酸性染料比色法测定苦参药材中总生物碱的含量

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1、酸性染料比色法测定苦参药材中总生物碱的含量【关键词】酸性染料比色法　苦参碱　含量测定AbstractObjective：ToestablishamethodtodeterminetotalalkaloidsinradixSophoralavescensbyaciddyecolorimetry．Methods：totalalkaloidsofradixSophoralavescenshydroxidesolution,dissolvedixedothymolsolutionandchloroform，andthenthemixtureixed

2、，theabsorbabilityofchloroformlayer．Results：Thedetectionconcentrationofmatrineshog/mL～0.20mg／mL(r=0.9992)，theaveragerecoverydifferentsourceinedethod.Conlusion：Theestablishedmethodissimpleandaccurate，etry；Matrine；Contentdetermination中药苦参是豆科植物苦参SophoraflavescensAit.的干燥根，所含有的生

3、物碱是苦参药理作用的主要有效成分，具有抗炎、抗肿瘤、镇痛、抗心律失常、平喘、镇咳、杀菌等作用［１，２］。生物碱含量的多少是评价苦参药材质量好坏的重要指标之一。酸性染料比色法常用于制剂中生物碱的含量测定［３～5］，采用酸性染料比色法，以苦参碱为对照品，对不同产地的苦参中的总生物碱成分，进行了含量测定，建立了苦参药材中总生物碱含量的测定方法，为苦参药材的质量控制提供了科学依据。1仪器与试药756PL（IV）紫外可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；PHS-4CT型数字酸度计（上海康仪仪器有限公司）。苦参碱标准品（中国药品生物制品检定所），溴代

4、麝香草酚蓝和其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1对照品溶液的制备准确称取苦参碱标准品适量，加50%乙醇制备成浓度为1mg/mL的对照品溶液，备用。2.2标准曲线的绘制及测定方法将“2.1”项下苦参碱对照品溶液稀释至20μg/mL，各准确量取1mL、2mL、3mL、4mL、5mL，置于干燥的具塞三角瓶中，各加水至5mL，分别加入pH=7.6缓冲液5mL,再依次精密加入0.025%溴麝香草酚蓝标准液1.0mL，氯仿10.0mL，振摇1min，倒入50mL分液漏斗放置分层，静置1h，分取氯仿层。用分光光度计扫描、测定，结果显示，苦参碱与溴代麝香

5、草酚蓝形成的复合物在413nm波长处有最大吸收峰，故选择413nm为测定波长。另以同法操作(不加苦参碱对照品溶液)的氯仿为空白在413nm波长处测定吸收度。以浓度(C)为横坐标，吸收度(A)为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程C=5.362X-0.012(γ=0.9992)，结果表明，苦参碱检测浓度在0.004mg/mL～0.02mg／mL范围与吸收度线性关系良好。2.3稳定性实验取20.0μg/mL对照品溶液3.0mL按2.2方法制备标准品供试液和空白对照液，在波长413nm处进行测定。并在室温下每隔1h测定1次含量，连续测定8次，结果表明

6、，待测液在8h内稳定，其RSD=0.47%(n=8)。2.4精密度实验取20.0μg/mL标准对照液3.0mL，按2.2下方法制备标准品供试液和空白对照液，在413nm波长处测定，重复测定5次。结果RSD=0.23%。表1中药材苦参含量测定结果批次产地总生物碱含量(mg/g)1河北安国1.032安徽亳州2.263山西长治1.892.6苦参总生物碱的含量测定　将三种不同产地的苦参药材粉碎后，分别精密称取干燥至恒重的通过60目筛的生药粉0.1550g,加0.1%盐酸10mL,冷浸4h后，超声提取1h，滤过，滤液用1mol/L氢氧化钠溶液调节至中

7、性，取调节至中性的滤液5.0mL置分液漏斗中，依次精密加入pH=7.6缓冲溶液5mL、0.025%溴麝香草酚蓝标准液1.0mL，氯仿10.0mL，振摇1min，放置分层，静置1h，分取氯仿层。在413nm波长处，以不加药材，同法操作的氯仿为空白，测定吸光度。将测得的吸光度值代入标准曲线可以计算求得苦参药材中生物碱的含量。3讨论3.1由于苦参药材含有的生物碱成分都易溶于酸水溶液，因此在药材含量测定中采用0.1%盐酸作为提取液，冷浸结合超声提取的方法，可以保证生物碱成分的提取完全。3.2本实验采用酸性染料比色法，是根据在一定pH介质中，生物碱类

8、与氢离子生成阳离子，一些酸性染料在此条件下可解离成阴离子而与上述阳离子定量结合成有色络合物，可被有机溶剂定量提取的原理，用苦参碱作为标准物质在pH=7.60的条件下与溴麝香草酚蓝