脱氢表雄酮对内皮细胞no, et

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1、脱氢表雄酮对内皮细胞NO,ET【关键词】内皮缩血管肽　　【Abstract】AIM:ToinvestigatetheinfluenceofdehydroepiandrosteroneonthesynthesisofNO,secretionofET1andtheexpressionofICAM1inendothelialcells.METHODS:TheculturedhumanumbilicalveinendothelialcellsECV304ediumetricmethodandradioimmunoassay.ThesurfaceexpressionofICAM1oncellsmunoh

2、istochemically.RESULTS:Inparisonediumdecreasedfrom(387±12)to(242±11)μmol/L(P<0.05),buttheconcentrationofET1inmediumincreasedfrom(397±13)to(626±29)ng/L(P<0.05)alongediumofcontrolgroupilarateverytimepoint（P>0.05）,butDHEAtimedependentlydecreasedthecontentofNO(P<0.05).TheconcentrationofET1in

3、mediumtimedependentlyincreasedbothincontrolgroupandinDHEAgroup(P<0.05),anditenttime,DHEAdidnotaffecttheICAM1expression.CONCLUSION:DHEAcanadjustthefunctionofvesselsbyregulatingtheproductionofNOandET1ofendothelialcells.　　【Keyolecule1　　【摘要】目的：观察脱氢表雄酮对内皮细胞NO合成、ET1分泌及细胞表面ICAM1表达的影响.方法：培养的人脐静脉内皮细胞系ECV3

4、04经不同浓度和不同作用时间DHEA处理后，采用硝酸还原酶及放免法分别测定培养液中NO及ET1水平,用SABC免疫组化法观察细胞表面ICAM1的表达.结果：与对照组相比,随着DHEA浓度的增加，培养液中NO的含量从(387±12)降至(242±11)μmol/L(P<0.05),而ET1的浓度却从(397±13)增至(626±29)ng/L(P<0.05).随着时间的延长，各对照组培养液中NO含量均无明显变化（P>0.05），而DHEA组NO生成量却逐渐降低(P<0.05)，呈时间依赖.培养液中ET1浓度无论是对照组还是DHEA组均随时间的延长而升高(P<0.05

5、），但DHEA组升高的更为明显.无论是增加浓度还是延长时间,DHEA均不影响细胞表面ICAM1的表达.结论：DHEA可通过调节内皮细胞NO及ET1生成量对血管功能进行调控.　　【关键词】脱氢表雄酮；ECV304细胞；一氧化氮；内皮缩血管肽1；胞间粘附分子1　　0引言　　血管内皮细胞的损伤及功能改变在动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发生中意义重大.脱氢表雄酮（dehydroepiandrosterone,DHEA）是性激素合成过程的中间产物，主要由肾上腺皮质网状带分泌，是血浆中浓度最高的类固醇激素.研究表明，DHEA可能是人体的一种内源性抗AS因子［1,2］，因而具有治疗及

6、预防AS的应用前景.但目前对其作用机制知之甚少.我们采用培养的人脐静脉内皮细胞系ECV304，观察脱氢表雄酮对其一氧化氮（NO）、内皮素1（ET1）生成水平及细胞表面细胞间黏附分子1（ICAM1）表达的影响，以期从内皮细胞的角度说明DHEA的抗AS作用，并为从性激素稳态角度探讨男性内源性抗AS机制提供依据.　　1材料和方法　　1.1材料　　ECV304人脐静脉内皮细胞系购自中科院协和基础研究所；RPMI1640培养基购自Gibco公司，胰蛋白酶及DHEA均来自Sigma公司；NO含量试剂盒购自南京建成生物工程研究所,ET1含量试剂盒购自解放军总医院科技开发中心放免所，SABC免疫酶标试剂盒购自

7、武汉博士德生物工程有限公司，其他相关试剂均为国产分析纯.　　1.2方法　　1.2.1细胞培养细胞经2g/L胰蛋白酶与0.2g/LEDTA的消化液消化后，用含100mL/L新生小牛血清的RPMI1640培养液制成细胞悬液，接种在培养瓶内，置于50mL/LCO2的培养箱中37℃培养，每2～3d更换培养液，生长融合的细胞，经消化后进行传代培养.　　1.2.2NO及ET1水平的测定生长良好的内皮细胞经消化