口腔与胃内幽门螺杆菌关系的研究

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1、口腔与胃内幽门螺杆菌关系的研究【摘要】目的研究胃病患者口腔中是否存在幽门螺杆菌，并分析胃病患者牙周状况与幽门螺杆菌的关系。方法依据特异的尿素酶C基因和cagA基因设计引物，建立聚合酶链反应方法,检测65例慢性胃病患者不同牙齿的龈上和龈下菌斑中的Hp。6例胃Hp阳性的胃炎患者，经药物治疗后，检测口腔Hp。结果5例慢性胃病患者胃黏膜标本中，PCR检测阳性的标本58例，龈下菌斑Hp阳性率，高于龈上菌斑中的Hp阳性率。牙周袋深度≥mm部位菌斑中Hp检出率显著高于PD【关键词】幽门螺杆菌菌斑胃炎聚合酶链反应Abstract:Objective:T

2、oinvestigatetheprevalenceofHelicobacterpylori(Hp)intheoralcavityofgastritispatients,andanalyzetherelationshipbetweenchronicperiodontaldiseaseandHpinthepatients.Methods:Apolymerasechainreaction(PCR)assaywitholigonucleotideprimershomologoustoaportionoftheureaseCandcytotoxi

3、nassociatedgeneA(cagA)ofHpwasusedtotestthepresenseofHpindentalplaque.Sixty-fivegastricdiseasepatientswererecruitedtodetectHpinsupraandsubgingivalplaque.Results:Sixty-fivechronicgastritispatients,patients(%)hadatleastoneHppositivedentalplaquesample.TheHppositiveratewass

4、ignificantlyhigherinthesupragingivalplaque(%)thanthatinthesubgingivalplaque(%).TheprevalenceofHpwaspositivelycorrelatedwithprobingdepth.Conclusion:OralHpinfectionmaybeanimportantsourceofgastricHpinfection.Keywords:Helicobacterpylori;dentalplaque;gastritis;PCR幽门螺杆菌是一种营养要求

5、高、微需氧的革兰氏阴性菌。自从1983年Warren和Marshall发现Hp以来，大量研究表明Hp是慢性活动性胃炎和十二指肠溃疡的主要致病因素，与胃溃疡密切相关,与胃癌的发生有关［13］。近年来有关Hp的研究很多，但Hp的传播途径尚无定论［4,5］，多数观点认为是口—口传播。口腔是消化道的入口，也是人体的一个重要微生态环境。但口腔作为Hp聚集地的假说仍然处于争论中［6］。本研究重点分析慢性胃病患者口腔中是否存在Hp，胃病患者牙周状况与Hp的关系，了解胃病治疗前后口腔与胃内Hp的变化情况。1材料和方法病例选择从泰山医学院附属泰安医院消

6、化科选择65例有上消化道症状并经全口牙周检查有牙龈炎、不同程度牙周炎的患者进行胃镜检查。男38例，女27例，年龄20—62岁。否认有其它系统性疾病；3个月内未服用过抗生素及胃药；12个月内未接受过牙周治疗，全口牙不少于24颗。对其中的6例患者药物治疗后追踪复查，从治疗前同样的牙齿部位重复取样进行检测。取样和检查从每例患者口腔内选择有牙龈炎症的6颗牙作为取样牙。以棉球隔湿，吹干后分别用消毒刮匙刮取龈上、龈下菌斑，即刻检查并记录牙周临床指数：菌斑指数，牙周袋深度，出血指数。将取样标本置于含100μl样本处理液的Eppendorf管内。随后常

7、规胃镜检查，胃黏膜取3块活检组织，分别作尿素酶试验，组织病理和PCR检测Hp。DNA提取PCR试剂由上海宝生物工程有限公司提供，将标本悬浮于100μl样本处理液中，5℃孵育30min，高速震荡10s后置100℃水浴8分钟，再次高速震荡10s，离心min，取上清用于PCR扩增。PCR检测Hp参考Bickley,Lage等的研究，引物根据尿素酶C基因和CagA基因进行设计，预期扩增片段为29bp及400bp。20μl反应体系内两对引物20pmol/L，每种寡核数mmol/人，DNA模板μl，TagDNA聚合酶u及PCR缓冲液，反应在PCR扩

8、增仪上进行，9℃预变性min，9℃变性1min，5℃退火1min，7℃延伸min为一个循环，共计35循环，循环结束后7℃继续延伸min，以Hp标准株NCTC11637的DNA提取液作阳性对照，采用PCR试剂