hbv m 定量与hbv dna检测的相关性研究(1)

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1、HBVM定量与HBVDNA检测的相关性研究(1)　　作者：冯瑶1，张乐之2，吴淑梅2，王智华3，方超平2　　【摘要】目的探讨HBVM与HBVDNA检测的相关性及定量检测HBVM的临床应用价值。方法荧光定量PCR定量检测HBVDNA，时间分辨荧光免疫分析法定量检测HBVM。结果三组患者血清中HBeAg检出率差异有显著性（PP＞）；HBVDNA≥104copy/μl时与HBsAg及HBeAg成正相关（PP＞）；三组患者中HBsAg与HBsAb有相关性（PPP＞）。结论HBsAg和HBeAg抗原可作为监测HBV感染和复制的量化指标。动态监测HBVM的量能够反映机体对病毒感染的免疫反

2、应情况，可作为观察临床病程、疗效的依据。【关键词】乙型肝炎病毒标志物；乙型肝炎病毒DNA；荧光定量PCR；时间分辨荧光免疫测定法【Abstract】ObjectiveToinvestigatetherelationshipbetweenHBVDNAconcentrationandserologicalmarkers’（HBVM）concentration，andtoexplorethesignificanceofqualifingtheHBVserologicalmarkers，concentration.MethodsTRFIAwasusedtodetecttheconce

3、ntrationofHBVM，fluorescence-quantitativePCRwasusedtoqualifytheHBVDNAconcentration.ResultsInthreegrouppatients，thepositiveratesofHBeAgweresignificantdifference.InIgroup，theHBVDNAisnorelatedtoHBVM.WhentheHBVDNA≥104copy/μl，theHBVDNAiscloselyrelatedtoHBsAgandHBeAg，whiletheHBVDNAisnorelatedtoHBe

4、AbandthreegrouppatientsHBsAgisrelatedtotheHBVDNA≤107copy/μlHBeAgisrelatedtotheHBVDNA≥104copy/μlHBeAgisnorelatedtoTRFIAisasensitivemethodforHBVMquantification，whichcanmonitorpatient’sconditionandtherapeuticefficacy，andsuggesttheprognosisofchronichepatitis.HBsAgandHBeAgcanbemonitorHBVinfectio

5、nandreproduce.【Keywords】HBVM；HBVDNA；fluorescence-quantitative；PCR；TRFIA随着全自动荧光定量PCR仪的问世，HBVDNA定量检测在确诊HBV感染中的地位更加巩固，但因其操作环境和技术要求较高，价格比较昂贵等原因使其应用受到了一定限制。本文采用时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）定量检测HBV阳性患者血清HBVM，探讨定量检测HBVM与HBVDNA的相关性，旨在寻找一种确诊HBV感染的简便易行的方法，现报告如下。1对象与方法标本来源选自门诊及住院患者血清HBVDNA阳性（HBVDNA≥5×102copy/μl）

6、标本66例，其中男40例，女26例，年龄15～64岁。收集血清标本置-20℃冷冻保存待检。仪器德国ROCHE公司Lightcycler荧光定量PCR仪；上海新波ANYTESTXX时间分辨荧光分析仪。检测方法试剂HBVDNA采用FQ-PCR定量检测，试剂选用深圳匹基公司生产乙肝病毒（HBV）核酸扩增（PCR）荧光检测试剂盒；HBVM检测采用时间分辨荧光免疫分析法，试剂选用上海新波公司生产的乙肝血清标志物定量检测试剂盒；以上实验均严格按说明书操作。阳性结果判断标准HBVDNA＞5×102copy/μl；HBsAg＞/ml；HBsAb＞10mIU/ml；HBeAg＞/ml；HBeA

7、b＞/ml；HBcAb＞/ml者判为阳性。统计学分析计数资料采用χ2检验，相关性用相关检验分析，成对双样本均值分析用t检验。2结果按HBVDNA拷贝数将待测标本分三组：Ⅰ组20例：HBVDNA拷贝在102～103copy/μl；Ⅱ组26例：HBVDNA拷贝在104～106copy/μl；Ⅲ组20例：HBVDNA拷贝≥107copy/μl。因部分标本HBVM浓度过低无计算值，故采用HBVM荧光数进行统计处理。三组中HBVM阳性检出率见表1。HBVDNA与HBVM各项数值间相关系数r值及P值见表2。3讨论本