实验16骨骼肌单收缩的分析收缩的总和与强直收缩

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1、实验16骨骼肌单收缩的分析收缩的总和与强直收缩基础生物学实验(三)一、实验目的1、观察骨骼肌单收缩过程。分析骨骼肌单收缩的3个时期。比较直接刺激肌肉与刺激支配肌肉的神经,其收缩曲线有何不同。2、了解骨骼肌收缩的总和现象。观察不同频率的阈上刺激引起肌肉收缩形式的改变。二、实验原理1、肌组织对于一个阈上强度的刺激,发生一次迅速的收缩反应,称为单收缩。单收缩的过程可分为3个时期:潜伏期;收缩期和舒张期。2、两个同等强度的阈上刺激,相继作用于神经—肌肉标本,如果刺激间隔大于单收缩的时程,肌肉则出现两个分离的单收缩;如果刺激间隔小于单收缩的时程而大于不应期,则出现两个收缩反

2、应的重叠,称为收缩的总和。当同等强度的连续阈上刺激作用于标本时,则出现多个收缩反应的叠加,此为强直收缩。当后一收缩发生在前一收缩的舒张期时,称为不完全强直收缩;后一收缩发生在前一收缩的收缩期时,各自的收缩则完全融合,肌肉出现持续的收缩状态,此为完全强直收缩。三、实验材料与仪器1、蟾蜍(或蛙)的坐骨神经—腓肠肌标本、常用手术器械、计算机采集系统、支架、双凹夹、肌槽、不锈钢盘或培养皿、神经屏蔽盒、滴管、任氏液、橡皮泥、棉线。四、实验方法1、制备蛙或蟾蜍坐骨神经干标本。2、实验装置的连接将神经屏蔽盒与计算机连接,屏蔽盒的地线良好接地。3、仪器的操作和实验参数的设置(1)

3、本实验在Windows界面的PcLab平台下进行,打开PcLab。(2)采样窗参数的设置点击快捷工具栏上的“采样条件设置”快捷按钮,打开“采样条件设置”窗口,“显示模式”为“记忆示波”,“采样间隔’’为25/ls,“触发方式”为刺激器触发,“采样窗口”为2通道。将采样窗右侧显示控制区的参数设置为“通用(mV)”,“全通”设置为10kHz。(3)刺激参数的设置选取“主周期刺激”设定刺激参数。选择刺激模式为“主周期”方式,刺激器参数为1,波宽(ms):0.1,幅度(v):0.1—2(根据刺激需要调节),间隔(ms):50,延时(ms):1-20,根据显示需要调节),脉

4、冲数:1。4、将蛙的坐骨神经干标本置于屏蔽盒内的电极上,神经干的中枢端置于刺激电极一侧,从末梢端引导动作电位。5、实验观察与记录点击“开始”按钮,采样窗开始扫描,再点击“刺激”按钮,刺激所产生的生物电信号即显示在采样窗上。如果刺激中途需要停止,则点击“停止”按钮。如果需要改变y轴的生物信号波幅,将鼠标箭头移至采样窗的右侧显示控制区,到上方时,则出现“放大图形”,到下方时,则出现“压缩图形”,用鼠标每点击一次,可使生物电信号图形成比例地放大或缩小一次。也可点击采样窗最左侧的“左显示控制区”按钮,改变放大器增益。如果需要改变x轴的生物信号的波形宽度,则用鼠标点击“X轴

5、显示控制区”的“横向扩展曲线”或“横向压缩曲线”,以使生物信号图形显示至最佳需要状态。(1)神经干兴奋阈值的测定刺激强度从0.1V开始,逐渐增加刺激强度,当刚刚出现动作电位时的刺激强度,即为神经干的兴奋阈值。(2)双相动作电位在刺激阈值的基础上逐渐加大刺激强度,可见动作电位的图形为双相,而且其幅值随刺激强度增大而加大。当刺激增加到一定强度时,可见动作电位的幅值不再增大。(3)动作电位参数的测量用鼠标点击“快捷工具栏”的“观察”,移动鼠标,测出动作电位的一系列参数。(4)单相动作电位在两个引导电极之间损伤神经干标本,即可使原来的双相动作电位的下相消失,变为单相;注意

6、上相动作电位的图形有什么变化。6、开启计算机采集系统,连接张力传感器(100g)与刺激输出。将标本的骨头固定在肌槽的骨头固定孔内,腓肠肌肌腱上的扎线与张力传感器应变梁相连,调节好扎线的张力,不可过松或过紧,以使肌肉自然拉平为宜(保证肌肉一旦收缩,即可牵动张力传感器的应变梁)。将神经搭在肌槽的电极上,接通电极与刺激输出的线路。7、实验观察(1)收缩的总和启动波形显示图标,调节扫描速度为5—10mm/s,调节单收缩幅度为1.5cm左右。调节刺激设置为双刺激方式,并使两个阈上刺激强度相等。先调节刺激间隔大于单收缩的时程,然后逐渐缩短刺激间隔,分别观察并记录肌肉收缩形式的

7、变化(2)强直收缩减慢扫描速度(5mm/s)并衰减振幅增益,使单收缩的幅度减小至3~5mm。调节刺激设置为串刺激方式,分别以1.5次/s(串长为5)、6次/s(串长为10)、10次/s(串长为20)、30次/s(串长为35)和45次/s(串长为50)的频率刺激标本,观察并记录肌肉收缩曲线的变化。注意用任氏液湿润标本,两次刺激之间稍有间歇,使肌肉休息片刻。五、注意事项1、实验过程中注意保持标本的活性良好,经常用任氏液湿润之。2、如果在显示窗上发现动作电位图形倒置,将引导电极位置对换即可。六、作业1、本实验的潜伏期是指什么?时间如何计算?其中包括哪些时间因素及生理过程

8、?2、刺激

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