血清蛋白质测定

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1、第八章体液蛋白质检验人类白蛋白分子本章内容概要:第二节体液蛋白质测定第一节概述第一节概述机体蛋白质:体液蛋白质的检测:机体主要的生物大分子含量:人体固体成分的45%种类:10万,3000~5000种/单细胞功能:生长,代谢、血凝、运动、免疫、信息传递等疾病发生体液蛋白质异常一、血浆蛋白质的功能和分类蛋白质(protein):是人体内含量和种类最多的物质。有10万多种。血浆蛋白质(plasmaprotein):血浆中含量最多的成分。有1000多种。目前已研究的不下500种,其中已分离出纯品的有200多种。(一)蛋白质概述:研究进展领域:⑴生物化学家:分离纯化各种组分。

2、研究其物理性质、氨基酸的组成及其顺序,以及某些蛋白质中结合的糖、脂类、金属化合物、活性多肽、类固醇激素等,研究其合成、降解、转换更新与代谢调节的研究。⑵生理学家与病理生理学家;注重蛋白质的生理功能,研究其胶体性质、缓冲性质和生理作用,运输、结合功能等。⑶血浆蛋白质具有遗传的变异:如Hp、TFP等在不同的人群中常见有结构上的差异,以及某些蛋白质的缺乏表现出一定的临床症状,具有临床意义;遗传学家利用蛋白质结构上的差异作为研究人群与家族遗传特征的标志。⑷临床生化检验中,微量蛋白质的检测及其技术的进展,用于诊断各种恶性肿瘤或各种病理变化过程等。⑸在进化与个体发育的生物化学研

3、究中,已发现有不少正常胎儿时期的蛋白质可以在恶性肿瘤病人中重新出现,如甲胎蛋白。血浆蛋白质合成的调控,如APR的表达与释放,在临床医学中长期受注意而又未完全解决的课题,它与限制炎症过程密切相关。⑹血浆蛋白质广泛应用于组织和细胞的培养,血浆中含有各总细胞刺激因子和抑制因子,它们对稀薄啊的活力、增殖、分化、胞内酶的合成及细胞特殊功能起者特殊的作用。⑺在人类不少疾病,包括两种常见的疾病——动脉粥样硬化及肿瘤的发病学研究,以及最常见的糖尿病及其并发症的发病机制中,血浆蛋白质均有广泛涉及。(二)血浆蛋白质的分类1.电泳分类法2.功能分类法1、电泳法:(醋纤膜电泳)正常人血清的

4、区带电泳结果和扫描图像从左至右的5个区带依次为白蛋白及α1、α2、β和γ球蛋白区。有时在慢电泳时β球蛋白可分为β1球蛋白和β2球蛋白。白蛋白区的成分包括白蛋白、前白蛋白和部分α1脂蛋白;α1区包括α1抗胰酶蛋白、α1脂蛋白、Gc球蛋白;α2区包括触珠蛋白、铜蓝蛋白、α2巨球蛋白等;β1区包括转铁蛋白、补体C3c、C4等;β2区包括C3b、β2微球蛋白、Fb;γ区包括IgA、IgG、IgM、CRP等。正常血清蛋白电泳(serumproteinelectrophoresis,SPE)正常参考值:Alb:57%-68% α1:1.0%-5.7% α2:4.9%-11.2%

5、 β:7%-13% γ:9.8%-18.2%2.功能分类法运输载体类补体蛋白类血清酶类血浆蛋白质蛋白酶抑制物免疫球蛋白凝血蛋白类蛋白类激素运输载体类:血浆脂蛋白前清蛋白和清蛋白甲状腺素结合球蛋白皮质素结合球蛋白视黄醇结合蛋白转铁蛋白结合珠蛋白血色素结合蛋白铜蓝蛋白补体蛋白类补体蛋白CB因子D因子备解素P因子又称备解素(properdin),是替代途径中除C3以外最先发现的一种血浆蛋白。现已探明,P因子以聚合体形式而存在:即三聚体(54%)、二聚体(26%)和四聚体(20%)都有,但特异活性的顺序依次为:四聚体>三聚体>二聚体。P因子为由4条相同的肽链(分子量各55k

6、Da)组成的四聚体分子,链间以非共价键相连接,分子量为220kDa。P因子的生物学活性是以高亲和力与c3bBb和C3bnBb相结合,结合后通过发生构象改变而加固C3b与Bb间的结合力,从而可使其半衰期由2分钟延长至26分钟。另外,P因子还可封闭H因子的抑制作用,更增加了上述两种酶的稳定性及活性,有利于促进替代途径级联反应的继续进行。因此,P因子实际上是替代途径中的一个重要的正调节分子。因其常成为c3bBb和C3bnBb复合物中的组成成分之一,故将其作为补体系统的固有成分在此一并描述。此外,在膜增生性肾小球肾炎病人血清中发现有一种C3肾炎因子(C3nephriticf

7、actor,C3NeF)实际为C3bBb的自身抗体,也可与C3bBb结合而增加c3bnBb的稳定性,使其半衰期处长10-30倍。凝血蛋白类:14个凝血因子中的13个均为蛋白质。免疫球蛋白:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE蛋白酶抑制物A1-抗胰蛋白酶(a1-AT)A1-抗糜蛋白酶(a1-ACT)A2-巨球蛋白(a2-MG)血清酶类:血浆固有酶LCAT、脂蛋白酯酶、凝血酶原、纤溶酶等蛋白类激素胰岛素、胰高血糖素、生长素等3、血浆蛋白质的功能:⑴营养:其中的氨基酸⑵缓冲与胶体渗透压:维持血液渗透压⑶运输:类固醇、甲状腺激素、维生素A、D、脂类、金属、微量元素、药

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