结果。表2各组

6、小鼠LDH活力、MG、LG与BLA初始值(x±s)注：表中不同组的相同指标中，*表示差异有显著性；**表示差异有非常显著性由表2统计分析结果可知，g3～g5沙棘粉组的小白鼠，其MG和LG含量均显著大于空白组(PPP抗疲劳及血乳酸指标各组随机取12只鼠，做抗疲劳实验，于其休息30min、60min两个阶段各取6只放血制血清测试BLA含量，各组的实验数据进行均数差显著性检验，统计结果见表3。表3抗疲劳时间、30min与60min的BLA数值及其均数差检验(x±s)注：*表示差异有显著性；**表示差异有非常显著性由表3测试结果可推算：饲喂2%～6%沙棘粉的小白

7、鼠抗疲劳时间比对照组延长～，且差异有非常显著性（PPP血乳酸变异级差及其恢复速度由于各组抗疲劳运动前的血乳酸含量初始值不同，故仅仅使用抗疲劳后30min和60min的血乳酸含量差异性还不足以说明动物在疲劳运动后乳酸清除速度大小，因此依据表3与表2可推算各组血乳酸变异级差和恢复速度，见表4。表4抗疲劳后30min与60min血乳酸BLA浓度变异级差和恢复速度注：BLA浓度变异级差：Bt-B0；恢复速度：(Bt2-Bt1)/(t2-t1)各组小鼠脑组织MDA、GSH含量灌喂沙棘油后各组小鼠脑组织MDA、GSH含量变化见表5。表5灌喂沙棘油各组小鼠脑组织GSH

8、及MDA含量(x±s)注：*表示差异有显著性；**表示差异有非常显著性由表5可以