高效液相色谱测定丹参滴注液中丹酚酸b含量

《高效液相色谱测定丹参滴注液中丹酚酸b含量 》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、高效液相色谱测定丹参滴注液中丹酚酸B含量税丕先庄元春何兵朱烨【摘要】目的建立一种用高效液相色谱（HPLC）法测定丹参滴注液中丹酚酸B的含量的方法。方法色谱柱DikmaKromasilC18(5μm,100A250mm×4.6mm)；流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59)；流量为0.8ml·min-1；检测波长286nm；柱温30℃；进样量20μl。结果丹酚酸B的加样提取平均回收率为99.03％，RSD为1.02％，重复性实验的RSD为1.8l％。结论该方法简便可靠，结果稳定，重复性好，该方法可用于测定丹参滴注液中丹酚酸B的含量。【关键词】丹酚酸B

2、含量测定高效液相色谱法丹参滴注液丹参滴注液收载于国家中成药标准汇编内科心系分册，由丹参中提取的水溶性化合物总丹酚酸制得。总丹酚酸具有抗肝纤维化、抗动脉粥样硬化和改善记忆功能障碍等作用〔1〕，由丹参素、丹酚酸A、B、E，原儿茶醛等各种芳香酚酸类化合物组成。丹参滴注液标准中对丹参素钠、原儿茶醛进行了高效液相色谱含量测定，对其中含量高、活性强的丹酚酸B未进行含量测定。我们参照有关文献〔2，3〕，用高效液相色谱柱测定丹参滴注液中丹酚酸B的含量，取得满意效果。　　1器材　　1.1仪器与试药戴安高效液相色谱仪（P680A四元泵，PDA-100二极管阵列检测器，TCC-10

3、0柱温箱，Chromeleon色谱工作站）。丹酚酸B对照品(中国药品生物制品检定所提供。批号：111562-200302)，丹参滴注液（安徽华源生物药业有限公司生产。规格：250ml，16g。批号：061112，061115，061118，061120，061201)。甲醇、乙腈为色谱纯(天津四友公司)，水为重蒸馏水，甲酸为分析纯。　　1.2色谱条件DikmaKromasilC18(5μm,100A250mm×4.6mm)；流动相：甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59)；流量：0.8ml·min-1；检测波长286nm；进样量20μl。　　2方法与结果　

4、　2.1溶液的配制　　2.1.1对照品溶液的配制取丹酚酸B对照品约5mg，精密称定，置50ml量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，得10mg·L-1的对照品溶液。　　　　2.1.2供试品溶液的配制精密量取丹参滴注液(批号061112)10ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。　　2.1.3阴性样品溶液的制备按丹参滴注液制备方法和“2.1.2”项制得不含丹参的阴性对照品溶液，备用。　　2.2测定方法精密吸取上述供试品溶液与对照品溶液各20μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算样

5、品的含量。　　2.3方法学验证　　2.3.1标准曲线的制备精密称取丹酚酸B对照品适量，配成1g·L-1的标准储备液；分别吸取10，20，40，80，100μl分别置于5个1ml量瓶中，以水稀释至刻度，混匀后分别进样20μl，记录色谱图见图1。以色谱峰面积(A)对成分浓度(C)作回归统计，回归方程为：A=-9863.5+13282.6C，r=0.9896，线性范围12.56～142.40mg·L-1。　　2.3.2稳定性考察与精密度实验取浓度为812.64mg·L-1的供试品溶液分别在0，2，4，6，8h进样，测得丹酚酸B供试品的峰面积RSD为1.06％，表明供

6、试品溶液在8h内稳定。取某一浓度(812.64mg·L-1)供试品溶液，连续进样5次，测得进样精密度RSD为0.97％。　　2.3.3重复性实验取同一批号的丹参滴注液6份，按上述方法操作，测定丹参滴注液中丹酚酸B的含量，RSD为1.81％。结果表明重复性良好。　　a²对照品b²空白c²丹参滴注液1.丹酚酸B　　图1HPLC图（略）　　2.3.4加样回收率实验取同一批号丹参滴注液(含量为812.6mg·L-1)6份，每份约10ml，精密量取，分别加入丹酚酸B对照品适量，精密称定，按含量测定方法测定，计算回收率(见表1)。可见，丹酚酸

7、B的平均回收率为99.03％(RSD=1.02％)，符合分析方法的要求。　　表1加样回收率实验结果（略）　　2.4样品含量测定取批号分别为061112，061115，061118，061120，061201的丹参滴注液适量，按“2.2”项下操作，测得丹酚酸B的含量见表2。　　表2样品含量测定（略）　　3讨论　　3.1溶剂的选择本实验比较了丹酚酸B在50％甲醇与水中的稳定性，结果均在8h内稳定，而因水价廉易得，故选用水为溶剂。　　3.2色谱条件的选择《中国药典》2005版，丹参片质量标准提供的色谱条件中，色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。根据单位实际情况，

8、采用不同比例的甲醇-水、甲醇-水-甲酸