专题1基因工程

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1、专题1：基因工程基因组文库cDNA文库基因工程基本工具操作程序分类作用目的基因的获取从基因文库中获取人工合成利用PCR技术扩增原理大致过程基因表达载体的构建目的组成及作用目的基因导入受体细胞植物细胞动物细胞微生物细胞农抗菌转化法其他方法显微注射技术Ca2+处理目的基因的检测与鉴定分子水平的检测个体生物水平的鉴定应用转基因植物转基因动物基因工程药物基因治疗抗虫转基因植物抗病转基因植物抗逆转基因植物改良植物品质提高动物生长速度改善畜产品质量生产药物做器官移植供体基因诊断蛋白质工程概念原理应用来源作用结果限制性

2、核酸内切酶DNA连接酶载体常用载体载体条件其他载体IIIIIII从基因文库获取较小DNA合成仪RNA逆转录酶PCR农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法显微注射技术感受态细胞法(用Ca2＋处理)受精卵、体细胞受精卵原核细胞DNA分子(核酸)分子抗原—抗体目的基因表达出的性状（2007全国卷Ⅱ）4、下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是（）A、一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列B、限制性内切酶的活性受温度的影响C、限制性内切酶能识别和切割RNAD、限制性内切酶可从原核生物中提取“汉水丑生

3、的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，未经允许不得擅自修改或用于任何形式的商业用途。2012年1月15日，汉水丑生标记。C【解析】限制性内切酶存在于许多细菌及酵母菌等生物中，细菌属于原核生物，当然可以从中提取，一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序，并能切割DNA分子，限制性内切酶的活性同样受温度的影响，故选C。（2009浙江）3．下列关于基因工程的叙述，错误的是()A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类

4、常用的工具酶C．人胰岛素基因在大肠杆菌中表达的胰岛素无生物活性D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。D解析：载体上的抗性基因主要起着标记基因的作用，有利于筛选含重组DNA的细胞，并不能促进目的基因的表达。(六)回答下列有关遗传信息传递和表达的问题。(10分)（2012上海）55．如图18所示，若用两种识别切割序列完全不

5、同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的E-F区域(0.2kb)，那么所形成的重组质粒pZHZ2_______。A．既能被E也能被F切开B．能被E但不能被F切开C．既不能被E也不能被F切开D．能被F但不能被E切开A“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。【解析】用限制酶从基因组DNA上切下目的基因，并取代质粒p

6、ZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的E-F区域(0.2kb)，用DNA连接酶连接后形成重组质粒，则在重组质粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位点，形成的重组质粒pZHZ2既能被E也能被F切开，故本题选A。“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。（2011浙江）6.将ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是（）A．

7、每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子【解析】将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，首先碱基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，碱基之间形成氢键，再加入适量DNA连接酶，催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来，形成一个重组DNA分子。目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程

8、的第四步工作。已经表达了就说明导入成功。所以A、B和D正确，C错误。C（2012浙江）6.天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是()A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D.将