高效液相色谱法测定余甘子药材中槲皮素的含量

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1、高效液相色谱法测定余甘子药材中槲皮素的含量【摘要】　　目的建立余甘子药材中槲皮素含量测定的方法。方法HPLC法测定槲皮素含量。色谱柱为SHIMADZUVP-ODS(5μm，250mm×4.6mm)，保护柱为大连中汇达C18，流动相：甲醇-0.4％磷酸溶液(含2.4g·L-1庚烷磺酸钠)(50∶50)，流速1.0ml·min-1，检测波长373nm。结果进样量在0.02～0.20μg范围内与色谱峰的峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997)，余甘子药材平均加样回收率为97.3%，RSD为0.99%(n=6)。结论该方法操

2、作简便、快速，有良好的精密度和准确性，可用于余甘子药材的质量控制。【关键词】余甘子；槲皮素；高效液相色谱法　　AbstractObjectiveToestablishamethodfordeterminationofthecontentofquercetininPhyllanthusemblicaL..MethodsQuercetininedbyhighperformanceliquidchromagraphy(HPLC)．ADZUVP-ODS(5μm,4.6mm×250mm)column,amixtureofmeth

3、anoland0.4％H3PO4（obilephase,theflol·min-1andUVdetection．ResultsThelinearrelationshipedicinalplantPhyllanthusethodisfast，simple，accurateandreproducibleandcanbeusedforthequalitycontrolofPhyllanthusemblicaL.　　KeyblicaL.；Quercetin；HPLC余甘子为大戟科叶下珠属(Phyllanthus)植物余甘子Ph

4、yllanthusemblicaL.的干燥成熟果实。《云南省药品标准》《藏药标准》《中国药典》均收载。别称滇橄榄、橄榄、油甘子、望果；藏药称“久如拉”，傣药称“麻项帮”；古印度梵语称“庵摩勒”。在云南地区常作橄榄使用，还是藏族习用药材。味酸、甘、涩，主要用于治疗胃痛、肠炎、黄疸型肝炎、淋巴结核、高血压病等。研究表明余甘子具有抗氧化、抗癌、抗病毒、降血脂等作用〔1〕。余甘子主要含没食子酸(Gallicacid)；鞣花酸(Ellagicacid)；1-O-没食子酰基-β-D葡萄糖；3，6-二-O-没食子酰基-D-葡萄糖；诃

5、子酸(Chebulinicacid)；槲皮素(Quercetin)；诃黎勒酸(Chcbtllagicacid)；鞣料云实精(Corilagin)；3-乙基没食子酸(3-ethoxy-4，5-dihydroxy-benzoicacid)等，其中槲皮素主要以槲皮苷的形式存在。余甘子还含有大量维生素C(1.0%～1.8%)，且含量稳定〔2〕。本实验采用高效液相色谱法测定余甘子药材中槲皮素的含量。　　1仪器与试药岛津LC-20AT高效液相色谱仪、SPD-20A紫外检测器、CBM-102色谱数据处理机；槲皮素对照品由中国药品生物

6、制品检定所提供，甲醇、庚烷磺酸钠为色谱纯，其它试剂均为分析纯，水为纯净水。　　余甘子药材产地为云南省新平县平甸乡，春季采收干燥。经作者鉴定为大戟科叶下珠属植物余甘子PhyllanthusemblicaL.的果实。　　2方法与结果　　2.1色谱条件　　SHIMADZUVP-ODS(5μm，250mm×4.6mm)色谱柱，大连中汇达C18保护柱，甲醇-0.4％磷酸溶液(含2.4g·L-1庚烷磺酸钠)(50∶50)，流速1.0ml·min-1；柱箱温度35℃，紫外检测波长373nm，在上述条件下，样品中槲皮素与其它峰分离度大

7、于2.0，理论塔板数达10000以上，槲皮素峰拖尾因子在1.05～1.18之间，且样品中其它组分色谱峰无干扰，见图1。　　2.2对照品溶液的制备　　取槲皮素对照品适量，精密称定，用甲醇溶解，制成含槲皮素0.010mg·ml-1的对照品溶液。　　2.3供试品溶液制备　　取余甘子粉末(过40目筛)约5g，精密称定，加入250ml甲醇，加热回流1.5h，回收甲醇，残渣精密加入甲醇-5%盐酸溶液(4∶1)的混合液25ml，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，过0.45μm

8、滤膜〔3,4〕，即得。　　2.4标准曲线与线性范围　　精密吸取槲皮素对照品溶液2，4，6，10，14，20μl进样测定，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积为纵坐标，进样质量数(μg)为横坐标，进行线性回归计算，得回归方程：Y=53819X-45028(r=0.9997)，在0.02～0.20μg范围内槲皮素有良好的线性关系。　　2